牛病毒性腹泻病毒复制相关宿主细胞环状RNA的筛选

发布时间：2021-05-17 22:21

　　为了明确环状RNA（circRNA）在牛病毒性腹泻病毒（BVDV）复制中的作用,用BVDV NADL感染牛肾细胞（MDBK）并进行高通量测序分析,结果获得大量差异表达circRNA,对高通量测序数据进行筛选,共获得了12个上调的circRNA,通过RNase R消化、荧光定量PCR验证及通路分析,初步认为circ-0027407具有抑制病毒复制的可能性。在RNA干扰试验中,设计的干扰片段显著降低了circ-0027407的表达量,降低幅度约为66.1%,使用干扰载体转染MDBK细胞后感染病毒,发现干扰circ-0027407会显著增加病毒复制,提高了约113.2%。说明circ-0027407对BVDV感染有抑制作用。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(09)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞与病毒
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 主要仪器
    1.2 方法
        1.2.1 MDBK细胞培养
        1.2.2 BVDV扩增
        1.2.3 circRNA筛选与引物设计
        1.2.4 circRNA鉴定
        1.2.5 RNA干扰
        1.2.6 TCID50测定
2 结果
    2.1 circRNA鉴定
    2.2 circ-0027407干扰片段的验证
    2.3 BVDV NADL感染MDBK细胞病毒复制与时间的关系
    2.4 干扰circ-0027407对病毒复制的影响
3 讨论



本文编号：3192553