基于分子对接技术的抗新霉素单链抗体制备和进化

发布时间：2021-10-08 08:51

　　为了制备高灵敏度、高特异性的抗新霉素单链抗体,试验采用从杂交瘤细胞中提取单链抗体基因,转入大肠杆菌表达系统进行表达。然后采用分子对接的方法研究抗新霉素单链抗体和新霉素分子的识别机制并进行虚拟突变,将关键结合位点的氨基酸残基进行突变,在对突变体进行表达和纯化后建立间接竞争酶联免疫吸附分析方法。结果表明:氨基酸残基Leu227为单链抗体与新霉素结合的关键氨基酸残基,将其突变为Asp,获得突变体。IC₅₀为1.58 ng/mL,相比于亲本单链抗体的26.23 ng/mL,突变体的敏感性提高了16.6倍。试验成功制备了高灵敏度、高特异性的抗新霉素单链抗体,为动物源性食品中的抗生素残留检测提供了研究基础。 

【文章来源】：安徽农业科学. 2020,48(20)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

VH、VL、ScFv基因扩增

Western Blot分析抗NEO-ScFv

通过SDS-PAGE分析纯化后ScFv

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3423833