鸡Pax7基因多态性及组织表达规律的研究
发布时间：2021-09-19 03:02
Pax7基因调控骨骼肌卫星细胞的增殖和分化，是一个重要的转录因子。Pax7基因在遗传突变方面的研究，多集中于人、小鼠等，对于畜禽来说较少，目前，在鸡上还没有Pax7基因遗传变异的相关报道。本试验利用DNA混池测序技术对鸡Pax7基因筛选变异位点，用PCR-RFLP技术分析其变异位点，并在固始鸡安卡鸡F2代资源群中分析其群体遗传特性，对鸡的生长性状、屠体性状、肉质性状等经济性状及血液生化指标与多态位点进行关联分析；根据鸡Pax7基因在DNA水平上遗传变异的分析及该基因突变对鸡生长发育的影响，我们进一步在mRNA水平上研究Pax7基因不同发育阶段的表达规律，进一步推测进一步该基因的表达与鸡生长发育之间的关系，为研究Pax7基因功能提供更多的线索。主要结果如下:1、在鸡Pax7基因的第5外显子和第3内含子发现了两个SNP位点命名为g.42723T>C位点、g.3194-3224缺失位点。其中g.42723T>C位点属于同义突变，缺失位点g.3194-3224在第三内含子上，是一个31bp的缺失。2、关联分析结果可知：Pax7基因g.42723T>C位点对鸡4、8、10、12...
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Pax7基因蛋白结构示意图
图 1-2 肌纤维形成过程示意图[19]Fig.1-2 The schematic representation of myofibers[19]Pax7 基因功能研究ax7 基因在胚胎发育早期表达，参与胚胎早期近轴中胚层的发育，对机体骨骼肌的自和修复有着不可替代的作用[13]。胚胎发育时，Pax7 基因的缺乏会导致肌肉卫星细胞减，无法完成细胞周期从而细胞开始凋亡；Pax7基因有一定的抗凋亡作用[20]。年来，关于 Pax7 基因的研究主要在其功能上，主要研究 Pax7 基因在肌肉形成、受复、维持状态中自我更新等过程中的作用。有研究报道：在小鼠上，敲除 Pax7 基因组织，无法形成正常的肌纤维，小鼠在此后的 2-3 周会死亡[21]； Pax7 基因的正常表miRNA 干扰后，其下游基因 Myf5 和 MyoD 表达受到影响，肌肉不能正常发育[22]；构x7-EnR 结构（与 Pax7 基因起拮抗作用），发现肌肉卫星细胞能正常分化成肌肉细胞eale 等研究证明 Pax7 基因可作为治疗肌肉发育障碍或肌肉萎缩等肌肉疾病的靶标基shido 等在过度肥大的大鼠肌肉中研究 Pax7 基因的表达模式，发现大鼠发育早期的肌过量，这是因为 Pax7 调节肌肉卫星细胞时自我更新的作用[25]。Kirkpatrick 研究报道
图 1-3 荧光定量 PCR 扩增曲线Fig. 1-3 The real-time PCR dynamic curve资料来源：www.ibioo.com学种类学包括荧光染料和荧光探针。荧光探针[48]是在荧光能量共振转移的基交探针[49]、分子信标等。SYBR Green 染料是一种 DNA 结合染料，嵌出荧光[50]，它的非特异性很强，可以结合多个模板，不受反应体系的量 PCR 的定量方法量 PCR 可分为相对定量和绝对定量。相对定量通过计算样本与参照品，绝对定量通过比较样本与已知标准曲线而推算的样本目的 DNA 的量量需要选择内参基因来标准化模板的量，一般选择持家基因作为内参基Ct 值法，假设每经过一次循环，产物数量增加一倍，通过 Ct值反应起算出相对表达量。量需要制定标准曲线，通常选取质粒 DNA 作为绝对定量的标准品[52]
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国部分地方鸡种肌肉组织学特点及其肉品质的比较研究[J]. 吴信生,陈国宏,陈宽维,王克华,常洪,童海兵,吴兆林,李碧春,张学余. 江苏农学院学报. 1998(04)
[2]江西玉山猪肌肉组织学特征与肉质的关系[J]. 王亚鸣,刘龙芳. 江西农业大学学报. 1994(03)
硕士论文
[1]鸡肌纤维特性及Myogenin基因多态性的研究[D]. 秦召.河南农业大学 2007
[2]鸡血清生化指标与部分脂肪性状相关性及谷草转氨酶同工酶的研究[D]. 梅承君.河南农业大学 2007
本文编号：3400878
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Pax7基因蛋白结构示意图
图 1-2 肌纤维形成过程示意图[19]Fig.1-2 The schematic representation of myofibers[19]Pax7 基因功能研究ax7 基因在胚胎发育早期表达，参与胚胎早期近轴中胚层的发育，对机体骨骼肌的自和修复有着不可替代的作用[13]。胚胎发育时，Pax7 基因的缺乏会导致肌肉卫星细胞减，无法完成细胞周期从而细胞开始凋亡；Pax7基因有一定的抗凋亡作用[20]。年来，关于 Pax7 基因的研究主要在其功能上，主要研究 Pax7 基因在肌肉形成、受复、维持状态中自我更新等过程中的作用。有研究报道：在小鼠上，敲除 Pax7 基因组织，无法形成正常的肌纤维，小鼠在此后的 2-3 周会死亡[21]； Pax7 基因的正常表miRNA 干扰后，其下游基因 Myf5 和 MyoD 表达受到影响，肌肉不能正常发育[22]；构x7-EnR 结构（与 Pax7 基因起拮抗作用），发现肌肉卫星细胞能正常分化成肌肉细胞eale 等研究证明 Pax7 基因可作为治疗肌肉发育障碍或肌肉萎缩等肌肉疾病的靶标基shido 等在过度肥大的大鼠肌肉中研究 Pax7 基因的表达模式，发现大鼠发育早期的肌过量，这是因为 Pax7 调节肌肉卫星细胞时自我更新的作用[25]。Kirkpatrick 研究报道
图 1-3 荧光定量 PCR 扩增曲线Fig. 1-3 The real-time PCR dynamic curve资料来源：www.ibioo.com学种类学包括荧光染料和荧光探针。荧光探针[48]是在荧光能量共振转移的基交探针[49]、分子信标等。SYBR Green 染料是一种 DNA 结合染料，嵌出荧光[50]，它的非特异性很强，可以结合多个模板，不受反应体系的量 PCR 的定量方法量 PCR 可分为相对定量和绝对定量。相对定量通过计算样本与参照品，绝对定量通过比较样本与已知标准曲线而推算的样本目的 DNA 的量量需要选择内参基因来标准化模板的量，一般选择持家基因作为内参基Ct 值法，假设每经过一次循环，产物数量增加一倍，通过 Ct值反应起算出相对表达量。量需要制定标准曲线，通常选取质粒 DNA 作为绝对定量的标准品[52]
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国部分地方鸡种肌肉组织学特点及其肉品质的比较研究[J]. 吴信生,陈国宏,陈宽维,王克华,常洪,童海兵,吴兆林,李碧春,张学余. 江苏农学院学报. 1998(04)
[2]江西玉山猪肌肉组织学特征与肉质的关系[J]. 王亚鸣,刘龙芳. 江西农业大学学报. 1994(03)
硕士论文
[1]鸡肌纤维特性及Myogenin基因多态性的研究[D]. 秦召.河南农业大学 2007
[2]鸡血清生化指标与部分脂肪性状相关性及谷草转氨酶同工酶的研究[D]. 梅承君.河南农业大学 2007
本文编号：3400878
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