Ghrelin在绵羊颗粒细胞拟黄体化过程中的作用
发布时间：2021-05-19 02:39
Ghrelin（促生长激素释放肽）是1999年被日本科学家Kojima等发现的一种由28个氨基酸组成的脑肠肽,是生长激素促分泌素受体（Growth hormone secretagogue, GHS）的天然配体。Ghrelin在体内广泛分布决定了其功能的多样性,因此目前已经成为人们研究的重点。黄体是由排卵后的膜黄体细胞和颗粒黄体细胞转化而来的。黄体在形成过程中伴随着很多生物学和分子生物学变化,在LH峰之后排卵之前,合成孕酮所需要的酶细胞色素P450侧链裂解酶（P450scc）和3p类固醇脱氢酶（3β-HSD）的mRNA表达暂时性降低。排卵后和黄体化期间则其mRNA和酶的活性升高,孕酮产量增加,且甾类激素合成灵敏调节蛋白（StAR）的出现与孕酮（P4）的合成在时空上有一致性,因此P4、P450scc、3β-HSD、StAR是黄体形成的标志。为了初步了解Ghrelin在颗粒细胞拟黄体化过程中的作用,我们通过体外培养绵羊卵泡颗粒细胞后进行不同浓度激素调控,建立体外培养颗粒细胞向黄体细胞分化的体系,结果发现联合LH（2.5IU/ml）、FSH（2.5IU/ml）、E2（1ug/mL）组在24h...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 Ghrelin的研究概况
1.2 Ghrelin的发现
1.3 Ghrelin的结构域分布
1.4 Ghrelin受体(GHS-R)及其分布
1.5 Ghrelin的生理作用
1.5.1 Ghrelin对生长激素的影响
1.5.2 Ghrelin对学习和记忆的影响
1.5.3 Ghrelin对胃黏膜的影响
1.5.4 Ghrelin对心血管的影响
1.5.5 Ghrelin对细胞凋亡的影响
1.5.6 Ghrelin对肥胖的影响
1.5.7 Ghrelin对生殖激素的影响
1.6 卵泡颗粒细胞及其卵泡发育过程
1.7 黄体的发生
1.7.1 黄体的来源
1.7.2 黄体形成过程主要的激素调节
1.7.3 黄体化生物学变化
1.8 本研究的目的及意义
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.2.1 颗粒细胞拟黄体化培养
2.2.2 Ghrelin在黄体形成过程中的作用
2.3 数据统计
3 结果分析
3.1 颗粒细胞的培养
3.2 不同浓度的激素对颗粒细胞分泌孕酮的影响
3.3 确定卵泡上颗粒细胞模拟黄体化成功与否
3.4 黄体化颗粒细胞细胞总RNA提取检测
3.5 荧光定量PCR检测结果
3.5.1 荧光定量PCR产物的扩增曲线及溶解曲线
3.5.2 荧光定量RT-PCR产物的扩增效率曲线
3.5.3 黄体化标志基因qPCR产物的电泳检测及测序结果
3.5.4 黄体化标志基因表达量的测定
3.5.5 Ghrelin在黄体化形成过程中的作用
4 讨论
4.1 颗粒细胞的体外培养
4.2 颗粒细胞黄体化培养
4.3 Ghrelin对黄体化标志基因的影响
5 结论
致谢
参考文献
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]人卵泡颗粒细胞的原代培养与鉴定[J]. 孙艳,杜生荣,张文昌. 福建医科大学学报. 2011(02)
[2]Ghrelin对大鼠心肌微血管内皮细胞的作用[J]. 王亚斌,孙冬冬,赵力,张铮,张荣庆,曹丰,王海昌. 心脏杂志. 2010(04)
[3]类固醇激素合成急性调节蛋白的研究进展[J]. 张育辉,李霞. 陕西师范大学学报(自然科学版). 2009(03)
[4]睾丸间质细胞中睾酮合成酶及蛋白表达的调控因子[J]. 孙佳音,应锋,韩晓冬. 生殖与避孕. 2009(01)
[5]Ghrelin对大鼠十二指肠肌电活动的影响及作用机制[J]. 王燕,董蕾,邹百仓,李慧鹏. 中南大学学报(医学版). 2008(02)
[6]小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养[J]. 王妍,赵晓娥,杨培先,张仕强,苏利红,马保华. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2007(08)
[7]颗粒细胞的增殖分化及其在卵泡发育中的作用[J]. 卢翠玲,杨巍,胡召元,刘以训. 科学通报. 2005(21)
[8]体外培养人卵巢黄素化颗粒细胞的鉴定及其分泌功能变化[J]. 白晓红,糜若然,岳天孚,随笑琳,赵晓徽. 中华妇产科杂志. 2005(05)
[9]FSH和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响[J]. 高庆华,蒋超祥,韩春梅. 中国草食动物. 2004(04)
[10]卵泡分化排卵和黄体发生的分子基础[J]. 刘以训. 潍坊学院学报. 2002(06)
硕士论文
[1]绵羊生殖周期卵巢形态学特点的研究[D]. 毛文智.吉林农业大学 2007
本文编号：3194952
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 Ghrelin的研究概况
1.2 Ghrelin的发现
1.3 Ghrelin的结构域分布
1.4 Ghrelin受体(GHS-R)及其分布
1.5 Ghrelin的生理作用
1.5.1 Ghrelin对生长激素的影响
1.5.2 Ghrelin对学习和记忆的影响
1.5.3 Ghrelin对胃黏膜的影响
1.5.4 Ghrelin对心血管的影响
1.5.5 Ghrelin对细胞凋亡的影响
1.5.6 Ghrelin对肥胖的影响
1.5.7 Ghrelin对生殖激素的影响
1.6 卵泡颗粒细胞及其卵泡发育过程
1.7 黄体的发生
1.7.1 黄体的来源
1.7.2 黄体形成过程主要的激素调节
1.7.3 黄体化生物学变化
1.8 本研究的目的及意义
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.2.1 颗粒细胞拟黄体化培养
2.2.2 Ghrelin在黄体形成过程中的作用
2.3 数据统计
3 结果分析
3.1 颗粒细胞的培养
3.2 不同浓度的激素对颗粒细胞分泌孕酮的影响
3.3 确定卵泡上颗粒细胞模拟黄体化成功与否
3.4 黄体化颗粒细胞细胞总RNA提取检测
3.5 荧光定量PCR检测结果
3.5.1 荧光定量PCR产物的扩增曲线及溶解曲线
3.5.2 荧光定量RT-PCR产物的扩增效率曲线
3.5.3 黄体化标志基因qPCR产物的电泳检测及测序结果
3.5.4 黄体化标志基因表达量的测定
3.5.5 Ghrelin在黄体化形成过程中的作用
4 讨论
4.1 颗粒细胞的体外培养
4.2 颗粒细胞黄体化培养
4.3 Ghrelin对黄体化标志基因的影响
5 结论
致谢
参考文献
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]人卵泡颗粒细胞的原代培养与鉴定[J]. 孙艳,杜生荣,张文昌. 福建医科大学学报. 2011(02)
[2]Ghrelin对大鼠心肌微血管内皮细胞的作用[J]. 王亚斌,孙冬冬,赵力,张铮,张荣庆,曹丰,王海昌. 心脏杂志. 2010(04)
[3]类固醇激素合成急性调节蛋白的研究进展[J]. 张育辉,李霞. 陕西师范大学学报(自然科学版). 2009(03)
[4]睾丸间质细胞中睾酮合成酶及蛋白表达的调控因子[J]. 孙佳音,应锋,韩晓冬. 生殖与避孕. 2009(01)
[5]Ghrelin对大鼠十二指肠肌电活动的影响及作用机制[J]. 王燕,董蕾,邹百仓,李慧鹏. 中南大学学报(医学版). 2008(02)
[6]小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养[J]. 王妍,赵晓娥,杨培先,张仕强,苏利红,马保华. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2007(08)
[7]颗粒细胞的增殖分化及其在卵泡发育中的作用[J]. 卢翠玲,杨巍,胡召元,刘以训. 科学通报. 2005(21)
[8]体外培养人卵巢黄素化颗粒细胞的鉴定及其分泌功能变化[J]. 白晓红,糜若然,岳天孚,随笑琳,赵晓徽. 中华妇产科杂志. 2005(05)
[9]FSH和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响[J]. 高庆华,蒋超祥,韩春梅. 中国草食动物. 2004(04)
[10]卵泡分化排卵和黄体发生的分子基础[J]. 刘以训. 潍坊学院学报. 2002(06)
硕士论文
[1]绵羊生殖周期卵巢形态学特点的研究[D]. 毛文智.吉林农业大学 2007
本文编号：3194952
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