重组四因子体外维持cESCs多能性和自我更新以及Lin28对cESCs染色质重塑维持和细胞周期进程的影响

发布时间：2021-04-28 21:52

　　胚胎干细胞（Embryonic stem cell, ESC）的研究在发育生物学,医药学,和农业生物技术领域里一直占据着极其显著的位置。但除小鼠（mouse Embryonic stem sell, mESC）和人类的胚胎干细胞（human Embryonic stem sell, hESC）外,畜禽种类ESC的研究进展非常缓慢,特别是鸡的ESC（chicken Embryonic stem cell, cESC）,至今尚没能建立起一个操作简便状态稳定且高可重复性的cESC体外长期传代培养细胞系。诱导多能性干细胞（induced pluripotency stem cell, iPSC）为ESC研究开辟了全新的方向,在去分化和重编程过程中发挥核心作用的多能性转录因子成为理解和阐述ESC多能性维持分子机制的新的切入点。本研究借鉴iPSC的研究成果首次将多能性转录因子以外源表达融合蛋白的形式应用于cESC体外培养。四种鸡源多能性转录因子的CDS序列被完整地克隆,cPOUV, cSox-2, cNanog,和cLin28,并以重组蛋白的形式表达,重组多能性蛋白的羧基端连接有一个连续的9个精氨... 

【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 胚胎干细胞综述
    1.2 鸡胚胎干细胞综述
    1.3 iPSC研究综述
    1.4 Lin28对ESC表观遗传学修饰的影响
    1.5 研究目的与意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验设计与技术路线
    2.3 实验方法
    2.4 实验操作步骤
第三章 结果
    3.1 连续的9个精氨酸高效引导重组蛋白进入体外培养细胞
    3.2 重组多能性蛋白体外表达检测
    3.3 四种重组多能性蛋白在体外培养中抑制cESCs分化并使其增殖至3代
    3.4 重组多能性蛋白与UF和bFGF结合可使cESCs在体外增殖7代并维持多能性特征
    3.5 多能性和端粒酶活性在体外培养6代的cESCs仍得到维持
    3.6 重组Lin28蛋白添加数量的增加使体外培养的cESCs获得10代增殖并维持多能性特性
    3.7 Lin28通过影响细胞周期和染色质重塑相关基因的表达维持cESC的多能性
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
作者简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Research of blastocyte-like structure in chicken[J]. LI Jia1, PAN Qiuzhen1, LI Junying1, HAN Hongbing1, SUN Shufeng1, YANG Jun1, XU Shuguang, TIAN Liang, LIAN Zhengxing1,2, YANG Ning1,2 & LI Ning2,3 1. College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100094, China; 2. Laboratory of Animal Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100094, China; 3. State Key Laboratory of Agrobiotechnology, Beijing 100094, China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(05)



本文编号：3166236