延边黑熊源链球菌的分离鉴定及PCR诊断方法的建立

发布时间：2021-06-28 11:41

　　链球菌病（Streptocosis）主要是由β溶血性链球菌引起的多种人兽共患病的总称。动物链球菌病中主要以猪、牛、羊、马、鸡较为常见。近几年来,水貂、牦牛、兔和鱼类也有发生链球菌病的报道。人链球菌病以猩红热为多见。链球菌病的临诊表现中存在多样性,在病理变化过程中能够引起化脓创和菌血症,也可引起局部感染。链球菌的种类繁多,在自然界分布广泛,主要通过呼吸道和空气传播,其次也可通过损伤的皮肤感染传播,主要引起大叶性肺炎、支气管炎脑膜炎、化脓性关节炎、败血症等,能产生多种外毒素和酶,可溶解红细胞,对动物有致死作用。有资料显示,链球菌引起的上述疾病时有发生,可感染人、家畜、花鲸、狐等野生动物,在生后数日内的幼儿或幼龄动物大多数因脑膜炎死亡率较高,造成的经济损失不可估量。近几年来,链球菌病在延边州的猪及其他动物的流行区域逐渐扩大,发病率和感染率不断上升,当今已成为严重威胁延边畜牧业发展的重要疫病之一,因此,分离链球菌本地株、建立检测方法以及疫苗的研究等是十分必要的。为了分离鉴定黑熊链球菌延边株,以及预防链球菌在该区养熊业的流行,本试验利用发病死亡熊病料成功分离出三株致病菌,并应用H202试验、奥谱... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
    1 链球菌的流行病学
    2 链球菌菌体的病原学研究
    3 链球菌的生物学特性
    4 链球菌的分类
    5 免疫原性
        5.1 致病性物质
        5.2 外毒素类
        5.3 免疫原性
    6 防治原则
    7 链球菌所致的疾病
    8 链球菌的感染机理研究
    9 链球菌病诊断方法研究
        9.1 病原学诊断
        9.2 血清学诊断方法
        9.3 分子生物学诊断
    10 链球菌病的防治措施
    11 本课题研究的目的及意义
材料与方法
    1 材料
        1.1 样本及菌株
        1.2 质粒、实验动物、细胞
        1.3 主要购买酶、试剂及其它配制的试剂
        1.4 主要仪器
        1.5 溶液及培养基
    2 方法
        2.1 延边黑熊源链球菌菌株的分离和鉴定
        2.2 16SrRNA通用引物的设计与合成
        2.3 细菌的分离培养
        2.4 细菌的纯培养
        2.5 细菌基因组总DNA的提取
        2.6 16SrRNA PCR扩增
        2.7 核苷酸序列的测定与分析
        2.8 熊源链球菌特异性PCR诊断方法的建立
结果
    1 培养基上菌落的生长情况
    2 过氧化氢(H_2O_2)试验鉴定结果
    3 奥谱托欣试验、胆汁溶菌试验及生化试验结果
    4 各种细菌的涂片染色镜检
    5 16SrRAN PCR的扩增
    6 PCR诊断方法基因扩增
    7 克隆质粒的PCR鉴定
    8 PCR诊断方法的特异性试验
    9 灵敏度检测结果
    10 PCR扩增的序列分析
    11 熊源链球菌的分子分型
讨论
结论
参考文献
致谢
作者简介
硕士期间发表并参与的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]东北地区猪群链球菌分离鉴定及流行病学调查分析[J]. 王淑杰,雷连成,徐敏,孙长江,李成君,蔡雪辉,刘永刚,张琦,刘狄萩,石文达.  中国兽医学报. 2009(07)
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[5]1例猪链球菌的分离与鉴定[J]. 肖萍,张海燕,陈莉.  养殖与饲料. 2008(10)
[6]河南省致病性猪源链球菌部分微生物学特性及耐药性研究[J]. 常洪涛,姚雪静,陈陆,杨霞,王川庆.  安徽农业科学. 2008(22)
[7]系统发育分析中检测数据不相合性的方法[J]. 田颖,卜文俊.  动物分类学报. 2007(02)
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本文编号：3254255