miR-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响

发布时间：2021-10-12 01:27

　　MicroRNAs （mirRNA）是一类长约22-25nt的非编码的单链RNA分子,广泛存在于植物,动物和人类的细胞中,通过碱基配对的方式结合到靶mRNA的3’非编码区（3’UTR）,从而抑制其翻译。与肌肉发育相关的mirRNA有很多。其中miR-133b为肌肉特异性mirRNA,是myomiRs家族成员。目前关于1niR-133b在牛骨骼肌卫星细胞中的研究较少。为了探讨miR-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,本实验以原代培养的牛骨骼肌卫星细胞为实验材料,通过Real Time PCR检测正常培养的牛骨骼肌卫星细胞在增殖阶段miR-133b的表达量。构建了miR-133b真核过表达载体pcDNA3.1（+）-miR-133b,转染后采用EdU试剂盒检测miR-133b对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,利用生物信息学方法预测miR-133b可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证靶基因,转染miR-133b的真核过表达载体后,Real Time PCR和Western Blot检测SP1基因表达变化。结果表明：使用胶原酶XI与胰蛋白酶相结合的方法,经过差速贴壁成功分离了原代牛骨骼肌卫... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

骨豁肌发育关键阶段示意图

肌非特异性microRNA调节骨豁肌细胞增殖、分化网络图

细胞生长图片


本文编号：3431619