PEDV S1-1单抗的制备及其葡萄糖诱导酵母表面展示载体的构建

发布时间：2021-09-11 15:19

　　猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性病毒（porcineepidemic diarrhea virus, PEDV）引起的一种以仔猪腹泻、呕吐、脱水为主要临床症状的传染病。PEDV属于尼多病毒目（Nidovirales）、冠状病毒科（Coronaviridae）、冠状病毒属（Coronavirus），是有囊膜的正链RNA病毒。PEDV基因组为28kb，含有6个开放性阅读框（ORFs），其中ORF2编码的纤突蛋白（S蛋白）为PEDV的结构蛋白之一，对于PED的诊断及防治具有重要意义。本研究根据GenBank公布的PEDV基因组全序列，针对S蛋白中的可诱导强中和反应的S1-1抗原表位基因设计特异性引物对其进行克隆、不同表达载体原核表达，并且利用重组蛋白（His-S1-1）免疫BALB/c小鼠研制单克隆抗体。另外，通过对酿酒酵母真核表达质粒pYD1-S1-1的改造，使诱导表达成本大大降低。1. PEDV S1-1基因克隆及原核表达根据GenBank已发表的PEDV基因组全序列设计1对表达引物，通过RT-PCR扩增出PEDV S1-1蛋白的42... 

【文章来源】：江西农业大学江西省

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PEDV结构示意图

重组质粒Fig2-2Digestionidentificati

PCR扩增结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]猪流行性腹泻病毒CH/S株N蛋白基因的遗传变异及其原核表达[J]. 陈建飞,冯力,时洪艳,孙东波,白兴华,佟有恩.  中国预防兽医学报. 2007(11)
[2]猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展[J]. 孙东波,冯力,时洪艳,陈建飞.  动物医学进展. 2006(10)
[3]猪流行性腹泻的免疫研究[J]. 钱永清,闻人楚,唐永兰,陈培龙,苏万国,许大新,张国强.  上海畜牧兽医通讯. 1999(03)
[4]抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的研制及其特性鉴定[J]. 孙智锋,钱永清,方锡玲,闻人楚,唐永兰,许大新,陈培龙.  中国兽医学报. 1998(02)
[5]猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究[J]. 童昆周,李力复,林志雄,周仲芳,颜思通,李树根.  中国兽医科技. 1996(01)
[6]猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭活疫苗免疫效力试验[J]. 马思奇,王明,周金法,冯力.  中国畜禽传染病. 1994(02)
[7]猪流行性腹泻灭活疫苗的研究[J]. 王明,马思奇,周金法,于文涛,魏风祥,崔现兰,冯力,佟有恩,黄绍棠,刘长明.  中国畜禽传染病. 1993(05)
[8]青海地区猪流行性腹泻病调查[J]. 程庆华,牛小迎,叶成玉.  青海畜牧兽医杂志. 1992(03)
[9]应用免疫荧光法诊断猪流行性腹泻的研究[J]. 崔现兰,马思奇,王明,于文涛,魏风祥,周金法.  中国畜禽传染病. 1990(05)

博士论文
[1]猪流行性腹泻病毒S蛋白抗原表位鉴定及受体结合域的初步筛选[D]. 孙东波.中国农业科学院 2008
[2]猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白不同抗原片段在重组干酪乳杆菌中的表达及其免疫学评价[D]. 葛俊伟.东北农业大学 2008

硕士论文
[1]猪流行性腹泻病毒重组M蛋白的原核表达、纯化及鉴定[D]. 高慎阳.东北农业大学 2006



本文编号：3393240