羊吕氏泰勒虫与嗜吞噬细胞无浆体双重PCR检测方法的建立与应用
发布时间：2021-06-22 15:50
羊泰勒虫病（Ovine Theileriosis）是由寄生在绵羊和山羊红细胞、淋巴细胞或巨噬细胞内的泰勒科（Theileriidae）泰勒属（Theileria）的血液寄生原虫引起的一类疾病的总称;无浆体病（Anaplasmosis）是由无浆体科（Anaplasmataceae）无浆体（Anaplasma）属病原寄生于人和动物血细胞内引起的蜱传性血液立克次体病。羊泰勒虫病和无浆体病均属于蜱传性疾病,引起人和动物极为类似的高热、贫血、黄疸和消瘦等临床症状,严重感染时可导致死亡。吕氏泰勒虫（T.luwenshuni）是一种恶性羊泰勒虫,具有很强的致病性;嗜吞噬细胞无浆体（A.phagocytophilum,AP）作为一种人兽共患病病原,严重威胁着人和动物的健康,临床常见两种病原混合感染。目前,针对这两种病原的检测主要是常规PCR方法,但一次仅限于一种特定病原的检查,而在临床应用中耗费人力物力。迄今为止,关于同时检测T.luwenshuni和AP的PCR诊断方法,未见报道。本研究旨在建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的双重PCR检测方法,以期能够同时检测T.luwenshuni和AP,为两...
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
血液涂片姬姆萨染色结果
取的DNA无蛋白和RNA污染，将标模板进行PCR扩增。系及条件对2次采集的羊血样品分性和稳定性。 3 日、2015 年 7 月 13 日、2015 年共 76 份羊血液 DNA 样品，利用法对 76 份样品进行 PCR 扩增，检测结果通过双向测序，比对基因物T.lu7F/T.lu7R扩增，得到约962
2.2 PCR 反应体系及反应条件（1）LATaq DNAPolymerase 最佳量为0.25 μL。由电泳图结果可知，酶含量过低影响合成产物量，当超过0.25 μL时，PCR扩增效果基本一致，即最佳量为0.25 μL，见图3-2。图 3-1 PCR 扩增结果M：DL2000 DNA Marker； 1-2. 样品； 3. 阳性对照；4. 阴性对照Fig. 3-1 The results of PCRM: DL2000 DNA Marker; 1-2. Samples；3. Positive control；4. Negative control
【参考文献】：
期刊论文
[1]羊泰勒虫病的流行、检测及其防控措施[J]. 李松哲. 饲料博览. 2017(11)
[2]羊泰勒虫病的诊治[J]. 王丽华,张辉,丁春艳. 畜禽业. 2017(10)
[3]羊无形体病的临床症状、剖检变化、诊断及其防治[J]. 木拉力·阿力甫汗. 现代畜牧科技. 2017(10)
[4]羊泰勒虫病的防治[J]. 刘永梅. 畜牧兽医科学(电子版). 2017(07)
[5]羊泰勒虫病二温式PCR诊断方法的建立及初步应用[J]. 田万年,薛书江,贾立军,张守发. 中国兽医杂志. 2017(06)
[6]羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 田万年,李国江,薛书江,贾立军,张守发. 中国预防兽医学报. 2017(05)
[7]羊泰勒虫病的临床症状、诊断和防治措施[J]. 程雪. 现代畜牧科技. 2017(01)
[8]羊血液原虫病防治措施[J]. 吉宝蝉. 中兽医学杂志. 2016(05)
[9]羊泰勒虫病的临床症状、诊断与防治[J]. 王娟. 现代畜牧科技. 2016(07)
[10]羊焦虫病的临床症状与防控方法[J]. 王金合,赵金玲. 浙江畜牧兽医. 2016(02)
博士论文
[1]我国羊泰勒虫的生物学特性研究[D]. 李有全.中国农业科学院 2007
硕士论文
[1]新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及种类鉴定[D]. 王海国.塔里木大学 2017
[2]新疆南疆绵羊无浆体流行病学调查及分析[D]. 张晶.塔里木大学 2017
[3]羊血液、羊奶中无浆体分子流行病学调查及遗传鉴定[D]. 吕亚莉.河南农业大学 2014
[4]嗜吞噬细胞无浆体和牛无浆体LAMP检测方法的建立与应用[D]. 王金鸿.河南农业大学 2014
[5]绵羊无浆体和牛无浆体实时荧光定量PCR检测方法的建立[D]. 迟庆安.新疆农业大学 2013
[6]羊无浆体PCR诊断方法建立及分子流行病学调查[D]. 张菲菲.河南农业大学 2013
[7]我国部分地区羊球虫种类及梨形虫病分子流行病学调查[D]. 卫九健.河南农业大学 2013
[8]我国部分地区羊梨形虫病PCR检测方法建立及分子流行病学调查[D]. 朱丹.河南农业大学 2012
[9]羊梨形虫核糖体RNA内转录间隔区序列的测定及反向线状印迹技术的建立[D]. 牛庆丽.新疆农业大学 2008
本文编号：3243117
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
血液涂片姬姆萨染色结果
取的DNA无蛋白和RNA污染，将标模板进行PCR扩增。系及条件对2次采集的羊血样品分性和稳定性。 3 日、2015 年 7 月 13 日、2015 年共 76 份羊血液 DNA 样品，利用法对 76 份样品进行 PCR 扩增，检测结果通过双向测序，比对基因物T.lu7F/T.lu7R扩增，得到约962
2.2 PCR 反应体系及反应条件（1）LATaq DNAPolymerase 最佳量为0.25 μL。由电泳图结果可知，酶含量过低影响合成产物量，当超过0.25 μL时，PCR扩增效果基本一致，即最佳量为0.25 μL，见图3-2。图 3-1 PCR 扩增结果M：DL2000 DNA Marker； 1-2. 样品； 3. 阳性对照；4. 阴性对照Fig. 3-1 The results of PCRM: DL2000 DNA Marker; 1-2. Samples；3. Positive control；4. Negative control
【参考文献】：
期刊论文
[1]羊泰勒虫病的流行、检测及其防控措施[J]. 李松哲. 饲料博览. 2017(11)
[2]羊泰勒虫病的诊治[J]. 王丽华,张辉,丁春艳. 畜禽业. 2017(10)
[3]羊无形体病的临床症状、剖检变化、诊断及其防治[J]. 木拉力·阿力甫汗. 现代畜牧科技. 2017(10)
[4]羊泰勒虫病的防治[J]. 刘永梅. 畜牧兽医科学(电子版). 2017(07)
[5]羊泰勒虫病二温式PCR诊断方法的建立及初步应用[J]. 田万年,薛书江,贾立军,张守发. 中国兽医杂志. 2017(06)
[6]羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 田万年,李国江,薛书江,贾立军,张守发. 中国预防兽医学报. 2017(05)
[7]羊泰勒虫病的临床症状、诊断和防治措施[J]. 程雪. 现代畜牧科技. 2017(01)
[8]羊血液原虫病防治措施[J]. 吉宝蝉. 中兽医学杂志. 2016(05)
[9]羊泰勒虫病的临床症状、诊断与防治[J]. 王娟. 现代畜牧科技. 2016(07)
[10]羊焦虫病的临床症状与防控方法[J]. 王金合,赵金玲. 浙江畜牧兽医. 2016(02)
博士论文
[1]我国羊泰勒虫的生物学特性研究[D]. 李有全.中国农业科学院 2007
硕士论文
[1]新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及种类鉴定[D]. 王海国.塔里木大学 2017
[2]新疆南疆绵羊无浆体流行病学调查及分析[D]. 张晶.塔里木大学 2017
[3]羊血液、羊奶中无浆体分子流行病学调查及遗传鉴定[D]. 吕亚莉.河南农业大学 2014
[4]嗜吞噬细胞无浆体和牛无浆体LAMP检测方法的建立与应用[D]. 王金鸿.河南农业大学 2014
[5]绵羊无浆体和牛无浆体实时荧光定量PCR检测方法的建立[D]. 迟庆安.新疆农业大学 2013
[6]羊无浆体PCR诊断方法建立及分子流行病学调查[D]. 张菲菲.河南农业大学 2013
[7]我国部分地区羊球虫种类及梨形虫病分子流行病学调查[D]. 卫九健.河南农业大学 2013
[8]我国部分地区羊梨形虫病PCR检测方法建立及分子流行病学调查[D]. 朱丹.河南农业大学 2012
[9]羊梨形虫核糖体RNA内转录间隔区序列的测定及反向线状印迹技术的建立[D]. 牛庆丽.新疆农业大学 2008
本文编号：3243117
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