绵羊肺炎支原体黏附因子类p102基因的原核表达及免疫学特性研究

发布时间：2021-10-27 01:23

　　绵羊支原体性肺炎是由绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoiae,MO）引发的一种高度接触传染性疾病,MO既可感染绵羊,也可感染山羊。本研究将MO内蒙古分离株（SZWQ株）复活后大量培养,提取其基因组。根据类p102的DNA序列设计特异性引物,大量扩增类p102基因。由于类p102基因序列中含有一个编码色氨酸的密码子TGA,在原核表达系统中TGA是终止密码子,而TGG编码色氨酸。所以在本试验中设计两对特异性引物,通过重叠延伸PCR法,将类p102基因的一个密码子TGA突变为TGG,从而使类p102基因在原核表达系统中顺利表达。表达产物经SDS-PAGE电泳检测。结果显示：蛋白分子量大小为58kDa,与预期目的蛋白的大小一致。将纯化后的融合蛋白经Western Blot检测。结果表明：所表达出的外源融合蛋白具有良好的反应原性。将纯化后的融合蛋白制作成疫苗,对小鼠进行动物免疫试验。小鼠经过4次免疫后,使用ELISA方法检测小鼠的血清中有无类p102的抗体产生。结果表明：通过4次免疫后,小鼠血清中均产生了针对类p102的抗体,且融合蛋白免疫组与PBS对照组相比差异显著（P&... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1支原体的分类Fig.1Theclassificationofmycoplasma

图2支原体模式图

图3支原体的结构

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3460589