牛传染性鼻气管炎病毒部分gB蛋白的原核表达及应用

发布时间：2021-08-02 23:41

　　牛传染性鼻气管炎（IBR）又名“红鼻病”,是由牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）引起的接触性传染病。该病广泛分布于世界各地,且具有广泛的组织嗜性,临床上主要以呼吸道症状和繁殖障碍为特征。近年来,该病的病发率呈现逐年上升的趋势,给养牛业带来了不可估量的经济损失。gB蛋白为IBRV中最保守且是免疫反应最主要的蛋白之一,是进行IBRV诊断首选的特异性抗原之一。基于以上的研究,本试验做了以下三方面的工作:1..IBRV部分gB蛋白的原核表达及纯化为了获得大量的gB蛋白用于后续IBRV检测方法的建立,本试验对实验室保存的构建好的gB重组阳性质粒利用IPTG进行诱导表达,并对诱导条件（诱导时间及IPTG浓度）实施了优化,利用SDS-PAGE分析了表达蛋白的可溶性,最后使用His标签亲和镍柱层析对表达的蛋白进行了纯化和免疫印迹检测。结果表明,重组蛋白得以表达,大小为32.4KDa,与预期一致,且在IPTG浓度为0.5mM诱导4h时gB蛋白获得高效表达,存在形式主要为包涵体。纯化的gB蛋白经测定其浓度为1.84mg/mL,Western blot结果验证,表达的蛋白能够特异性识别IBR标准阳性血清。本研... 

【文章来源】：宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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本文编号：3318496