CEF感染REV后部分染色体微卫星不稳定性的研究

发布时间：2021-11-04 10:21

　　禽网状内皮组织增殖病（reticuloendotheliosis, RE）是继鸡马立克氏病、鸡淋巴细胞白血病之后的第三种病毒性肿瘤病。微卫星不稳定性（microsatellite instability, MSI）广泛地应用于人类肿瘤病的检测。目前未见有应用微卫星技术研究禽网状内皮组织增殖病病毒（reticuloendotheliosis virus, REV）感染鸡胚成纤维细胞后引起宿主基因组变化的报道。本试验将REV感染鸡胚成纤维细胞后,检测鸡染色体上微卫星不稳定性,旨在发现禽网状内皮组织增殖病病毒感染鸡胚成纤维细胞后是否引起宿主基因组的改变,为此病的早期诊断及肿瘤的分子发病机制提供线索。本试验中应用22个SPF鸡胚培养鸡胚成纤维细胞,将每个鸡胚的细胞分成两部分,一半细胞接种REV,另一半作为对照,获得含试验和对照的22组样本,提取细胞的基因组DNA。选取鸡1、2、3号染色体上135个微卫星标记,分别采用聚合酶链式反应、12%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染等技术检测基因组微卫星不稳定性。试验结果统计显示135个微卫星标记,有106个位点发生不同百分率的MSI,占全部微卫星标记的78.... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
摘要
ABSTRACT
文中所引部分缩略语
前言
上篇 文献综述
    第一章 禽网状内皮组织增殖病综述
        1 病原
            1.1 病毒的分类
            1.2 病毒的理化特性
        2 病毒的复制
        3 流行病学
            3.1 分布
            3.2 宿主
            3.3 感染途径和传播方式
        4 发病机制
            4.1 急性网状内皮细胞肿瘤的形成
            4.2 矮小综合症
            4.3 慢性肿瘤的形成
        5 临床症状和病理变化
            5.1 急性网状内皮细胞增生
            5.2 矮小综合征
            5.3 慢性肿瘤的形成
        6 诊断
            6.1 病毒分离法
            6.2 间接免疫荧光试验(IFA)
            6.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)
            6.4 PCR方法
        7 防治措施
            7.1 疫苗
            7.2 治疗
            7.3 预防和控制措施
        8 小结
        参考文献
    第二章 微卫星不稳定性及其在肿瘤上的研究
        1 微卫星不稳定性
            1.1 微卫星不稳定性产生的机制
            1.2 微卫星不稳定性的检测方法
            1.3 微卫星不稳定性的肿瘤发生机制
        2 微卫星不稳定性在肿瘤学上的应用研究
            2.1 人医临床中微卫星不稳定性在肿瘤中的发现
            2.2 禽肿瘤病微卫星不稳定性的研究
        参考文献
下篇 试验研究
    第三章 鸡胚成纤维细胞的培养及REV病毒感染
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 细胞培养的结果
            2.3 PCR检测结果
        3 讨论
            3.1 关于REV增殖
            3.2 PCR检测方法的选择
            3.3 env基因的扩增
            3.4 病毒的纯化和负染
        参考文献
        Abstract
    第四章 CEF感染REV后部分染色体MSI的研究
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果与分析
            2.1 部分微卫星变性聚丙烯酰酰胺凝胶电泳结果
            2.2 不同位点微卫星不稳定性统计结果
            2.3 不同样品微卫星不稳定性统计结果
            2.4 发生MSI的位点的序列比对结果
        3 讨论
            3.1 MSI的发生
            3.2 微卫星不稳定性发生率与位点有关
            3.3 1,2,3号染色体上MSI的特点及其其临床病理学意义
        4 小结
        参考文献
        ABSTRACT
全文总结
创新之处
攻读硕士学位期间发表论文
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]禽网状内皮增生病毒囊膜基因gp90的克隆表达及ELISA方法的初步建立[J]. 余冲,黄勇,田明星,石敏,李敏,赵芳芳.  浙江大学学报(农业与生命科学版). 2011(04)
[2]网状内皮组织增殖病研究进展[J]. 贺帅.  上海畜牧兽医通讯. 2010(04)
[3]错配修复和微卫星不稳定性与食管癌的关系[J]. 李斌,袁宁.  中国医药指南. 2010(19)
[4]鸡胚成纤维细胞感染马立克氏病病毒后部分染色体上微卫星不稳定性研究[J]. 高喜梅,邱燕,韩涛,姚刚,杨德吉.  新疆农业大学学报. 2009(01)
[5]CAV与REV共感染SPF鸡对疫苗免疫反应的抑制作用[J]. 李延鹏,崔治中,姜世金,郭慧君.  中国兽医学报. 2008(11)
[6]微卫星DNA检测方法的研究[J]. 杜爽,仇雪梅.  生物技术通报. 2008(03)
[7]禽肿瘤性疾病世界流行现状及分析[J]. 张洪海,成子强.  中国家禽. 2007(17)
[8]鸭瘟病毒提纯方法比较[J]. 文明,程安春,汪铭书,吴彤.  山地农业生物学报. 2006(02)
[9]微卫星不稳定性与恶性肿瘤[J]. 周尊强,赵金鹏.  国际遗传学杂志. 2006(01)
[10]含有禽网状内皮组织增生病病毒基因组片段的天然重组禽痘病毒的研究[J]. 丁家波,崔治中,于立娟,孙淑红,姜世金.  微生物学报. 2004(05)

博士论文
[1]禽网状内皮组织增殖病病毒检测及其动物感染模型的建立[D]. 翟新验.吉林大学 2007

硕士论文
[1]CEF感染ALV-J后2、3号染色体微卫星不稳定性的研究[D]. 赵波.南京农业大学 2012
[2]鸡胚成纤维细胞感染禽白血病病毒ALV-J后1号染色体微卫星不稳定性研究[D]. 吴艳婷.南京农业大学 2011
[3]鸡马立克肿瘤形成前宿主基因组的部分微卫星不稳定性研究[D]. 李尚同.南京农业大学 2010
[4]马立克肿瘤及接种火鸡疱疹病毒活疫苗后的SPF鸡微卫星不稳定性的研究[D]. 郭俊清.南京农业大学 2009
[5]马立克氏病病毒感染鸡胚成纤维细胞后4号染色上基因微卫星不稳定性研究[D]. 尚月丽.南京农业大学 2007
[6]鸡马立克肿瘤发生后2号染色体微卫星标记变化的研究[D]. 夏继飞.南京农业大学 2006
[7]禽网状内皮组织增殖病病毒PCR及RT-PCR检测方法的研究和p30主要抗原域的原核表达[D]. 葛菲菲.南京农业大学 2003



本文编号：3475539