Fas介导的信号通路在ZEA致睾丸支持细胞凋亡中的作用研究
发布时间：2021-07-26 08:11
玉米赤霉烯酮（ZEA）是由镰)刀菌产生的一种具有雌激素样作用的毒素,广泛存在于世界各地的谷类粮食中。研究表明,ZEA结构与17p-雌二醇相似,可拮抗雌激素与受体的结合和调节,影响促性腺激素释放激素（GnRH）的分泌,导致动物及人类生殖能力的下降。近年来,ZEA可导致雄性动物生殖功能障碍的现象受到人们的关注,但相关机制不明。为探明ZEA雄性生殖毒性的机理,本试验以分离大鼠原代睾丸支持细胞为材料,对ZEA在体外诱导睾丸支持细胞Fas介导的凋亡进行了研究。1.ZEA对大鼠睾丸支持细胞Fas/FasL凋亡信号通路的影响为探究ZEA对睾丸支持细胞Fas/FasL凋亡信号通路的影响,采用大鼠原代睾丸支持细胞为材料,用不同浓度ZEA（0、5、10、20μmol/L）处理细胞24h,AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡率;Western blot及qRT-PCR检测死亡受体通路Fas/FasL相关蛋白的表达和转录情况。用20μmol/LZEA处理细胞,于不同染毒时间（0、4、8、16h）使用Westernblot检测凋亡调控蛋白Fas、FasL、FADD、cleaved-caspa...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１－１?ＺＥＡ对睾丸支持细胞凋亡水平??
图２－１－３不同浓度ＺＥＡ对睾丸支持细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路相关蛋白表达的影响??３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＺＥＡ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｏｅｓ?ｏｎ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｆａｓ／ＦａｓＬ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?ＳｅｒｔｏＡ不同染毒时间对睾丸支持细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路中蛋白表达水平的处理睾丸支持细胞不同时间（０、４、８、１６ｈ），米用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测Ｆａ通路中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＦＡＤＤ、ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－８蛋白的表达情况。结果如图相比，各染毒组（４、８、１６ｈ）处理细胞中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＦＡＤＤ、ｃｌｅａｖｅｄｃａ著或极显著升高（Ｐ＜０．０５．Ｐ＜０．０１）。说明ＺＥＡ在不同时间能诱导睾丸支持路中标志性蛋白Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＦＡＤＤ、ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－８蛋白表达上升。??
图２－１－４不同时间ＺＥＡ对睾丸支持细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路相关蛋白表达的影响??－１－４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＺＥＡ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｆａｓ／ＦａｓＬ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?Ｓｅｒｔｏｌ论??双等研宄发现，大鼠腹腔注射不同浓度ＺＥＡ后，血清睾酮和雌激素浓度增加明显下降。细胞凋亡是由一系列膜受体和胞浆蛋白执行的细胞主动性自物生殖细胞凋亡的机制是受多基因控制，主要由Ｂｄ－２家族、ｃａｓｐａｓｅ家族等［ｍ］等研宄发现，不同浓度ＺＥＡ作用睾丸间质细胞２４?ｈ后可诱导其凋亡。ｅｍａ［７１］等研究发现，不同浓度ＺＥＡ作用于人的肝细胞后使线粒体功能丧失，ｓｐａｓｅ－３引起肝细胞的调亡。同时ＺＥＡ能够通过内质网应激，ｃａｓｐａｓｅ非依赖和体途径诱导细胞的凋亡［７４］。本试验采用Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法检测细胞凋同浓度ＺＥＡ作用于睾丸支持细胞，随着染毒浓度的升高，凋亡率明显上升，诱导睾丸支持细胞的凋亡，从而使睾丸的生殖功能受到影响。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年山东部分地区食用植物油中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮污染状况调查[J]. 李昕,秦泽明,张维嘉,苏祥,刘建伟,郑雯,杨奕,温红玲,赵丽. 食品安全质量检测学报. 2018(01)
[2]2013—2016年陕西省市售食品中玉米赤霉烯酮的污染状况及暴露评估[J]. 胡佳薇,王彩霞,田丽,王敏娟,郭蓉,乔海鸥. 卫生研究. 2017(04)
[3]玉米赤霉烯酮污染状况及毒性的研究进展[J]. 马传国,王英丹. 河南工业大学学报(自然科学版). 2017(01)
[4]Fas/FasL信号通路在铅暴露致PC12细胞凋亡中的作用[J]. 王超云,胡春卉,郭怀兰. 中国热带医学. 2017(02)
[5]玉米赤霉烯酮对雄性生殖能力影响的研究进展[J]. 逄健,曹全富,孙中义. 中华男科学杂志. 2016(11)
[6]玉米赤霉烯酮对雄性小鼠生殖系统的毒性作用[J]. 董双,何剑斌,张燚,龙淼. 畜牧与兽医. 2016(06)
[7]北京地区部分市售食用植物油中玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染状况分析[J]. 谢丹,邓春丽,赵云峰,吴永宁. 食品安全质量检测学报. 2016(05)
[8]我国部分地区饲料原料及配合饲料玉米赤霉烯酮污染情况调研[J]. 戎晓平,赵丽红,计成,马秋刚,王馨悦,周建川,刘尧君,张丽元. 中国畜牧杂志. 2015(22)
[9]2014年7-12月全国饲料及原料霉菌毒素污染及调查报告[J]. 王国强,杜妮. 今日养猪业. 2015(03)
[10]Occurrence of mycotoxins in feed ingredients and complete feeds obtained from the Beijing region of China[J]. Xiaoying Li,Lihong Zhao,Yu Fan,Yaxiong Jia,Lei Sun,Shanshan Ma,Cheng Ji,Qiugang Ma,Jianyun Zhang. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(04)
硕士论文
[1]玉米赤霉烯酮对大鼠睾丸支持细胞骨架及功能蛋白ABP等分泌的影响[D]. 郑王龙.扬州大学 2015
本文编号：3303184
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１－１?ＺＥＡ对睾丸支持细胞凋亡水平??
图２－１－３不同浓度ＺＥＡ对睾丸支持细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路相关蛋白表达的影响??３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＺＥＡ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｏｅｓ?ｏｎ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｆａｓ／ＦａｓＬ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?ＳｅｒｔｏＡ不同染毒时间对睾丸支持细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路中蛋白表达水平的处理睾丸支持细胞不同时间（０、４、８、１６ｈ），米用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测Ｆａ通路中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＦＡＤＤ、ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－８蛋白的表达情况。结果如图相比，各染毒组（４、８、１６ｈ）处理细胞中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＦＡＤＤ、ｃｌｅａｖｅｄｃａ著或极显著升高（Ｐ＜０．０５．Ｐ＜０．０１）。说明ＺＥＡ在不同时间能诱导睾丸支持路中标志性蛋白Ｆａｓ、ＦａｓＬ、ＦＡＤＤ、ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－８蛋白表达上升。??
图２－１－４不同时间ＺＥＡ对睾丸支持细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路相关蛋白表达的影响??－１－４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＺＥＡ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｆａｓ／ＦａｓＬ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?Ｓｅｒｔｏｌ论??双等研宄发现，大鼠腹腔注射不同浓度ＺＥＡ后，血清睾酮和雌激素浓度增加明显下降。细胞凋亡是由一系列膜受体和胞浆蛋白执行的细胞主动性自物生殖细胞凋亡的机制是受多基因控制，主要由Ｂｄ－２家族、ｃａｓｐａｓｅ家族等［ｍ］等研宄发现，不同浓度ＺＥＡ作用睾丸间质细胞２４?ｈ后可诱导其凋亡。ｅｍａ［７１］等研究发现，不同浓度ＺＥＡ作用于人的肝细胞后使线粒体功能丧失，ｓｐａｓｅ－３引起肝细胞的调亡。同时ＺＥＡ能够通过内质网应激，ｃａｓｐａｓｅ非依赖和体途径诱导细胞的凋亡［７４］。本试验采用Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法检测细胞凋同浓度ＺＥＡ作用于睾丸支持细胞，随着染毒浓度的升高，凋亡率明显上升，诱导睾丸支持细胞的凋亡，从而使睾丸的生殖功能受到影响。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年山东部分地区食用植物油中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮污染状况调查[J]. 李昕,秦泽明,张维嘉,苏祥,刘建伟,郑雯,杨奕,温红玲,赵丽. 食品安全质量检测学报. 2018(01)
[2]2013—2016年陕西省市售食品中玉米赤霉烯酮的污染状况及暴露评估[J]. 胡佳薇,王彩霞,田丽,王敏娟,郭蓉,乔海鸥. 卫生研究. 2017(04)
[3]玉米赤霉烯酮污染状况及毒性的研究进展[J]. 马传国,王英丹. 河南工业大学学报(自然科学版). 2017(01)
[4]Fas/FasL信号通路在铅暴露致PC12细胞凋亡中的作用[J]. 王超云,胡春卉,郭怀兰. 中国热带医学. 2017(02)
[5]玉米赤霉烯酮对雄性生殖能力影响的研究进展[J]. 逄健,曹全富,孙中义. 中华男科学杂志. 2016(11)
[6]玉米赤霉烯酮对雄性小鼠生殖系统的毒性作用[J]. 董双,何剑斌,张燚,龙淼. 畜牧与兽医. 2016(06)
[7]北京地区部分市售食用植物油中玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染状况分析[J]. 谢丹,邓春丽,赵云峰,吴永宁. 食品安全质量检测学报. 2016(05)
[8]我国部分地区饲料原料及配合饲料玉米赤霉烯酮污染情况调研[J]. 戎晓平,赵丽红,计成,马秋刚,王馨悦,周建川,刘尧君,张丽元. 中国畜牧杂志. 2015(22)
[9]2014年7-12月全国饲料及原料霉菌毒素污染及调查报告[J]. 王国强,杜妮. 今日养猪业. 2015(03)
[10]Occurrence of mycotoxins in feed ingredients and complete feeds obtained from the Beijing region of China[J]. Xiaoying Li,Lihong Zhao,Yu Fan,Yaxiong Jia,Lei Sun,Shanshan Ma,Cheng Ji,Qiugang Ma,Jianyun Zhang. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(04)
硕士论文
[1]玉米赤霉烯酮对大鼠睾丸支持细胞骨架及功能蛋白ABP等分泌的影响[D]. 郑王龙.扬州大学 2015
本文编号：3303184
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3303184.html
