牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2021-09-16 20:55

　　为制备牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD蛋白单克隆抗体,并对其免疫学特性进行分析与鉴定。用CHO细胞表达的IBRV-gD蛋白作为免疫原免疫8周龄的Balb/c小鼠,无菌取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞株,经小鼠腹腔注射,待小鼠腹腔膨胀后,收集腹水,纯化后进行单克隆抗体浓度、纯度、类及亚类、抗体效价、相对亲和常数、Western blot和间接免疫荧光测定。结果表明,筛选到2株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为4G3D4和9D7A7。4G3D4和9D7A7这2株单抗纯化后的浓度分别为2.6 mg/mL、1.6 mg/mL;亲和常数分别为2.30E+10、1.88E+09;抗体亚类均为IgG1,轻链为kappa链;且均能与IBRV发生特异性反应,与接种IBRV的MDBK细胞发生反应,产生特异性荧光;间接ELISA测定腹水效价分别为1∶204 800、1∶12 800。利用CHO细胞表达的IBRV-gD蛋白成功制备了2株单克隆抗体,为下一步建立特异性的IBRV检测方法奠定了基础。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(03)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

2株单克隆抗体的Western blot鉴定

2株单抗的纯度鉴定

2株单抗的亲和常数测定

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3397281