台湾云嘉南地区鸡马立克病的分子流行病学调查及其病原Meq基因序列分析

发布时间：2017-04-28 20:15

  本文关键词：台湾云嘉南地区鸡马立克病的分子流行病学调查及其病原Meq基因序列分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：马立克病(Marek’s Disease,MD)是的一种鸡的传染性致肿瘤性疾病,由马立克病毒引起,主要导致机体免疫抑制和T细胞出现淋巴瘤。自从1970年马立克活毒疫苗开始使用后,已大幅度降低了马立克病疫情所造成的经济损失,但随着马立克野毒毒力的不断增强,而不断获得突破现有疫苗免疫的能力。目前,马立克病对养禽业来说始终是一种威胁。因此,分析目前流行的马立克野毒株毒力及其特征,对于监控野毒的变异和防控本病提供依据。本研究应用PCR方法对台湾云嘉南地区80~90日龄的土鸡进行马立克病的分子流行病学调查,并利用DNASTAR内的MegAlign程式,分别针对Meq的核苷酸与氨基酸序列进行比对分析,使用程式内建的clastal W方法进行排列,之后以MEGA 6软体使用邻接法构建亲缘关系进化树。获得结果如下:1.利用PCR的方法对台湾云嘉南地区80~90日龄的土鸡羽髓样本进行检测。据检测结果显示,80~90日龄的土鸡马立克病野毒感染的阳性率为-1.48%~10.23%(4.38%),野毒感染的场阳性率为18.75%(3/16)。由PCR检测区分马立克病毒的三种血清型,可以推测出在台湾云嘉南地区93.75%的土鸡场都使用过血清一型疫苗进行对马立克病的免疫,25.00%的土鸡场使用过血清一型和血清三型两种疫苗进行免疫。另外,有两个土鸡场还发现有马立克病与禽白血病混和感染现象。2.利用DNASTAR内的MegAlign程式,分别针对马立克病毒Meq基因的核苷酸与氨基酸序列进行比对分析,使用程式内建的clastal W方法进行排列。之后以MEGA6软体使用邻接法构建亲缘关系进化树。结果可见,与国外23株毒株各株间核苷酸序列相似性为94.4%~100%,氨基酸的序列相似性为97.6%~100%。核苷酸和氨基酸亲缘关系进化树分析均发现,美国株和中国株均独立的成为一个分支,台湾的无临床症状野毒株同在一个小的分支;而中国的毒株相对不太稳定,中国的强毒株与台湾分离野毒株有向美国的野毒株靠近的趋势;疫苗株与俄罗斯疫苗株在同一分支。由马立克病毒Meq基因序列相异性以及进化树分析方面,可以得出台湾地区的野毒株与中国强毒的亲缘关系较近,推测其毒力及其致病性不亚于中国强毒株。
【关键词】：马立克病 分子流行病学 Meq基因 序列分析 鸡
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 文献综述10-18
• 第一章 鸡马立克病的研究概述10-18
• 1.1 背景10-11
• 1.2 相关基因与蛋白的研究11-12
• 1.2.1 病原的分类11
• 1.2.2 病毒的形态11-12
• 1.2.3 物理特征12
• 1.2.4 基因组12
• 1.3 致瘤基因与蛋白质的研究12-14
• 1.3.1 糖蛋白14
• 1.4 流行病学与发病机理14-15
• 1.4.1 易感宿主14
• 1.4.2 发病日龄14
• 1.4.3 传播途径14-15
• 1.5 致病机理15-16
• 1.5.1 早期溶细胞感染15
• 1.5.2 感染潜伏期15
• 1.5.3 二次溶细胞感染与肿瘤的形成15-16
• 1.6 临床症状及病理变化16
• 1.7 诊断与鉴定16-17
• 1.8 预防与治疗17
• 1.8.1 预防17
• 1.8.2 治疗17
• 1.9 本研究的目的和意义17-18
• 试验研究18-35
• 第二章 台湾云嘉南地区鸡马立克病的分子流行病学调查18-28
• 2.1 材料与方法18-24
• 2.1.1 材料18
• 2.1.2 方法18-24
• 2.2 结果24-26
• 2.3 讨论26-27
• 2.4 小结27-28
• 第三章 鸡马立克病毒Meq基因序列分析28-35
• 3.1 材料与方法28-30
• 3.1.1 材料28
• 3.1.2 方法28-30
• 3.2 结果与分析30-33
• 3.2.1 PCR扩增结果30
• 3.2.2 Meq基因序列分析结果30-32
• 3.2.3 进化分析32-33
• 3.3 讨论33-34
• 3.4 小结34-35
• 结论35-36
• 参考文献36-40
• 致谢40-41
• 作者简介41

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