MCRS1、CDX2和NANOG在体外受精和核移植牛囊胚内细胞团及滋养层细胞中的表达
发布时间：2021-11-04 13:45
胎盘发育异常是目前公认的导致克隆牛体内发育失败的主要原因,而越来越多的证据表明在囊胚阶段滋养层和内细胞分化异常是引起胎盘发育异常的关键因素。哺乳动物的早期胚胎第一次细胞分化过程极其复杂,受到多种调控因子的影响,其中MCRS1、CDX2、NANOG在胚胎发育过程中起着十分重要的作用。MCRS1主要参与细胞的增殖和转化;CDX2在胚胎发育过程中的主要作用是维持胚胎生长、诱导细胞分化和器官的形成;NANOG基因对早期胚胎中胚胎干细胞的自我更新以及维持细胞多潜能性发挥着关键性的作用,其被认为是全能型或者多能性干细胞的重要标志物。截止目前,有关MCRS1、CDX2和NANOG在体外受精（In vitro fertilization,IVF）以及核移植囊胚内细胞团（ICM）和滋养层（TE）细胞的表达模式和作用的研究尚不够完善,主要原因是囊胚的内细胞团和滋养层细胞不易完全分离开来进行针对性的检测分析。本研究通过体外受精和核移植技术获得IVF和核移植囊胚,然后通过磁珠分选的方法分离纯化囊胚的ICM和TE细胞;进一步运用qRT-PCR技术研究两种囊胚的ICM和TE细胞中MCRS1、CDX2和NANOG的...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
磁珠分选后得到的ICM和TE细胞左列为ICM细胞，右列为TE细胞，第一行为Hoechst33342染色，第二行为ConA-FITC染色，第三行为merged图像
图 3-1 MCRS1 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 细胞中的相对表达量a.b 表示组间具有显著性差异（P<0.05）Fig. 3-1 Relative expression levels of MCRS1 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differeletters indicate differences (P < 0.05) CDX2 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 细胞中的表达情况以相同的方法得到的 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 细胞，利用荧光定量 PCR 的方法定了CDX2 在IVF 囊胚ICM 和 TE 细胞中的表达情况。经过数据处理与分析，CD果如图 3-2 所示，CDX2 在牛 IVF 囊胚的 TE 细胞中的相对表达量显著高于在 IC的相对表达量（P<0.05）。
图 3-2 CDX2 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 细胞中的相对表达量a.b 表示组间具有显著性差异（P<0.05）Fig. 3-2 Relative expression levels of CDX2 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differentletters indicate differences (P < 0.05).2 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 细胞中的表达情况对 IVF 囊胚进行磁珠分选得到 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 细胞，然后通过实时荧光 PCR 的方法，分别测定了 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 细胞中的表达水平。经据处理和分析，结果如图 3-3 所示，NANOG 主要在囊胚的 ICM 中表达，在 TE中的相对表达量较低，且在 ICM 中的相对表达量显著高于在 TE 细胞中的表达量<0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Extending the functions of the homeotic transcription factor Cdx2 in the digestive system through nontranscriptional activities[J]. Jean-No?l Freund,Isabelle Duluc,Jean-Marie Reimund,Isabelle Gross,Claire Domon-Dell. World Journal of Gastroenterology. 2015(05)
[2]结直肠肿瘤的新标记——CDX2[J]. 方义湖,来茂德. 国际遗传学杂志. 2006(04)
[3]肠道上皮特异性基因CDX2[J]. 宋艳,李凌. 世界华人消化杂志. 2004(02)
[4]牛体外受精技术研究进展[J]. 黄志坚,黄依明. 福建畜牧兽医. 2002(01)
[5]卵丘细胞核移植技术生产克隆牛犊[J]. 安晓荣,苟克勉,关宏,侯健,林爱星,陈永福,朱士恩,曾申明,田见晖. 中国科学（C辑:生命科学）. 2002(01)
本文编号：3475850
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
磁珠分选后得到的ICM和TE细胞左列为ICM细胞，右列为TE细胞，第一行为Hoechst33342染色，第二行为ConA-FITC染色，第三行为merged图像
图 3-1 MCRS1 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 细胞中的相对表达量a.b 表示组间具有显著性差异（P<0.05）Fig. 3-1 Relative expression levels of MCRS1 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differeletters indicate differences (P < 0.05) CDX2 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 细胞中的表达情况以相同的方法得到的 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 细胞，利用荧光定量 PCR 的方法定了CDX2 在IVF 囊胚ICM 和 TE 细胞中的表达情况。经过数据处理与分析，CD果如图 3-2 所示，CDX2 在牛 IVF 囊胚的 TE 细胞中的相对表达量显著高于在 IC的相对表达量（P<0.05）。
图 3-2 CDX2 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 细胞中的相对表达量a.b 表示组间具有显著性差异（P<0.05）Fig. 3-2 Relative expression levels of CDX2 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differentletters indicate differences (P < 0.05).2 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 细胞中的表达情况对 IVF 囊胚进行磁珠分选得到 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 细胞，然后通过实时荧光 PCR 的方法，分别测定了 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 细胞中的表达水平。经据处理和分析，结果如图 3-3 所示，NANOG 主要在囊胚的 ICM 中表达，在 TE中的相对表达量较低，且在 ICM 中的相对表达量显著高于在 TE 细胞中的表达量<0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Extending the functions of the homeotic transcription factor Cdx2 in the digestive system through nontranscriptional activities[J]. Jean-No?l Freund,Isabelle Duluc,Jean-Marie Reimund,Isabelle Gross,Claire Domon-Dell. World Journal of Gastroenterology. 2015(05)
[2]结直肠肿瘤的新标记——CDX2[J]. 方义湖,来茂德. 国际遗传学杂志. 2006(04)
[3]肠道上皮特异性基因CDX2[J]. 宋艳,李凌. 世界华人消化杂志. 2004(02)
[4]牛体外受精技术研究进展[J]. 黄志坚,黄依明. 福建畜牧兽医. 2002(01)
[5]卵丘细胞核移植技术生产克隆牛犊[J]. 安晓荣,苟克勉,关宏,侯健,林爱星,陈永福,朱士恩,曾申明,田见晖. 中国科学（C辑:生命科学）. 2002(01)
本文编号：3475850
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