肉食品中氟苯尼考残留快速检测胶体金试纸条的研制

发布时间：2021-06-05 23:47

　　氟苯尼考是一种人工合成的高效广谱动物专用抗生素,常用于防治动物的各种细菌性疾病。但由于不规范使用和滥用,它在动物食品中会产生残留,并因此带来各种问题。为了保障食品安全问题,各国政府及监测机构均对氟苯尼考的使用和最高残留限量（MRL）都做了规定,因此,本研究旨在应用胶体金免疫层析原理,研制出氟苯尼考残留检测试纸条。1.氟苯尼考多克隆抗体的制备及其鉴定。本研究根据氟苯尼考的结构特性,采用戊二醛法设计出氟苯尼考的人工抗原（免疫原FFA-BSA和包被原FFA-OVA）,并用免疫原免疫BALB/C雌性小鼠,获得可用于检测氟苯尼考的特异性多克隆抗体。结果显示：经过紫外扫描鉴定,成功合成了人工抗原合FFA-BSA和FFA-OVA,偶联比分别为12：1和11：1。制备的抗体效价达1：32000以上,抑制率为50%（IC50）时的氟苯尼考浓度为369ng/mL,与其他抗生素交叉反应小。本试验制备的氟苯尼考多克隆抗体具有较好亲和力和高特异性,有良好的应用价值。2.氟苯尼考残留快速检测胶体金试纸条的研制。采用柠檬酸三钠还原法制备25nm胶体金,用制备的胶体金标记氟苯尼考的特异性抗体,用喷膜机把适量的金标抗体... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词中英文对照
上篇 文献综述
    1 氟苯尼考概述
        1.1 氟苯尼考的理化性质
        1.2 氟苯尼考的药理特性
            1.2.1 抗菌机理
            1.2.2 抗菌活性
            1.2.3 药代动力学研究
        1.3 氟苯尼考的应用
        1.4 氟苯尼考的残留及其危害
    2 氟苯尼考残留检测的研究进展
        2.1 微生物检测法
        2.2 理化分析法
            2.2.1 高效液相色谱法(HPLC)
            2.2.2 气相色谱法(GC)
            2.2.3 色质联用检测方法(LC-MS,GC-MS)
        2.3 免疫学方法
    3 胶体金免疫层析技术
        3.1 胶体金的性质和特点
        3.2 胶体金免疫层析原理及试纸条结构
        3.3 胶体金免疫层析技术的原理
        3.4 胶体金免疫层析试技术的应用
        3.5 胶体金免疫层析技术的前景展望
    4 研究目的和意义
    参考文献
下篇 试验研究
    第一章 氟苯尼考多克隆抗体的制备与鉴定
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验方法
        2 结果与分析
            2.1 紫外扫描结果鉴定
            2.2 人工抗原结合比
            2.3 最佳包被浓度的确定
            2.4 血清效价的测定
            2.5 抗体敏感性测定
            2.6 抗体交叉反应率的测定
        3 讨论
            3.1 氟苯尼考人工抗原的制备和鉴定
            3.2 氟苯尼考多克隆抗体的制备及鉴定
        4 小结
        参考文献
    第二章 氟苯尼考残留快速检测胶体金试纸条的研制
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验方法
        2 结果与分析
            2.1 胶体金质量的鉴定
            2.2 抗体pH的选择
            2.3 抗体最佳标记量的选择
            2.4 金标抗体的质量鉴定
            2.5 T线浓度的优化
            2.6 C线浓度的优化
            2.7 试纸条灵敏度的测定
            2.8 样品pH值的影响
            2.9 有机溶剂的影响
            2.10 干扰试验
            2.11 试纸条稳定性试验
        3 讨论
            3.1 胶体金的制备
            3.2 胶体金质量的鉴定
            3.3 金标抗体的制备
            3.4 试纸条材料的选择及其层析条件的优化
        4 小结
        参考文献
    第三章 胶体金免疫层析技术和液相色谱-质谱(LC-MS)法检测肉食品中氟苯尼考的残留
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验方法
        2 结果与分析
            2.1 LC-MS法条件优化
            2.2 LC-MS法精密度和准确度
            2.3 GICA法敏感性与可行性
            2.4 GICA法敏感性与可行性
        3 讨论
            3.1 LC-MS法对FF含量测定的应用
            3.2 GICA法对FF含量测定的应用
            3.3 LC-MS法和GICA法对FF含量测定的比较
        4 小结
        参考文献
全文结论
致谢
攻读硕士学位期间发表论文情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]甲霜灵、吡虫啉胶体金免疫层析试纸与色谱仪检测蔬菜农药残留比对试验分析[J]. 袁宝凤,亢欢虎,王丽,刘永辉.  陕西农业科学. 2013(05)
[2]胶体金免疫层析技术在兽医检测中的应用及其展望[J]. 王刚,杨旭东.  养殖技术顾问. 2013(08)
[3]氟苯尼考纯度及其相关理化性能测定[J]. 钱坤.  中国动物保健. 2013(05)
[4]氟苯尼考的作用机理及其临床应用[J]. 高婷,刘晓强.  现代畜牧兽医. 2013(04)
[5]微生物法检测乳粉中抗生素残留的构建[J]. 王超逸,马凯,王勇军.  浙江农业科学. 2013(03)
[6]胶体金免疫层析技术在临床疾病诊断中的研究进展[J]. 林一民,王云龙,胡永芳,吴立翔.  重庆医学. 2013(01)
[7]瘦肉精三合一胶体金快速检测板的研制及在畜肉中的应用[J]. 王森,周亚莲,盛慧萍,桑丽雅,马秋玲,杨光瑞,周建昌.  浙江农业科学. 2012(12)
[8]氟苯尼考研究进展及其在猪场使用建议[J]. 李孝文,章洪皲,宋文超,周晶,朱祺,吴承书,魏子贡.  中国猪业. 2012(08)
[9]头孢氨苄人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[J]. 赵启法,张改平,职爱民,宋春美,张晓辉,王爱萍.  西北农业学报. 2012(07)
[10]大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析快速检测法的建立[J]. 王玉金,杨书豪,刘丽,李姗姗.  河南科学. 2012(07)

博士论文
[1]链霉素残留免疫学快速检测技术研究[D]. 范国英.西北农林科技大学 2007

硕士论文
[1]氟苯尼考胺IgY抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 赵津子.西北农林科技大学 2012
[2]氯霉素胶体金试纸条的研制[D]. 陈发荣.南昌大学 2011
[3]高效液相色谱法检测猪肉中氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的残留[D]. 张守明.吉林大学 2010
[4]磺胺对甲氧嘧啶胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[D]. 方钲.扬州大学 2010
[5]喹乙醇单克隆抗体的制备及其免疫学快速检测方法的建立[D]. 宋春美.河南科技大学 2009
[6]氟苯尼考、安普霉素药物残留的ELISA检测方法研究[D]. 孙法良.山东农业大学 2009
[7]磺胺类兽药免疫胶体金快速检测试纸条的研制[D]. 张佳宜.天津科技大学 2009
[8]氟喹诺酮多组分残留检测试纸条的研制[D]. 胡珩.吉林大学 2008
[9]中药PZH指纹图谱及化学成分分析研究[D]. 赖延锦.福建医科大学 2008
[10]胶体金免疫层析快速检测氯霉素技术研究[D]. 杨小姣.西北农林科技大学 2007



本文编号：3213142