禽白血病p27阳性及临床血管瘤型病鸡的病毒分离与鉴定

发布时间：2021-04-29 01:56

　　禽白血病（avian leukosis, AL）是由禽白血病病毒（avian leukosis virus, ALV）和禽肉瘤病毒（avian sarcoma virus, ASV）引起的禽类的各种良性和恶性肿瘤的统称。近年来,我国各省均有ALV感染鸡的报道,而且出现新的病变型-血管瘤型禽白血病的病例,特别是皮肤血管瘤的发生率很高,给我国的养禽业造成了巨大的经济损失。本研究收集蛋清或泄殖腔拭子经ALV p27抗原ELISA检测为阳性的33只鸡,分别采集其全血、血清、血浆、泄殖腔拭子、心、肝、脾、肺、肾、胰、腺胃、卵巢（或睾丸）、输卵管、胸腺、骨髓和皮肤瘤16种不同的材料。首先对组织病料直接进行PCR的检测；然后将处理好的全部材料接种于DF-1细胞,连传两代；再分别用ELISA和PCR两种方法对F1代和F2代的细胞培养物进行检测,目的在于对不同检测方法的结果进行比较,以筛选出临床上最适合分离ALV的材料。利用上述实验验证的方法,对临床上表现为明显血管瘤症状的16只鸡进行病毒的分离与鉴定,并对获得的ALV-J分离株进行env基因序列的测定和分析。研究结果表明：1、本研究所选取的16种材料中... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 禽白血病及其病原的研究进展
    1.1 病原学
        1.1.1 分类与分群
        1.1.2 形态及理化特性
        1.1.3 基因组结构
        1.1.4 组织嗜性
    1.2 血管瘤型禽白血病研究进展
        1.2.1 历史与分布
        1.2.3 流行病学
        1.2.4 临床症状
        1.2.5 病理变化
    1.3 ALV的检测方法
        1.3.1 病毒的分离与鉴定
        1.3.2 血清学检测方法
        1.3.3 分子生物学检测方法
    1.4 禽白血病的防控
        1.4.1 种群的净化
        1.4.2 疫苗污染的监控
        1.4.3 生物安全措施
    1.5 本研究的目的和意义
第二章 p27阳性鸡不同材料病毒分离的比较研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 常用试剂的配制
        2.1.4 引物的合成
        2.1.5 样品的采集
        2.1.6 病料总DNA直接PCR
        2.1.7 不同材料的病毒分离
    2.2 结果与分析
        2.2.1 病料总DNA直接PCR检测结果
        2.2.2 不同材料病毒分离的结果
        2.2.3 不同检测方法的阳性率比较
    2.3 小结与讨论
第三章 临床血管瘤型病例病毒的分离与鉴定及基因序列分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要仪器
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 试剂的配制
        3.1.4 引物的合成
        3.1.5 病料的采集
        3.1.6 病毒的分离
        3.1.7 病毒的鉴定
        3.1.8 env基因的测定
    3.2 结果与分析
        3.2.1 血管瘤病鸡的临床症状和剖检变化
        3.2.2 病毒的鉴定结果
        3.2.3 五株血管瘤型ALV-J env基因测定结果与分析
    3.3 小结与讨论
第四章 结论
参考文献
致谢
读硕士学位期间论文发表情况



本文编号：3166608