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宿主microRNA-181抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的机制研究

发布时间:2021-08-07 07:07
  猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS),俗称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus, PRRSV)引起的猪传染性疾病,近年来给我国乃至全世界养猪业造成了巨大的经济损失。最近研究表明,在病毒感染过程中宿主microRNAs (miRNAs)可以靶向病毒基因组RNA而导致病毒的复制受到抑制,这种作用方式被人们视为一种潜在的宿主抗病毒防御机制。然而宿主miRNAs是否可以靶向PRRSV的基因组RNA并抑制PRRSV复制的问题并不是很清楚,本论文针对这一问题进行了一定的研究。基于已经鉴定的猪miRNAs数目很少,本文首先通过分子克隆和高通量测序技术鉴定了猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages, PAMs)中miRNA表达谱,并分析了PAMs在感染PRRSV前后miRNAs表达的差异。初步结果显示PAMs可以表达800多种miRNAs,且PRRSV感染后几乎所有miRNAs的表达均呈现下降趋势。通过生物信息学软件(RegRNA和ViTa)对PRRSV的基因组R... 

【文章来源】:中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:154 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
Abstract
目录
主要缩略词
第一章 前言
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)简介
    1.2 PRRSV病毒学研究进展
    1.3 PRRSV感染的免疫反应特点简述
    1.4 MicroRNAs(miRNAs)概述
    1.5 miRNAs在抗感染固有免疫应答中的作用
    1.6 miRNAs在宿主-病毒互作关系中的作用
    1.7 本课题的研究目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 主要仪器设备
    2.3 实验方法
第三章 实验结果与分析
    3.1 PAMs内源表达miRNAs的克隆与鉴定
    3.2 高通量测序鉴定PAMs被PRRSV感染前后宿主miRNA表达谱
    3.3 通过生物信息学软件筛选可能抑制PRRSV复制的潜在miRNAs
    3.4 miR-181家族成员具有很强的抑制PRRSV复制的能力
    3.5 在miR-181家族成员中miR-181c抑制PRRSV复制的能力最强
    3.6 miR-181可以通过直接靶向PRRSV基因组RNA来抑制其复制
    3.7 miR-181在miRISC复合体中与PRRSV基因组RNA相互作用
    3.8 miR-181和其他靶向PRRSV miRNAs在不同细胞和组织中的表达分析
    3.9 滴鼻给药miR-181c抑制高致病性PRRSV在猪体内复制并缓解发烧
第四章 讨论与展望
    4.1 宿主miR-181与PRRSV基因组RNA相互作用
    4.2 miR-181和其他靶向PRRSV miRNAs与PRRSV的复制能力有一定的关联
    4.3 体内给药miR-181c抵抗PRRSV的效果
    4.4 miR-181具有抗PRRSV的潜力
第五章 结论
参考文献
致谢
附录
    一 在Mock感染PAMs样本中通过高通量测序鉴定了842种miRAs
    二 在PRRSV感染PAMs样本中通过高通量测序鉴定了870种miRNAs
作者简介


【参考文献】:
期刊论文
[1]我国高致病性猪蓝耳病疫情及防控情况[J]. 张银田.  兽医导刊. 2007(07)
[2]从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J]. 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙.  中国畜禽传染病. 1996(02)



本文编号:3327327

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