细胞骨架对狂犬病病毒感染与复制的影响
发布时间：2021-07-04 19:04
狂犬病是由狂犬病病毒（RABV）引起的、以神经系统感染为特征的高度致死性人兽共患病毒性传染病。在RABV自然感染病例中出现典型的神经症状，脑组织内很难检测到明显的神经元凋亡，但却造成了神经细胞骨架结构改变。神经细胞骨架是维持神经细胞正常生理功能的结构基础。为研究神经细胞骨架和RABV致病性的关系，本文以细胞骨架作为药物靶点，通过检测细胞骨架抑制剂对RABV感染细胞的影响，并结合对骨架调节蛋白的分析及构建骨架蛋白融合荧光质粒，研究RABV感染与细胞骨架动态变化的关系。这些研究可为阐释RABV感染致神经功能异常提供理论依据，并为深入探究狂犬病致病机制奠定基础。本研究首先通过MTT法检测秋水仙素（Col）和细胞松弛素D（CytoD）两种骨架特异性抑制剂对人神经瘤细胞SH-SY5Y活性影响，并进行形态学观察、免疫荧光鉴定，初步筛选了两种骨架特异性抑制剂的适宜浓度。随后通过在RABV感染前后使用骨架抑制剂，应用间接ELISA、RT-PCR、Western blotting及免疫荧光，分析两种抑制剂对病毒感染和复制的影响。此外，还应用Westernblotting对RABV感染条件下，两种重要骨架...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨架抑制剂对SH-SY5Y细胞活性的影响（X±S，n=6）
图 1.2.1 不同浓度的 Col 对 SH-SY5Y 细胞的影响Fig.1.2.1 Structural changes of SH-SY5Y cells under different concentrations Co注：A 为正常对照；B 为 0.13 mmol/LCol；C 为 0.25 mmol/LCol；D 为 0.5 mmol/LCol；Note: A. 0.1% DMSO B. 0.13mmol/L C.0.25mmol/L D.0.5mmol/L
图 1.2.2 不同浓度的 CytoD 对 SH-SY5Y 细胞的影响Fig. 1.2.2 Structural changes of SH-SY5Y cells under different concentrations CytoD .注：E 为正常对照；F 为 0.5μg/mLCytoD；G 为 1μg/mLCytoD；H 为 2μg/mLCytoD；Note: A. 0.1% DMSO B. 0.5μg/mL C. 1μg/mL D. 2μg/mL1.2.2 免疫荧光鉴定结果对于 0.1%DMSO 处理的 SH-SY5Y，胞浆中微丝呈清晰明亮均匀的直线状，呈纤维状细长的微丝沿着细胞长轴方向排列，贯穿整个细胞并延伸到边缘（图1.3 A1）.微管围绕核周呈放射状、密集网络，微管分布与该细胞的长梭型形态相一致（图 1.3 A2）。此时微管、微丝的重叠区域也较大，细胞核间距较大，胞核呈长椭圆形（图 1.3 A3）。当 Col 的浓度为 0.065mmol/L 时，尽管微管分布与 0.1%DMSO 处理组差异不大，但长度有所变短，核形态变化不大（图 1.3 B2、B3）；当 Col 的浓度为0.13mmol/L 时，微管长度有所缩短，仅在核周聚集成束并形成环状结构，胞核
【参考文献】：
期刊论文
[1]α-疱疹病毒与宿主细胞骨架相互作用的研究进展[J]. 刘超,邱亚峰,马志永. 现代生物医学进展. 2010(01)
[2]我国狂犬病流行状况分析及防治对策[J]. 罗明,张茂林,涂长春. 中国人兽共患病杂志. 2005(02)
[3]测定细胞存活和增殖的MTT方法的建立[J]. 郑永唐,贲昆龙. 免疫学杂志. 1992(04)
本文编号：3265364
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨架抑制剂对SH-SY5Y细胞活性的影响（X±S，n=6）
图 1.2.1 不同浓度的 Col 对 SH-SY5Y 细胞的影响Fig.1.2.1 Structural changes of SH-SY5Y cells under different concentrations Co注：A 为正常对照；B 为 0.13 mmol/LCol；C 为 0.25 mmol/LCol；D 为 0.5 mmol/LCol；Note: A. 0.1% DMSO B. 0.13mmol/L C.0.25mmol/L D.0.5mmol/L
图 1.2.2 不同浓度的 CytoD 对 SH-SY5Y 细胞的影响Fig. 1.2.2 Structural changes of SH-SY5Y cells under different concentrations CytoD .注：E 为正常对照；F 为 0.5μg/mLCytoD；G 为 1μg/mLCytoD；H 为 2μg/mLCytoD；Note: A. 0.1% DMSO B. 0.5μg/mL C. 1μg/mL D. 2μg/mL1.2.2 免疫荧光鉴定结果对于 0.1%DMSO 处理的 SH-SY5Y，胞浆中微丝呈清晰明亮均匀的直线状，呈纤维状细长的微丝沿着细胞长轴方向排列，贯穿整个细胞并延伸到边缘（图1.3 A1）.微管围绕核周呈放射状、密集网络，微管分布与该细胞的长梭型形态相一致（图 1.3 A2）。此时微管、微丝的重叠区域也较大，细胞核间距较大，胞核呈长椭圆形（图 1.3 A3）。当 Col 的浓度为 0.065mmol/L 时，尽管微管分布与 0.1%DMSO 处理组差异不大，但长度有所变短，核形态变化不大（图 1.3 B2、B3）；当 Col 的浓度为0.13mmol/L 时，微管长度有所缩短，仅在核周聚集成束并形成环状结构，胞核
【参考文献】：
期刊论文
[1]α-疱疹病毒与宿主细胞骨架相互作用的研究进展[J]. 刘超,邱亚峰,马志永. 现代生物医学进展. 2010(01)
[2]我国狂犬病流行状况分析及防治对策[J]. 罗明,张茂林,涂长春. 中国人兽共患病杂志. 2005(02)
[3]测定细胞存活和增殖的MTT方法的建立[J]. 郑永唐,贲昆龙. 免疫学杂志. 1992(04)
本文编号：3265364
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