丹参酮IIA磺酸钠抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）活性及其分子机制研究
发布时间：2021-06-26 16:20
目的：检测丹参酮ⅡA磺酸钠（STS）对PRRSV感染后的Marc-145细胞中自噬相关基因ATG5、Beclin1、ATG7 mRNA表达量和蛋白合成的影响。STS对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV） N基因的表达量和N蛋白合成的影响,初步探讨STS抗病毒作用的机制。方法：采用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测STS对Marc-145细胞中自噬相关基因ATG5、ATG7和Beclin1以及PRRSV N基因表达的影响。Western blot检测ATG5、ATG7和Beclin1和N蛋白合成的影响。同时通过间接免疫荧光试验研究STS对PRRSV N蛋白表达的影响,初步探讨STS的抗病毒机制。结果：1.实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和western blot结果显示在12hpi、24hpi、36hpi时STS能够抑制ATG5、ATG7和Beclin1 mRNA和蛋白的合成。且24hpi、36hpi时0.0625mg/mlSTS、0.03125mg/mlSTS抑制ATG5效果好于0.125mg/ml利巴韦林。36hpi时0.0625mg/mlSTS抑制Beclinl的效...
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?ＰＲＲＳＶ基闪谢．结构??打ｇ．?１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＰＲＲＳＶ?Ｇｅｎｏｍｅ??．
??有四条保守的信号通路参与自隨体的形成（图２卢７１?ＡＴＧ１酶复合物（ＡＴＧ１－ＡＴＧ１３－??ＡＴＧ１７）在起始阶段调控自倦体的形成，其机制是通过识别雷帕霉素範标（ｍＴＯ巧信号??趴１。液泡分掠蛋白Ｖｐｄ４－Ｖｐｓ３０复合体，在哺乳动物中称为ＦＤＧ－ｉｎ－Ｂｅｃｌｉｎ－ｌ复合体。??ＰＤＯ－ｍ－Ｂｅｃｌｉｎ－ｌ复合体促进早期自倦体的形成是通妊调控诱导稱酸肌醇的量的多少??－７－??
图４不同时间点ＳＴＳ对ＡＴＧＳｍＲＮＡ表达量影响??Ｆｉｇ．４?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＳＴＳ?０打?ＡＴＧ５?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｔ?出ｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?ｐｏｉｎｔｓ??相对定量结果如表１?（Ｔ沁ｌｅｌ）和图４?（Ｆｉｇ．４）所示，在１２ｈｐｉ时ＰＲＲＳＶ组ＡＴＧ５基因??表达量高于细胞对照组（Ｐ＞〇．〇５）；?ＰＲＲＳＶ组ＡＴＧ５基因表达量在２４ｈｐｉ、３６ｈｐｉ时高于细??胞对照组（Ｐ＜０．０５）。在?１２ｈｐｉ、２４ｈｐｉ、％ｈｐｉ时０．０６２５ｍｇ／ｍｌＳＴＳ处理组、０．０３１２５ｍｇ／ｍｌＳＴＳ??－２７－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒结构和非结构蛋白生物学功能研究进展[J]. 张松林,沈志强,刘磊,马永彪,刘吉山. 畜牧兽医学报. 2012(11)
[2]Marc-145细胞培养条件摸索及其初步应用[J]. 兰海楠,张辉,崔焕忠,杜东菊,孔金超,赵小丽,郑鑫. 中国畜牧兽医. 2011(05)
[3]Influence of Hypericum perforatum Extract on Piglet Infected with Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Virus[J]. PU Xiu-ying1, 3, LIANG Jian-ping2, 3, SHANG Ruo-feng3, WANG Xue-hong3, WANG Zuo-xin1, 3, HUA Lan-ying3 and LIU Yu3 1 College of Veterinary Medicine, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, P.R.China 2 Institute of Modern Physics, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou 730000, P.R.China 3 Lanzhou Institute of Animal and Veterinary Pharmaceutics Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730050, P.R. China. Agricultural Sciences in China. 2009(06)
[4]丹参药理学活性物质基础研究现状[J]. 刘艾林,李铭源,王一涛,杜冠华. 中国药学杂志. 2007(09)
[5]从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J]. 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙. 中国畜禽传染病. 1996(02)
博士论文
[1]PRRSV感染诱导细胞自噬及内质网应激的机制研究[D]. 陈全刚.华中农业大学 2013
硕士论文
[1]抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）天然化合物的体外筛选及其抗病毒机制研究[D]. 孙娜.山西农业大学 2013
[2]与PRRSV核衣壳蛋白相互作用的宿主蛋白的筛选与验证[D]. 李婷婷.华中农业大学 2010
[3]蓝耳病毒RX株的分离鉴定和中药体外抗病毒的作用研究[D]. 李丹.山东农业大学 2009
本文编号：3251663
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?ＰＲＲＳＶ基闪谢．结构??打ｇ．?１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＰＲＲＳＶ?Ｇｅｎｏｍｅ??．
??有四条保守的信号通路参与自隨体的形成（图２卢７１?ＡＴＧ１酶复合物（ＡＴＧ１－ＡＴＧ１３－??ＡＴＧ１７）在起始阶段调控自倦体的形成，其机制是通过识别雷帕霉素範标（ｍＴＯ巧信号??趴１。液泡分掠蛋白Ｖｐｄ４－Ｖｐｓ３０复合体，在哺乳动物中称为ＦＤＧ－ｉｎ－Ｂｅｃｌｉｎ－ｌ复合体。??ＰＤＯ－ｍ－Ｂｅｃｌｉｎ－ｌ复合体促进早期自倦体的形成是通妊调控诱导稱酸肌醇的量的多少??－７－??
图４不同时间点ＳＴＳ对ＡＴＧＳｍＲＮＡ表达量影响??Ｆｉｇ．４?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＳＴＳ?０打?ＡＴＧ５?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｔ?出ｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?ｐｏｉｎｔｓ??相对定量结果如表１?（Ｔ沁ｌｅｌ）和图４?（Ｆｉｇ．４）所示，在１２ｈｐｉ时ＰＲＲＳＶ组ＡＴＧ５基因??表达量高于细胞对照组（Ｐ＞〇．〇５）；?ＰＲＲＳＶ组ＡＴＧ５基因表达量在２４ｈｐｉ、３６ｈｐｉ时高于细??胞对照组（Ｐ＜０．０５）。在?１２ｈｐｉ、２４ｈｐｉ、％ｈｐｉ时０．０６２５ｍｇ／ｍｌＳＴＳ处理组、０．０３１２５ｍｇ／ｍｌＳＴＳ??－２７－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒结构和非结构蛋白生物学功能研究进展[J]. 张松林,沈志强,刘磊,马永彪,刘吉山. 畜牧兽医学报. 2012(11)
[2]Marc-145细胞培养条件摸索及其初步应用[J]. 兰海楠,张辉,崔焕忠,杜东菊,孔金超,赵小丽,郑鑫. 中国畜牧兽医. 2011(05)
[3]Influence of Hypericum perforatum Extract on Piglet Infected with Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Virus[J]. PU Xiu-ying1, 3, LIANG Jian-ping2, 3, SHANG Ruo-feng3, WANG Xue-hong3, WANG Zuo-xin1, 3, HUA Lan-ying3 and LIU Yu3 1 College of Veterinary Medicine, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, P.R.China 2 Institute of Modern Physics, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou 730000, P.R.China 3 Lanzhou Institute of Animal and Veterinary Pharmaceutics Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730050, P.R. China. Agricultural Sciences in China. 2009(06)
[4]丹参药理学活性物质基础研究现状[J]. 刘艾林,李铭源,王一涛,杜冠华. 中国药学杂志. 2007(09)
[5]从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J]. 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙. 中国畜禽传染病. 1996(02)
博士论文
[1]PRRSV感染诱导细胞自噬及内质网应激的机制研究[D]. 陈全刚.华中农业大学 2013
硕士论文
[1]抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）天然化合物的体外筛选及其抗病毒机制研究[D]. 孙娜.山西农业大学 2013
[2]与PRRSV核衣壳蛋白相互作用的宿主蛋白的筛选与验证[D]. 李婷婷.华中农业大学 2010
[3]蓝耳病毒RX株的分离鉴定和中药体外抗病毒的作用研究[D]. 李丹.山东农业大学 2009
本文编号：3251663
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