隐孢子虫AOX和TSP6核酸疫苗的制备及免疫保护性研究

发布时间：2021-05-31 23:21

　　旨在制备微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）线粒体蛋白（AOX）基因和微线体蛋白（TSP6）基因的DNA疫苗,评价其对贝氏隐孢子虫（Cryptosporidium baileyi）感染雏鸡的免疫保护性。根据GenBank库中AOX和TSP6基因的序列设计引物,扩增出编码2个保护性抗原基因的DNA片段,利用DNA重组技术将2个目的片段分别克隆到真核表达载体pVAX1,制成核酸疫苗pVAX1-AOX和pVAX1-TSP6。将制备的核酸疫苗肌肉注射免疫雏鸡,共分为4组,pVAX1组,pVAX1-AOX组,pVAX1-TSP6组,pVAX1-AOX+pVAX1-TSP6组,2周后检测雏鸡血清IgG抗体滴度和细胞因子（IL-4和IFN-γ）水平的变化。结果显示,免疫组中鸡的血清特异性IgG抗体水平、细胞因子IFN-γ都有明显的升高。攻卵囊试验结果表明,免疫组比对照组的排卵囊量明显减少,且排卵囊时间有所缩短。表明制备的pVAX1-AOX和pVAX1-TSP6核酸疫苗有较好的免疫保护作用。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(03)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

pVAX1-AOX和 pVAX1-TSP6的双酶切鉴定结果

鸡的血清IgG抗体水平变化情况(OD450 nm)

各组鸡攻C.baileyi卵囊后,每天收集粪便并检测卵囊数。结果表明,对照组在第6天开始排出少量的卵囊,而试验组在第7天才开始排卵囊。4组鸡在感染后10 d和15 d都出现2个排卵囊高峰,排卵时间一直持续到25 d。从排卵囊的量上比较,pVAX1-TSP6组鸡的排卵囊量显著低于pVAX1-AOX组(P<0.05);pVAX1-AOX+pVAX1-TSP6组鸡的排卵囊量与pVAX1-TSP6组无显著变化(P>0.05);pVAX1-AOX组鸡的排卵囊量相比pVAX1组也显著减少(P<0.05)。其中pVAX1-TSP6组的免疫保护效果最好(图5)。图4 IL-4和IFN-γ在感染鸡脾脏中的表达情况

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3209173