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重组酶介导等温核酸扩增技术快速检测犬小孢子菌

发布时间:2021-06-07 16:37
  目的犬小孢子菌(Microsporum canis),是临床上重要的真菌性皮肤病致病菌之一。在世界范围内广泛分布,对人类健康及动物生产等造成危害。传统的检测方法耗时长准确率低。尽管分子生物学方法缩短了检测时间,但其不仅需具备专业素质的人员操作,且十分依赖试验室仪器。RAA(重组酶介导的等温核酸扩增)能够在39℃左右的等温条件下,2040min内便能够产生大量目的基因扩增。本研究拟建立犬小孢子菌的两种RAA检测方法,期望能够建立可以应用于临床快速检测犬小孢子菌的新方法。方法参考犬小孢子菌的U4/U6 snRNA-associated-splicing factor PRP24序列(MCYG08382),设计出可以应用于RAA反应的引物与探针。制备犬小孢子菌DNA阳性标准品。建立了RAA检测方法和LF-RAA检测方法,并对两种方法的反应温度、反应时间、特异性、灵敏度进行评价。同时使用PCR、RAA、LF-RAA检测方法对临床上采集到的78份样品进行检测。将检测结果进行比较,以评价两种RAA检测方法的临床应用价值。结果本研究建立的RAA检测方法最佳... 

【文章来源】:沈阳农业大学辽宁省

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

重组酶介导等温核酸扩增技术快速检测犬小孢子菌


PCR凝胶电泳图

切胶,凝胶电泳,图注,条带


图 2-2 切胶前凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip图 2-3 切胶后凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带

切胶,凝胶电泳,犬小孢子菌,初步评价


第二章 PCR 检测犬小孢子菌方法的建立与初步评价图 2-2 切胶前凝胶电泳图注:M,DNA marker;m,目的条带Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]重组酶介导的扩增技术检测呼吸道合胞病毒方法的建立和初步评价[D]. 陈晨.中国疾病预防控制中心 2018
[2]逆转录重组酶介导扩增技术在柯萨奇病毒A10型以及A6型检测中的应用[D]. 颜腾飞.河北医科大学 2018



本文编号:3216927

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