硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶（TGR）在日本血吸虫生长发育中部分功能的研究
发布时间：2021-09-04 23:07
血吸虫病（Schistosomiasis）是由血吸虫（Schistosome）感染所引起的一种严重危害人、畜健康的寄生虫病,流行于全球74个国家和地区,约有5-6亿人受到威胁。目前,防治血吸虫病的主要策略是依赖于治疗药物吡喹酮的广泛应用,然而,防治实践已表明单依靠药物治疗不能解决重复感染的问题,并且,药物的不断使用可能会引起抗药性虫株的出现。因此,筛选、鉴定新的抗血吸虫病的候选疫苗分子和药物靶标显得尤为重要。血吸虫生活在宿主的血管中,需要氧化还原酶来抵抗宿主免疫系统或者血吸虫自身代谢产生的活性氧自由基（ROS）,血吸虫缺乏过氧化氢酶,也没有TrxR和GR这两种酶,取而代之的是一种多功能酶——硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶（TGR）,该酶具有TrxR. GR和Grx三种酶的功能。鉴于这种独特性,对TGR的研究受到寄生虫学者的重视。本文以rSjTGR作为研究对象,开展了动物免疫保护效果评估及机制分析,酶特性和基因功能分析,以及金诺芬对SjTGR抑制作用分析,为深入了解SjTGR在日本血吸虫生长发育中的作用提供了基础。1、重组日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶（SjTGR）免疫保护作用及机制分析应...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：140 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１融合蛋白ＳｊＴＧＲ纯化结果??Ｍ：蛋白分子量标志；１：纯化的蛋白ＳｊＴＧ民；??Ｆｉｇ丄民ｅｓｕｌｔ?ｏｆ?化ｅ?ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ＳｊＴＧ民??
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ｒＳｊＴＧＲ、温度和ＰＨ值中，改变其中任何一项的温度／ｐＨ值，而其他浓度／数值不变的??情况下，分析ｒＳｊＴＧ民的动力学。经过分析，发现该酶活体系最适温度为２５°Ｃ和最适??ｐＨ是７?（图２）。经过分析发现，在温度过高或ｐＨ过碱的情况下，ＯＤ?４１２的数值开??始呈现无规律的变化：先上升，后又下降。我们推测：温度过高或者ｐＨ过碱，可能??会使酶的结构发生变化，致其最终失活。??７９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]金诺芬抗日本血吸虫活性机制及其细胞毒性的探讨[J]. 刘建,胡薇,徐斌,王吉鹏,王树奇,王小宁. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(06)
[2]日本血吸虫硫氧还蛋白-1的克隆、表达和功能分析[J]. 刘建,徐斌,张晓,刘璐,胡薇,王小宁. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(05)
[3]不同剂量顺铂腹腔灌注联合全身化疗治疗无腹水期卵巢癌的临床观察[J]. 杨赵娟,王季堃,李巍,王莉. 中国药房. 2010(44)
[4]寄生性吸虫谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学分析[J]. 章莹,蔡国斌,何立,蒋明森. 中国人兽共患病学报. 2010(04)
[5]日本血吸虫体表蛋白Tetraspanin 2-A核酸疫苗的构建及其对小鼠的免疫试验[J]. 张鹏,张薇娜,任翠平,刘淼,沈际佳. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2009(06)
[6]重组日本血吸虫四跨膜蛋白第二亲水基团对小鼠免疫保护作用的研究[J]. 余传信,殷旭仁,李健,吴宇迪,华万全,梁幼生,高琪. 中国血吸虫病防治杂志. 2009(01)
[7]重组日本血吸虫超氧化物歧化酶融合蛋白对小鼠免疫保护作用的研究[J]. 余传信,李健,殷旭仁,吴宇迪,华万全,宋慧卓,梁幼生,高琪. 中国血吸虫病防治杂志. 2008(01)
[8]日本血吸虫超氧化物歧化酶的表达与免疫活性鉴定[J]. 余传信,殷旭仁,李健,许永良,徐明,高琪,梁幼生. 中国血吸虫病防治杂志. 2007(03)
[9]血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅰ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗的构建和鉴定[J]. 曹建平,韩海勃,刘述先. 中国血吸虫病防治杂志. 2005(04)
[10]血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅱ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗小鼠保护性免疫研究[J]. 曹建平,徐馀信,韩海勃,宋光承,李小红,卢潍媛,沈玉娟,刘述先. 中国血吸虫病防治杂志. 2005(04)
硕士论文
[1]日本血吸虫体被蛋白SjTSP1LHD重组蛋白和SjGCP核酸疫苗免疫保护效果初评估[D]. 张娟.上海师范大学 2012
[2]日本血吸虫重组抗原疫苗SjGCP-GST和Sj28 GST免疫保护力和免疫机制初步研究[D]. 李东.上海师范大学 2011
本文编号：3384177
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：140 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１融合蛋白ＳｊＴＧＲ纯化结果??Ｍ：蛋白分子量标志；１：纯化的蛋白ＳｊＴＧ民；??Ｆｉｇ丄民ｅｓｕｌｔ?ｏｆ?化ｅ?ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ＳｊＴＧ民??
别！＾〇１１瓜、ＧＳＳＧ、册０为底物。！＾＾１〇１１＇瓜为底物的活性为１．８７７±０．１的１１／１峭，Ｗ??ＧＳＳＧ为底物的活性为０．壯０．０１?Ｕ／ｍｇ，?Ｗ?ＨＥＤ为底物的活性为５１．２８６±４．６２?Ｕ／ｍｇ（表??１）。酶活性的测定是利用紫外分光光度计测定前２?ｍｉｎ吸光值的变化，图１显示了??ｉｒＳｊＴＧＲ测定时的吸光值的变化。??表１日本血吸虫至组蛋白ＴＧＲ酪的活性??Ｔａｂｌｅ?１?Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ＴＧＲ?ｅｎｚｙｍｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｏｆ?Ｓ．?ｊａｐｏｎｉｃｕｍ??巧?底物?日本血吸虫ＴＧＲ??Ｅｎｚｙｍｅ?Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ?Ｓ．?Ｊａｐｏｎｉｃｕｍ?ＴＧＲ??ＴｒｘＲ?ＮＡＤＰＨ＋ＤＴＮＢ?１．８７７±０．化?９?Ｕ／ｍｇ??ＧＲ?ＮＡＤＰＨ＋ＧＳＳＧ?Ｏ．ＳｉＯ．Ｏｌ?Ｕ／ｍｇ??Ｇｒｘ?ＮＡＤＰＨ＋ＨＥＤ?５１．２８６±４．６２?Ｕ／ｍｇ??７８??
ｒＳｊＴＧＲ、温度和ＰＨ值中，改变其中任何一项的温度／ｐＨ值，而其他浓度／数值不变的??情况下，分析ｒＳｊＴＧ民的动力学。经过分析，发现该酶活体系最适温度为２５°Ｃ和最适??ｐＨ是７?（图２）。经过分析发现，在温度过高或ｐＨ过碱的情况下，ＯＤ?４１２的数值开??始呈现无规律的变化：先上升，后又下降。我们推测：温度过高或者ｐＨ过碱，可能??会使酶的结构发生变化，致其最终失活。??７９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]金诺芬抗日本血吸虫活性机制及其细胞毒性的探讨[J]. 刘建,胡薇,徐斌,王吉鹏,王树奇,王小宁. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(06)
[2]日本血吸虫硫氧还蛋白-1的克隆、表达和功能分析[J]. 刘建,徐斌,张晓,刘璐,胡薇,王小宁. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(05)
[3]不同剂量顺铂腹腔灌注联合全身化疗治疗无腹水期卵巢癌的临床观察[J]. 杨赵娟,王季堃,李巍,王莉. 中国药房. 2010(44)
[4]寄生性吸虫谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学分析[J]. 章莹,蔡国斌,何立,蒋明森. 中国人兽共患病学报. 2010(04)
[5]日本血吸虫体表蛋白Tetraspanin 2-A核酸疫苗的构建及其对小鼠的免疫试验[J]. 张鹏,张薇娜,任翠平,刘淼,沈际佳. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2009(06)
[6]重组日本血吸虫四跨膜蛋白第二亲水基团对小鼠免疫保护作用的研究[J]. 余传信,殷旭仁,李健,吴宇迪,华万全,梁幼生,高琪. 中国血吸虫病防治杂志. 2009(01)
[7]重组日本血吸虫超氧化物歧化酶融合蛋白对小鼠免疫保护作用的研究[J]. 余传信,李健,殷旭仁,吴宇迪,华万全,宋慧卓,梁幼生,高琪. 中国血吸虫病防治杂志. 2008(01)
[8]日本血吸虫超氧化物歧化酶的表达与免疫活性鉴定[J]. 余传信,殷旭仁,李健,许永良,徐明,高琪,梁幼生. 中国血吸虫病防治杂志. 2007(03)
[9]血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅰ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗的构建和鉴定[J]. 曹建平,韩海勃,刘述先. 中国血吸虫病防治杂志. 2005(04)
[10]血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅱ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗小鼠保护性免疫研究[J]. 曹建平,徐馀信,韩海勃,宋光承,李小红,卢潍媛,沈玉娟,刘述先. 中国血吸虫病防治杂志. 2005(04)
硕士论文
[1]日本血吸虫体被蛋白SjTSP1LHD重组蛋白和SjGCP核酸疫苗免疫保护效果初评估[D]. 张娟.上海师范大学 2012
[2]日本血吸虫重组抗原疫苗SjGCP-GST和Sj28 GST免疫保护力和免疫机制初步研究[D]. 李东.上海师范大学 2011
本文编号：3384177
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