蜂胶对细菌脂多糖刺激下奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接蛋白的影响
发布时间：2021-06-10 00:51
本试验旨在研究中国蜂胶乙醇提取物（ethanol extract of Chinese propolis,EECP）对细菌脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激下体外培养奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接渗透性的影响。EECP中总酚酸和总黄酮含量测定采用福林酚法和硝酸铝法,并建立LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells,MAC-T）炎症模型,采用CCK-8法测定EECP对MAC-T相对增殖率的影响,利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）评估EECP对LPS诱导的MAC-T细胞炎症相关因子（IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β）相对mRNA转录水平;以及对紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）相对mRNA转录水平进行检测,并进一步利用免疫荧光技术对紧密连接膜蛋白进行定位,确定EECP对LPS诱导MAC-T细胞炎症紧密连接渗透性的影响。结果显示:EECP中总酚酸含量为106.35 mg没食子酸当量（GAE）·g-1、总黄酮含量为320.85 mg芦丁当量（RE）·g...
【文章来源】：畜牧兽医学报. 2020,51(05)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
不同浓度EECP对MAC-T增殖率的影响
从图2中可知,LPS刺激组MAC-T增殖率极显著低于空白组(P<0.01),但经2.5～10 μg ·mL-1的EECP预处理后,其细胞活性显著高于LPS刺激组(P<0.05)。结果表明,经LPS刺激处理会降低MAC-T的活性,而添加EECP处理后能够提高细胞活性。2.4 EECP对MAC-T炎症相关因子mRNA转录的影响
LPS是一种重要的毒素因子,能够诱导奶牛发生乳腺炎,使乳腺组织发生损伤,并促进炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,使机体产生免疫应答。TNF-α是一种促炎细胞因子,在LPS诱导的乳腺免疫反应过程中,牛奶中会有大量的TNF-α分泌[23]。IL-6是一种多功能细胞因子,可调节免疫反应,造血功能,急性期反应,炎症和中枢神经系统[24]。IL-8是主要的趋化因子,能够指导中心粒细胞向炎症处募集[18]。IL-1β是由免疫细胞、基底细胞和肿瘤细胞分泌的重要炎症介质,能够促进促炎细胞因子的产生,以及调节炎性细胞的生长、分化和运动[25]。RT-qPCR结果显示,在EECP预处理条件下,奶牛乳腺上皮细胞炎症相关因子(TNF-α、IL-8、IL-6和IL-1β) mRNA 的转录量显著下降。研究报道,蜂胶提取物中主要的多酚类化合物(咖啡酸苯乙酯、咖啡酸和槲皮素)能够抑制LPS诱导炎症相关因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的表达,降低核因子κB (NF-κB) 的转录活性,发挥抗炎作用[26-28]。中国蜂胶能通过抑制细胞自身自噬和MAPK/NF-κB信号通路相关的机制抑制LPS诱导的人脐静脉血管内皮细胞中的氧化应激和炎症[10]。图4 不同浓度 EECP 对MAC-T在LPS 刺激下occludin、ZO-1基因mRNA转录水平的影响
本文编号：3221675
【文章来源】：畜牧兽医学报. 2020,51(05)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
不同浓度EECP对MAC-T增殖率的影响
从图2中可知,LPS刺激组MAC-T增殖率极显著低于空白组(P<0.01),但经2.5～10 μg ·mL-1的EECP预处理后,其细胞活性显著高于LPS刺激组(P<0.05)。结果表明,经LPS刺激处理会降低MAC-T的活性,而添加EECP处理后能够提高细胞活性。2.4 EECP对MAC-T炎症相关因子mRNA转录的影响
LPS是一种重要的毒素因子,能够诱导奶牛发生乳腺炎,使乳腺组织发生损伤,并促进炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,使机体产生免疫应答。TNF-α是一种促炎细胞因子,在LPS诱导的乳腺免疫反应过程中,牛奶中会有大量的TNF-α分泌[23]。IL-6是一种多功能细胞因子,可调节免疫反应,造血功能,急性期反应,炎症和中枢神经系统[24]。IL-8是主要的趋化因子,能够指导中心粒细胞向炎症处募集[18]。IL-1β是由免疫细胞、基底细胞和肿瘤细胞分泌的重要炎症介质,能够促进促炎细胞因子的产生,以及调节炎性细胞的生长、分化和运动[25]。RT-qPCR结果显示,在EECP预处理条件下,奶牛乳腺上皮细胞炎症相关因子(TNF-α、IL-8、IL-6和IL-1β) mRNA 的转录量显著下降。研究报道,蜂胶提取物中主要的多酚类化合物(咖啡酸苯乙酯、咖啡酸和槲皮素)能够抑制LPS诱导炎症相关因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的表达,降低核因子κB (NF-κB) 的转录活性,发挥抗炎作用[26-28]。中国蜂胶能通过抑制细胞自身自噬和MAPK/NF-κB信号通路相关的机制抑制LPS诱导的人脐静脉血管内皮细胞中的氧化应激和炎症[10]。图4 不同浓度 EECP 对MAC-T在LPS 刺激下occludin、ZO-1基因mRNA转录水平的影响
本文编号：3221675
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