重组酶介导等温核酸扩增技术快速检测犬小孢子菌
发布时间:2021-06-07 16:37
目的犬小孢子菌(Microsporum canis),是临床上重要的真菌性皮肤病致病菌之一。在世界范围内广泛分布,对人类健康及动物生产等造成危害。传统的检测方法耗时长准确率低。尽管分子生物学方法缩短了检测时间,但其不仅需具备专业素质的人员操作,且十分依赖试验室仪器。RAA(重组酶介导的等温核酸扩增)能够在39℃左右的等温条件下,2040min内便能够产生大量目的基因扩增。本研究拟建立犬小孢子菌的两种RAA检测方法,期望能够建立可以应用于临床快速检测犬小孢子菌的新方法。方法参考犬小孢子菌的U4/U6 snRNA-associated-splicing factor PRP24序列(MCYG08382),设计出可以应用于RAA反应的引物与探针。制备犬小孢子菌DNA阳性标准品。建立了RAA检测方法和LF-RAA检测方法,并对两种方法的反应温度、反应时间、特异性、灵敏度进行评价。同时使用PCR、RAA、LF-RAA检测方法对临床上采集到的78份样品进行检测。将检测结果进行比较,以评价两种RAA检测方法的临床应用价值。结果本研究建立的RAA检测方法最佳...
【文章来源】:沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】:72 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
PCR凝胶电泳图
图 2-2 切胶前凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip图 2-3 切胶后凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带
第二章 PCR 检测犬小孢子菌方法的建立与初步评价图 2-2 切胶前凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip
【参考文献】:
期刊论文
[1]沙门菌荧光重组酶介导等温扩增检测方法的应用研究[J]. 周冬根,罗洁. 中国热带医学. 2019(02)
[2]结合重组酶介导的核酸等温扩增和荧光探针快速检测日本血吸虫基因片段[J]. 赵松,刘燕红,李婷,李伟,张键锋,郭利川,应清界,羊海涛,杨坤. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2019(01)
[3]香鳞毛蕨有效部位体外抗犬小孢子菌作用及其机制研究[J]. 林浩琪,张莉莉,沈志滨,刘雪萍,陈艳芬,庄素琪,温玉莹,唐春萍,江涛. 广东药科大学学报. 2018(06)
[4]浅谈猫真菌性皮肤病的防治[J]. 李冬梅. 饲料博览. 2018(11)
[5]犬小孢子菌性皮肤真菌病的流行病学调查[J]. 张永东,李志,姜晨,李贞玉. 山东畜牧兽医. 2018(05)
[6]母女共患犬小孢子菌感染2例[J]. 詹济滂,尹颂超,李美荣,赖维. 中国真菌学杂志. 2018(05)
[7]重组酶介导扩增方法快速检测A族乙型溶血性链球菌[J]. 魏莹,郭利川,张小平,黄雷,郑乐怡,应清界,吴忠华,郑伟. 中国国境卫生检疫杂志. 2018(05)
[8]犬皮肤病常见病原真菌多重PCR检测方法的建立[J]. 俞向前,王婷婷,潘世友,文德亮,沈家红,沈尧欣,朱建国,叶承荣. 畜牧与兽医. 2018(09)
[9]犬小孢子菌致婴儿头癣1例[J]. 郭艳阳,付萌,马翠玲. 中国真菌学杂志. 2018(04)
[10]犬真菌性皮肤病的诊治[J]. 王敬松,张柯凌. 中国工作犬业. 2018(07)
硕士论文
[1]重组酶介导的扩增技术检测呼吸道合胞病毒方法的建立和初步评价[D]. 陈晨.中国疾病预防控制中心 2018
[2]逆转录重组酶介导扩增技术在柯萨奇病毒A10型以及A6型检测中的应用[D]. 颜腾飞.河北医科大学 2018
本文编号:3216927
【文章来源】:沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】:72 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
PCR凝胶电泳图
图 2-2 切胶前凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip图 2-3 切胶后凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带
第二章 PCR 检测犬小孢子菌方法的建立与初步评价图 2-2 切胶前凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip
【参考文献】:
期刊论文
[1]沙门菌荧光重组酶介导等温扩增检测方法的应用研究[J]. 周冬根,罗洁. 中国热带医学. 2019(02)
[2]结合重组酶介导的核酸等温扩增和荧光探针快速检测日本血吸虫基因片段[J]. 赵松,刘燕红,李婷,李伟,张键锋,郭利川,应清界,羊海涛,杨坤. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2019(01)
[3]香鳞毛蕨有效部位体外抗犬小孢子菌作用及其机制研究[J]. 林浩琪,张莉莉,沈志滨,刘雪萍,陈艳芬,庄素琪,温玉莹,唐春萍,江涛. 广东药科大学学报. 2018(06)
[4]浅谈猫真菌性皮肤病的防治[J]. 李冬梅. 饲料博览. 2018(11)
[5]犬小孢子菌性皮肤真菌病的流行病学调查[J]. 张永东,李志,姜晨,李贞玉. 山东畜牧兽医. 2018(05)
[6]母女共患犬小孢子菌感染2例[J]. 詹济滂,尹颂超,李美荣,赖维. 中国真菌学杂志. 2018(05)
[7]重组酶介导扩增方法快速检测A族乙型溶血性链球菌[J]. 魏莹,郭利川,张小平,黄雷,郑乐怡,应清界,吴忠华,郑伟. 中国国境卫生检疫杂志. 2018(05)
[8]犬皮肤病常见病原真菌多重PCR检测方法的建立[J]. 俞向前,王婷婷,潘世友,文德亮,沈家红,沈尧欣,朱建国,叶承荣. 畜牧与兽医. 2018(09)
[9]犬小孢子菌致婴儿头癣1例[J]. 郭艳阳,付萌,马翠玲. 中国真菌学杂志. 2018(04)
[10]犬真菌性皮肤病的诊治[J]. 王敬松,张柯凌. 中国工作犬业. 2018(07)
硕士论文
[1]重组酶介导的扩增技术检测呼吸道合胞病毒方法的建立和初步评价[D]. 陈晨.中国疾病预防控制中心 2018
[2]逆转录重组酶介导扩增技术在柯萨奇病毒A10型以及A6型检测中的应用[D]. 颜腾飞.河北医科大学 2018
本文编号:3216927
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