子宫内气泡诱导小鼠胚胎早期死亡机理
发布时间：2021-07-27 10:06
胚胎移植技术（Embryo transfer,ET）是胚胎工程的最后一个步骤,对胚胎的妊娠率起着关键性的作用。在小鼠、牛羊以及人类的胚胎移植过程中,常常会有一定量的空气伴随胚胎被移植进入子宫。这些气泡是否影响胚胎移植的结果,至今没有定论。研究表明在豚鼠、大鼠、仓鼠等啮齿类动物中,体内雌、孕激素水平在一定条件下,宫腔内空气能诱导子宫内膜发生蜕膜化反应。同时小鼠胚胎移植结果显示,子宫内气泡能够导致早期胚胎死亡。蜕膜化能否正常进行是胚胎着床发育的关键因素。因此为了探究子宫内气泡对胚胎发育的影响,我们向假孕3.5d、正常妊娠3.5d小鼠子宫角内移植微量空气,收集7.5d蜕膜组织,通过形态观察、子宫内膜通透性检验、组织切片、蛋白质双向电泳、转录组测序及RT-PCR验证的实验方法对其机理进行研究。结果显示子宫内气泡能够诱导小鼠子宫角发生明显的增粗、增重、体积增大,且发生明显的血管重塑,双核细胞大量出现,各类细胞不规则分布,不能够区分主、次蜕膜区,子宫内胚胎大量死亡。蛋白质双向电泳结果显示在被检测范围内,子宫内气泡诱导蜕膜与正常蜕膜无蛋白差异点。而转录组测序结果显示,两组之间有64个差异表达基因,其...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
注射空气后子宫内膜毛细血管通透性增强A为正常妊娠小鼠子宫内膜通透性检测结果，可见清晰离散的蓝色条带；B为空气处理后小鼠子宫内膜通透性检测结果，实验侧整个子
control side.于假孕7.5d取其子宫，发现注射空气侧子宫角发生了明显的增粗增重，体积增大并出现明显的结节，但结节不小不均匀，如图3-2所示，注射空气侧（实验侧）子宫角直径、重量与对照侧相比差异显著（P<0.05），如表3-1所示。图3-2 注射空气侧子宫角发生明显的增粗实验侧发生明显增粗，体积增大，对照侧无变化Fig.3-2 Obvious thickening of uterine horn on the side of air injectedThe experimental side was thickened and the volume increased, but the control side did not change
表中*表示差异显著*means the difference is significant at the 0.05 level组织切片结果显示，与对照侧子宫角相比，如图3-3A所示，实验侧子宫内膜上皮细胞发生明显的增生现象，同时发现大量双核细胞，如图3-3B箭头所示。增生组织致密，有明显的血管重塑现象，血管分布不规则，重塑血管包裹的区域类似正常蜕膜中胎儿着床位点。图3-3 子宫组织HE染色A为正常子宫的组织切片；B为假孕诱导产生蜕膜的组织切片，发生明显的增生，并有多核化细胞出现（箭头所示）Fig.3-3 Histological images of uterusA is tissue section of normal uterus; B is tissue section of induced decidual tissue sections of pseudopregnancy, We found that it occurs obvioushyperplasia, and a number of polykaryocyte cells (arrow)为进一步确定子宫内移植气泡能否诱导子宫内膜发生蜕膜化反应，使用RT-PCR技术检测空气诱导增生组织与正常蜕膜组织中Cox-2，Prl3c1, Prl8a2的表达水平，结果显示
【参考文献】：
期刊论文
[1]莲种子蛋白质提取方法比较与双向电泳分析[J]. 曹锐,陈浩,丁毅. 植物科学学报. 2018(01)
[2]哺乳动物胚胎着床分子机制综述的研究现状[J]. 吕波,薛金锋,祝献民,曾桥,薛志刚. 中华生殖与避孕杂志. 2018(01)
[3]子宫内膜蜕膜化调节机制的研究现状[J]. 陈恒禧,黄薇. 现代妇产科进展. 2018(03)
[4]月季花提取液对小鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响[J]. 梁华益,韩光顺,黄春佳,冯霞,韦家河,焦雯,农生斌,吴开慧,黄丽娟. 中国妇幼保健. 2018(01)
[5]三斑海马蛋白质组学双向电泳技术的建立与优化[J]. 王清蓉,万德光,国锦琳,陈璐. 中国实验方剂学杂志. 2018(05)
[6]影响小鼠非手术胚胎移植技术的因素[J]. 蒋瑞,刘若男,苗艳平,郝赞艮,周荣艳,李相运. 黑龙江畜牧兽医. 2017(21)
[7]两种不同胚胎装载技术对体外受精-胚胎移植及冻融胚胎移植临床结局的影响[J]. 李国臻,陶林林,杨志伟,段新崇,赵琳姿,颜玉晶. 中华生殖与避孕杂志. 2017(08)
[8]不同剂量寿胎丸对促排卵大鼠胚胎着床的影响及机制[J]. 陈丽,张娟,郑翠红,王晶,解迪,周月希. 华南国防医学杂志. 2017(01)
[9]血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9与子痫前期的相关性研究[J]. 吴桂梅,刘洪玲,王文杰,李冀云,曹艳敏. 中国计划生育和妇产科. 2016(10)
[10]脂蛋白与肿瘤关系的研究进展[J]. 董欣敏,张积仁. 医学综述. 2016(20)
博士论文
[1]ATF6在小鼠胚胎植入期子宫和卵巢颗粒细胞凋亡过程中的作用研究[D]. 熊永洁.西北农林科技大学 2017
[2]NF-κB信号通路在RU486诱导小鼠月经模型月经发生早期过程中的作用[D]. 李云峰.北京协和医学院 2011
[3]ApoE和iNOS敲除小鼠子痫前期动物模型的建立和胎盘功能异常的研究[D]. 毛路一.复旦大学 2011
[4]应用胚胎工程技术快速扩繁天祝白牦牛的试验研究[D]. 王立斌.甘肃农业大学 2009
硕士论文
[1]基于二代测序的多重竞争性PCR方案的建立及应用[D]. 胡世贤.东华大学 2017
[2]KiSS-1/GPR54系统在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的作用及其机制[D]. 张鹏.南昌大学医学院 2013
本文编号：3305576
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
注射空气后子宫内膜毛细血管通透性增强A为正常妊娠小鼠子宫内膜通透性检测结果，可见清晰离散的蓝色条带；B为空气处理后小鼠子宫内膜通透性检测结果，实验侧整个子
control side.于假孕7.5d取其子宫，发现注射空气侧子宫角发生了明显的增粗增重，体积增大并出现明显的结节，但结节不小不均匀，如图3-2所示，注射空气侧（实验侧）子宫角直径、重量与对照侧相比差异显著（P<0.05），如表3-1所示。图3-2 注射空气侧子宫角发生明显的增粗实验侧发生明显增粗，体积增大，对照侧无变化Fig.3-2 Obvious thickening of uterine horn on the side of air injectedThe experimental side was thickened and the volume increased, but the control side did not change
表中*表示差异显著*means the difference is significant at the 0.05 level组织切片结果显示，与对照侧子宫角相比，如图3-3A所示，实验侧子宫内膜上皮细胞发生明显的增生现象，同时发现大量双核细胞，如图3-3B箭头所示。增生组织致密，有明显的血管重塑现象，血管分布不规则，重塑血管包裹的区域类似正常蜕膜中胎儿着床位点。图3-3 子宫组织HE染色A为正常子宫的组织切片；B为假孕诱导产生蜕膜的组织切片，发生明显的增生，并有多核化细胞出现（箭头所示）Fig.3-3 Histological images of uterusA is tissue section of normal uterus; B is tissue section of induced decidual tissue sections of pseudopregnancy, We found that it occurs obvioushyperplasia, and a number of polykaryocyte cells (arrow)为进一步确定子宫内移植气泡能否诱导子宫内膜发生蜕膜化反应，使用RT-PCR技术检测空气诱导增生组织与正常蜕膜组织中Cox-2，Prl3c1, Prl8a2的表达水平，结果显示
【参考文献】：
期刊论文
[1]莲种子蛋白质提取方法比较与双向电泳分析[J]. 曹锐,陈浩,丁毅. 植物科学学报. 2018(01)
[2]哺乳动物胚胎着床分子机制综述的研究现状[J]. 吕波,薛金锋,祝献民,曾桥,薛志刚. 中华生殖与避孕杂志. 2018(01)
[3]子宫内膜蜕膜化调节机制的研究现状[J]. 陈恒禧,黄薇. 现代妇产科进展. 2018(03)
[4]月季花提取液对小鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响[J]. 梁华益,韩光顺,黄春佳,冯霞,韦家河,焦雯,农生斌,吴开慧,黄丽娟. 中国妇幼保健. 2018(01)
[5]三斑海马蛋白质组学双向电泳技术的建立与优化[J]. 王清蓉,万德光,国锦琳,陈璐. 中国实验方剂学杂志. 2018(05)
[6]影响小鼠非手术胚胎移植技术的因素[J]. 蒋瑞,刘若男,苗艳平,郝赞艮,周荣艳,李相运. 黑龙江畜牧兽医. 2017(21)
[7]两种不同胚胎装载技术对体外受精-胚胎移植及冻融胚胎移植临床结局的影响[J]. 李国臻,陶林林,杨志伟,段新崇,赵琳姿,颜玉晶. 中华生殖与避孕杂志. 2017(08)
[8]不同剂量寿胎丸对促排卵大鼠胚胎着床的影响及机制[J]. 陈丽,张娟,郑翠红,王晶,解迪,周月希. 华南国防医学杂志. 2017(01)
[9]血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9与子痫前期的相关性研究[J]. 吴桂梅,刘洪玲,王文杰,李冀云,曹艳敏. 中国计划生育和妇产科. 2016(10)
[10]脂蛋白与肿瘤关系的研究进展[J]. 董欣敏,张积仁. 医学综述. 2016(20)
博士论文
[1]ATF6在小鼠胚胎植入期子宫和卵巢颗粒细胞凋亡过程中的作用研究[D]. 熊永洁.西北农林科技大学 2017
[2]NF-κB信号通路在RU486诱导小鼠月经模型月经发生早期过程中的作用[D]. 李云峰.北京协和医学院 2011
[3]ApoE和iNOS敲除小鼠子痫前期动物模型的建立和胎盘功能异常的研究[D]. 毛路一.复旦大学 2011
[4]应用胚胎工程技术快速扩繁天祝白牦牛的试验研究[D]. 王立斌.甘肃农业大学 2009
硕士论文
[1]基于二代测序的多重竞争性PCR方案的建立及应用[D]. 胡世贤.东华大学 2017
[2]KiSS-1/GPR54系统在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的作用及其机制[D]. 张鹏.南昌大学医学院 2013
本文编号：3305576
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