雌激素通过AMPK/mTOR通路调节PMNs活性的机制研究

发布时间：2021-09-30 15:28

　　中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils,PMNs）是先天免疫系统的重要组成部分,牛围产期乳腺和子宫中的炎性疾病易感性的增加与PMNs功能降低密切相关。而牛外周雌激素（estrogen,E）在PMNs活性调节中发挥重要作用。E作为一种重要的脂溶性类固醇激素,其细胞调节效应主要通过雌激素受体（estrogen receptors,ERs）介导的慢速基因组途径和快速非基因组途径实现。PMNs活性变化过程始终伴随着细胞能量代谢,而AMPK/mTOR是细胞内能量代谢调控网络的关键信号通路。实施本研究旨在阐释E在调节PMNs免疫活性过程中细胞内能量代谢状态与E水平之间的信号作用机制,为评价围产牛外周E与PMNs免疫活性的直接关联提供理论依据。试验采集母牛静脉血分离PMNs,分别用LPS、E和ICI体外诱导0h、1h、2h、4h、8h。采用qPCR、Western Blot方法检测ERα、ERβ、GPR30的表达,免疫活性信号通路关键信号TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB以及细胞能量代谢关键信号AMPK、mTOR的蛋白表达与磷酸化水平。结果显示:低浓度E显著抑... 

【文章来源】：内蒙古民族大学内蒙古自治区

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

瑞氏-姬母萨染色结果（40×）

14雌激素通过AMPK/mTOR通路调节PMNs活性的机制研究由图 2 可见，LPS 刺激 PMNs 后，TLR2 和 TLR4 的基因表达和蛋白表达水平（＜0.05）、MyD88 基因表达水平（p＜0.05）、NF-κB-p65 蛋白表达（p＜0.05）及酸化水平（p＜0.05）显著增强。这表明，在 LPS 诱导的 PMNs 炎性反应中，激TLR2/TLR4-MyD88-NF-κB 信号通路是 PMNs 活性增强的重要信号应答特征。AB C

图 4 A：western blot 结果；B、C、D：ERα、ERβ、GPR30 蛋白表达量；E、F:ERα、ERβ、mRNA 表达Figure 4 A: Results of western blot；B, C, D: protein expression levels of ERα, ERβ, GPR30；E, F: mRNA exprelevels of ERα and ERβ由图 4 可见，ERα和 ERβ基因表达和蛋白表达无变化，GPR30 蛋白表达显著增（p＜0.05），并具有时间依赖性。这表明，低浓度 E 诱导 PMNs 时，E 可能通过 GP介导的非基因组途径调节细胞效应。AB CD EF

【参考文献】：
期刊论文
[1]雌激素通过GPR30-AMPK-mTOR通路诱导Ishikawa细胞自噬增强细胞活力（英文）[J]. 何磊,胡惠军,潘勇权,谭秋芬,林小龙.  中国生物化学与分子生物学报. 2017(04)



本文编号：3416147