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新发血清4型禽腺病毒遗传进化分析及细胞受体的鉴定

发布时间:2021-08-18 06:34
  2015年7月以来,心包积液-包涵体肝炎综合征(HPS)在我国大部分家禽密集养殖地区大规模爆发流行并迅速蔓延,给我国家禽养殖业带来了巨大的经济损失。针对新发疫情,本研究从HPS蛋鸡肝脏组织中分离1株高致病性HLJFAd15毒株并鉴定其为FAdV-4。HLJFAd15全基因组分析发现HLJFAd15存在ORF19、ORF27的大片段天然缺失,与我国近期分离鉴定的高致病性毒株一致,被定义为新基因型FAdV-4。我们利用HLJFAd15毒株成功建立了新发FAdV-4的SPF鸡攻毒感染模型,其口服接种和肌肉注射接种的致死率分别达到76.9%和100%,同时能够很好的复制临床心包积液和包涵体肝炎的症状。SPF鸡动物感染模型的成功建立对我国新发FAdV-4疫苗的研发和致病机制研究具有重要意义。鉴于目前为止尚没有鸭源FAdV-4的全基因组序列,我们分离鉴定了 1株鸭源FAdV-4毒株HLJDAd15,并对该毒株进行了全基因组序列测定,上传GenBank第1株鸭源FAdV-4的全基因组序列,丰富了 FAdV-4基因组的多样性,为FAdV-4诊断靶标的选择提供了参考。HLJDAd15致病性实验显示我国新... 

【文章来源】:中国农业科学院北京市

【文章页数】:81 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

新发血清4型禽腺病毒遗传进化分析及细胞受体的鉴定


图2-1肝脏DNA进行PCR扩增结果??

序列,序列分析,毒株


中国农业科学院博士后出站报告?第二章新发血清4型禽腺病毒遗传进化分析??M?1?+?-??2.〇〇〇^?MHa??i,〇,?g—??^PT?4^561?bo??5〇〇^?WmmSm?F??25〇^?immi??i」??图2-1肝脏DNA进行PCR扩增结果??M:?DL2,000;?1:?HLJFAdl5;?+:阳性对照;阴性对照??Fig.?2-1?PCR?results?of?DNA?sample?of?liver??M:?DL2,000;?1:?HLJFAdl5;?+:?positive?control;?negative?control??2.3.1.2HLJFAdl5?的?hexon?序歹丨J分析??HLJFAdl5毒株鉴定为FAdV-4之后,设计针对FAdV-4的hexon序列的特??异性引物,扩增其全长hexon序列并进行序列分析,结果发现HLJFAdl5毒株与??我国流行JSJ13毒株高度同源(图2-2)。??1QOr?764?(JN112373}?FAdv^??一t?HG?(GU734104)??-100J?A-2A(AF083975)?fAdv^??L??HBQ12?(KM096545)??43??340?(NC?021221}?FAdv-B??.!〇n??CELO?(U46933)?fa<jv-a??9T???HLJFAd15??cl?JSJ13(KM098544)??1〇〇?KC(EU177545)??—?PB-05(EU931691)?FAdv^??100?100?PK-01?(EU931693)??97????KR5?(HE6C?152)

序列,序列分析,缺失,毒株


.3?HLJFAdl5?的?hexon?序歹IJ分析??通过hexon全长序列比对,确定HUFAdl5毒株为FAdV-4,鉴于HLJFAdl5??毒株与JSJ13毒株高度同源,我们根据JSJ13毒株的序列(GenBank序列号:??KM096544)设计了?36对引物,扩增了?HUFAdl5毒株的全基因组序列,并上传??至GenBank?(序列号:KU991797)。通过全基因组序列分析发现,HLJFAdl5毒??株的基因组在ORF42和ORF43之间存在1966bp的大片段天然缺失(图2-3),??证实为我国新发的FAdV-4毒株。??29464?35413}???37378p^§:?40115??一—???、.:丨丨丨.:^:?I??????丨..?:..::.;??(HE608152)?處?ORf22?0??27?ORF28??.?酬A??畛??ONI?0W<2?ORT29??(GU188428)???JSJ13??(KM096544)?1?_??—???■■??HB1510??(KU587519)???一一?—??29482?35427?35428?38164???""??????I!.?—?—?f88088?*???in?.JJUUU??HLJFAdl5?靈麵??(KU991797)?參?oww?c?m??u?納峰??X?L?|?G叫?I?|???0?2000?4000?6000?8000?10000??图2-3?HUFAdl?5的1966?bp缺失序列分析??Fig

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]禽腺病毒血清4型巢式PCR和环介导等温扩增检测方法建立及应用[D]. 钟鸣.东北农业大学 2019



本文编号:3349388

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