猫杯状病毒单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定
发布时间：2021-08-20 19:56
猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）属于杯状病毒科（Calicivirdae）水疱疹病毒属（Vesivirus）,是引起猫上呼吸道疾病的一种常见病原。FCV感染后的主要症状是口腔溃疡、打喷嚏、结膜炎、慢性胃肠炎等。近几年出现一些强毒株可引起急性全身性疾病,造成很高的死亡率,严重危害猫的健康。FCV感染宿主后,常常和其他的病原混合感染,这为其诊断带来了困难,因此建立快速高效的FCV检测方法已经迫在眉睫。VP1是FCV的衣壳蛋白,是主要的免疫保护性抗原,在诱导机体产生免疫应答过程中起着重要的作用。VP1分为A-F六个区,B区在125-397aa之间是保守区域,同时可诱导宿主产生非中和性单克隆抗体（MAb）。E区在427-524aa之间,又分为高变区和保守区域,可诱导宿主产生中和性单克隆抗体。本实验首先将FCV毒株FCV2280株的VP1的B、E区序列的重组质粒pET-B、pET-E分别转化到E.coli BL21 Star（DE3）表达菌,经IPTG诱导后均得到大量可溶性表达。纯化的VP1-B、VP1-E蛋白和FCV2280病毒粒子经Western blot检测,三者...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
纯化的FCV电镜分析和Westernblot分析
:纯化的 VP1-B、VP1-E 蛋白经 SDS-PAGE 鉴定;B:纯化的 VP1-B、VP1-E 蛋白经 Western blot 鉴M: Protein Marker ；1:纯化的 VP1-B 蛋白；2：纯化的 VP1-E 蛋白图 2.2. 纯化的 VP1-B、VP1-E 蛋白经 SDS-PAGE 和 Western blot 鉴定Fig2.2 Purifed VP1-B and VP1-E protein were identified by SDS-PAGE and Western blot纯化的 FCV2280、VP1-B 和 VP1-E 蛋白浓度测定
：FCV-2280；B：F9；C：HRB-SS；D：TIG-1；E：阴性对照；阳性对照：一抗为猫的 FCV 阳性血图 3.2 IFA 方法鉴定 VP1-B 和 VP1-E MAbsFig3.2 VP1-B and VP1-E MAbs were identified by IFA VP1-B、VP1-E MAbs 特异性分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]豹源猫杯状病毒ORF2基因的扩增、克隆及原核表达[J]. 刘秋艳,应瑛,王一鸣,陈小庆,赵艳丽,胡桂学. 现代畜牧兽医. 2015(01)
[2]同时检测猫细小病毒、杯状病毒、疱疹病毒1型多重PCR方法的建立[J]. 王翀,刘大飞,刘春国,柴洪亮,张洪英,程景,吕健,华育平,曲连东. 中国预防兽医学报. 2014(01)
[3]猫杯状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 姜雪,高玉伟,胡桂学,杨松涛,赵艳丽,刘秋燕,徐春忠,梁秀娟,夏咸柱. 吉林大学学报(理学版). 2013(05)
[4]猫杯状病毒分子生物学特征及研究进展[J]. 谢守玉,张健騑,吴健敏,白安斌,向华. 中国动物传染病学报. 2010(06)
[5]猫杯状病毒自然弱毒株的分离鉴定及对猫的免疫试验[J]. 刘晔,冯誉龄,张守峰,孟轲音,邹啸环,张菲,王颖,扈荣良. 中国兽医学报. 2009(04)
[6]猎豹与虎猫杯状病毒的分离及其超变区基因比较研究[J]. 高玉伟,夏咸柱,扈荣良,黄耕,徐春忠,王铁东. 中国预防兽医学报. 2003(03)
[7]老虎感染猫传染性鼻-结膜炎病毒的研究[J]. 范泉水,夏咸柱,邱薇,黄耕,何洪彬,张建滨,乔军,余春,邹啸环,李金钟,武银莲,殷震. 中国病毒学. 2000(04)
硕士论文
[1]猫杯状病毒VP1抗原性分析及间接ELISA诊断方法的建立[D]. 蒋艳妹.黑龙江八一农垦大学 2016
[2]基于ORF2基因表达产物的猫杯状病毒间接ELISA方法的建立及其初步应用[D]. 刘秋艳.吉林农业大学 2015
[3]抗猫杯状病毒单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立[D]. 艾纯旭.吉林大学 2013
本文编号：3354131
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
纯化的FCV电镜分析和Westernblot分析
:纯化的 VP1-B、VP1-E 蛋白经 SDS-PAGE 鉴定;B:纯化的 VP1-B、VP1-E 蛋白经 Western blot 鉴M: Protein Marker ；1:纯化的 VP1-B 蛋白；2：纯化的 VP1-E 蛋白图 2.2. 纯化的 VP1-B、VP1-E 蛋白经 SDS-PAGE 和 Western blot 鉴定Fig2.2 Purifed VP1-B and VP1-E protein were identified by SDS-PAGE and Western blot纯化的 FCV2280、VP1-B 和 VP1-E 蛋白浓度测定
：FCV-2280；B：F9；C：HRB-SS；D：TIG-1；E：阴性对照；阳性对照：一抗为猫的 FCV 阳性血图 3.2 IFA 方法鉴定 VP1-B 和 VP1-E MAbsFig3.2 VP1-B and VP1-E MAbs were identified by IFA VP1-B、VP1-E MAbs 特异性分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]豹源猫杯状病毒ORF2基因的扩增、克隆及原核表达[J]. 刘秋艳,应瑛,王一鸣,陈小庆,赵艳丽,胡桂学. 现代畜牧兽医. 2015(01)
[2]同时检测猫细小病毒、杯状病毒、疱疹病毒1型多重PCR方法的建立[J]. 王翀,刘大飞,刘春国,柴洪亮,张洪英,程景,吕健,华育平,曲连东. 中国预防兽医学报. 2014(01)
[3]猫杯状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 姜雪,高玉伟,胡桂学,杨松涛,赵艳丽,刘秋燕,徐春忠,梁秀娟,夏咸柱. 吉林大学学报(理学版). 2013(05)
[4]猫杯状病毒分子生物学特征及研究进展[J]. 谢守玉,张健騑,吴健敏,白安斌,向华. 中国动物传染病学报. 2010(06)
[5]猫杯状病毒自然弱毒株的分离鉴定及对猫的免疫试验[J]. 刘晔,冯誉龄,张守峰,孟轲音,邹啸环,张菲,王颖,扈荣良. 中国兽医学报. 2009(04)
[6]猎豹与虎猫杯状病毒的分离及其超变区基因比较研究[J]. 高玉伟,夏咸柱,扈荣良,黄耕,徐春忠,王铁东. 中国预防兽医学报. 2003(03)
[7]老虎感染猫传染性鼻-结膜炎病毒的研究[J]. 范泉水,夏咸柱,邱薇,黄耕,何洪彬,张建滨,乔军,余春,邹啸环,李金钟,武银莲,殷震. 中国病毒学. 2000(04)
硕士论文
[1]猫杯状病毒VP1抗原性分析及间接ELISA诊断方法的建立[D]. 蒋艳妹.黑龙江八一农垦大学 2016
[2]基于ORF2基因表达产物的猫杯状病毒间接ELISA方法的建立及其初步应用[D]. 刘秋艳.吉林农业大学 2015
[3]抗猫杯状病毒单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立[D]. 艾纯旭.吉林大学 2013
本文编号：3354131
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