阿拉善双峰驼ENaCα亚基cDNA克隆及其在两种激素处理后肾皮质细胞中的表达

发布时间：2021-08-15 15:12

　　上皮细胞钠通道（Epithelial Sodium Channel,ENaC）是盐、水在多种表皮组织吸收、重吸收的主要调控器。肾脏中ENaC主要分布在肾小管的远端小管处,其基本生理功能是对钠离子（Na⁺）进行定向跨膜转运。醛固酮和血管紧张素Ⅱ在ENaC跨膜转运钠的过程中起到重要的调节作用。双峰驼具有超常于其它家畜的耐盐碱、抗干旱能力,其独特的水盐代谢中,ENaC的调节作用尚不明晰。为此,本研究以内蒙古阿拉善双峰驼为对象,克隆了其ENaCαcDNA,对其基因及所编码蛋白结构进行了生物信息学初步分析;同时培养了双峰驼肾皮质细胞,用不同浓度两种激素醛固酮和血管紧张素Ⅱ处理培养细胞,定量PCR检测细胞中ENaCα基因的表达变化,确定双峰驼ENaCα对两种激素浓度变化的敏感性。主要研究结果如下:1.克隆了双峰驼ENaCα亚基cDNA序列,全长1956 bp。分析显示双峰驼和人、鼠、单峰驼ENaCαcDNA同源性分别为81.68%、76.67%、93.28%,氨基酸同源性分别为79.11%、75.50%、93.17%,非同源序列并不影响其功能结构结构域的形成。四个物种ENaC... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ENaC模式图

内蒙古农业大学硕士学位论文 α亚基 cDNA 构建进化树其他物种的 ENaCα亚基 cDNA 序织 RNA 的提取组织 RNA（见图 2）可看到三条 提取完好，1、2、3 泳道均为双下一步实验。

图 3 内参基因 GAPDH 的 PCR 电泳图Fig.3 The PCR electrophoregram of housekeeping genes GAPDH5 为内参基因 GAPDH 的 PCR 产物-5 are the PCR product of GAPDHaCα亚基 cDNA 全长 2256 bp，我们经 PCR 扩增后 4、5、6 泳道有约 2.2 kb 大小的条带出现（见图 4段大小相符。

【参考文献】：
期刊论文
[1]中国双峰驼血液生理生化特性研究[J]. 柏丽,冯登侦.  畜牧与兽医. 2015(01)
[2]双峰驼肾脏产生高浓缩尿的形态学基础[J]. 陈秋生,刘仪.  中国农业科学. 2002(03)
[3]盐敏感者盐负荷期间交感神经活性研究[J]. 侯嵘,刘治全,刘杰,刘文辉,王哲训,刘淑媛,耿涛.  中华心血管病杂志. 1997(06)

博士论文
[1]醛固酮快速调控肾上皮细胞钠通道作用的研究[D]. 陈学伟.中国人民解放军军事医学科学院 2012



本文编号：3344787