大豆凝集素对仔猪小肠上皮细胞机械屏障功能的影响

发布时间：2021-09-11 11:40

　　大豆凝集素（SBA）是大豆抗营养因子中重要的一种，影响动物的肠道结构和功能，从而降低了动物对大豆蛋白的利用效率。因此，本论文通过三个试验，研究不同浓度的SBA对上皮细胞膜完整性和屏障功能的影响，为进一步探究大豆凝集素的抗营养机理奠定了基础。试验I：采用机械刮取与胶原酶Ⅳ消化相结合的方法分离新生的仔猪小肠上皮细胞，结合相差消化法与相差贴壁法对分离的细胞进行纯化，通过观察细胞形态和采用细胞免疫组织化学法对纯化的细胞进行鉴定。试验结果显示：机械刮取结合胶原酶Ⅳ消化法获得了生长状态良好的仔猪小肠上皮细胞，在倒置显微镜下观察，细胞形态呈卵圆形或多角形，且细胞边界清晰。纯化后，当细胞纯度达到95%以上时，采用角蛋白8单克隆抗体鉴定，结果呈阳性。试验II：不同浓度的SBA对猪小肠上皮细胞完整性的影响。分别用浓度为0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mg/mlSBA处理仔猪小肠上皮细胞24h、48h和72h后，通过观察细胞形态，测定跨上皮细胞电阻值（TEER），细胞存活（MTT值）以及细胞培养液中碱性磷酸酶（AP）的活性，反映SBA对细胞膜通透性的的影响。试验结果表明：1)随着SBA浓度... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 大豆凝集素的研究进展
        1.1 凝集素的发现与定义
        1.2 大豆凝集素的结构
        1.3 大豆凝集素的抗营养作用
    第二章 肠道屏障的研究进展
        2.1 肠道黏膜屏障
        2.2 屏障功能损伤的后果
        2.3 屏障功能的评估方法
    第三章 紧密连接蛋白的研究进展
        3.1 紧密连接蛋白
        3.2 肠上皮细胞机械屏障中紧密连接蛋白的功能
第二篇 研究内容
    第一章 仔猪小肠上皮细胞的原代培养
        1.1 材料与方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
        1.4 结论
    第二章 大豆凝集素对猪小肠上皮细胞通透性的影响
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.4 结论
    第三章 大豆凝集素对上皮细胞紧密连接蛋白分布与相对表达量的影响
        3.1 材料与方法
        3.2 结果与分析
        3.3 讨论
        3.4 结论
结论
参考文献
附录
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道屏障功能及其评价指标的研究进展[J]. 胡红莲,高民.  中国畜牧杂志. 2012(17)
[2]鸡胚小肠上皮细胞的分离及原代培养研究[J]. 洪智敏,贾永杰,瞿明仁,黎观红,刘思国.  江西农业大学学报. 2011(06)
[3]模拟失重对大鼠小肠黏膜紧密连接蛋白表达的影响`[J]. 陈英,杨春敏,毛高平,王萍,刘庆森,郭明洲.  航天医学与医学工程. 2011(05)
[4]碱性磷酸酶特性及其应用的研究进展[J]. 王秋颖.  中国畜牧兽医. 2011(01)
[5]大豆凝集素的研究进展[J]. 李鹏,付永平,张辉.  粮油加工. 2010(07)
[6]α-酮戊二酸对脂多糖应激断奶仔猪空肠黏膜蛋白合成和抗氧化能力的影响[J]. 刘坚,侯永清,丁斌鹰,刘玉兰,朱惠玲,王蕾,李永塘.  中国畜牧杂志. 2010(11)
[7]仔猪小肠黏膜特异性结合大豆凝集素的免疫组化研究[J]. 王利民,胡海霞,杨树宝,栾维民,秦贵信.  中国畜牧杂志. 2010(11)
[8]Occludin蛋白调控机制及临床意义的研究进展[J]. 张宇飞,嵇武,黎介寿.  肠外与肠内营养. 2010(03)
[9]新生仔猪小肠上皮细胞的分离培养和鉴定[J]. 王静,张彦明,仝钢,刘芳宁,周宏超,何雷,杨小云,徐彦召,洪海霞.  畜牧兽医学报. 2010(01)
[10]紧密连接蛋白claudin的研究进展[J]. 雷军,夏祥国.  泸州医学院学报. 2009(06)

博士论文
[1]大豆凝集素在不同种属动物体内的消化动力学及抗营养作用比较研究[D]. 王利民.吉林农业大学 2007

硕士论文
[1]大豆凝集素受体标记及大豆凝集素对大鼠小肠上皮细胞的影响[D]. 穆成龙.吉林农业大学 2011
[2]大豆凝集素对体外培养的兔小肠上皮细胞的影响及靶位点的标记[D]. 刘飞飞.吉林农业大学 2011



本文编号：3392933