猪胸膜肺炎放线杆菌及血清1、3、5、7型多重PCR检测方法的建立及应用

发布时间：2021-08-04 08:52

　　针对猪胸膜肺炎放线杆菌种特异性基因ApxⅣ和血清1、3、5、7型的特异Cps基因设计5对引物,通过扩增条件的优化,建立了猪胸膜肺炎放线杆菌及血清1、3、5、7型的五重PCR检测方法。特异性试验显示,对血清1～15型参考菌株均扩增出相应的预期目的条带,对6种引起猪发病的主要病原菌均未扩增出任何条带。敏感性试验表明,对各血清型细菌纯培物的敏感性皆为10³ CFU/mL;对1、5型感染样品的敏感性为10⁴ CFU/g,对3、7型感染样品的敏感性为10³ CFU/g。可在4.5 h左右直接从病猪肺脏中得到检测结果。方法的建立为相关临床病例快速诊断及流行病学调查提供了有效的技术支持。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(12)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

多重PCR检测方法条件优化结果

用所建立的多重PCR方法检测APP血清1、3、5、7型的基因组DNA,在相应大小的位置均有特异PCR条带,对APP血清1～15型均可以扩增出417 bp大小的条带(图2)。而对引起猪发病的主要病原菌(猪多杀性巴氏杆菌、猪大肠埃希菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪丹毒杆菌、猪沙门菌)基因组DNA模板均无任何扩增产物(图3),结果表明所建立多重PCR方法具有良好的特异性。图3 多重PCR对其它致病菌的特异性试验结果

多重PCR对其它致病菌的特异性试验结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]猪胸膜肺炎放线杆菌感染和血清型分布[J]. 朱秀高,李艳青.  动物医学进展. 2017(10)
[2]我国局部猪胸膜肺炎流行调查和血清型分析[J]. 马爽,于国营,郭莉莉,宋新宇,程增青,郭玉广,范根成.  中国畜禽种业. 2016(04)
[3]胸膜肺炎嗜血杆菌的分离和鉴定[J]. 杨旭夫,彭发泉.  中国畜禽传染病. 1990(04)



本文编号：3321404