LDH@SiO 2 壳-核纳米复合材料的合成及其作为新城疫DNA疫苗载体的研究
发布时间：2021-11-04 13:47
新城疫（Newcastle disease, ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的一种致死性、高度接触性的禽类传染病,给养禽业带来了巨大的危害,被国际兽医局（OIE）定为A类传染病。ND的主要症状是呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血。ND防治的主要途径是免疫接种,灭活苗和弱毒苗是目前常用的预防新城疫的两种疫苗,虽然灭活苗和弱毒苗免疫效果尚可,但是免疫保护周期不长,且还会出现毒力返强。DNA疫苗虽然既可以诱导体液免疫和细胞免疫,但DNA疫苗存在体内易降解、抗原表达量低等不足之处。利用可生物降解材料作为基因递送载体,可保护DNA免遭核酸酶降解,提高其转染效率及其靶向性,增强免疫效果。本试验以自行合成的可降解生物材料LDH@SiO2壳-核纳米复合材料为基因递送载体,以新城疫病毒pVAX1-F （o）为模型药物,制备PFDNA-LDH@SiO2-NPs,并对pFDNA-LDH@SiO2-NPs制备工艺、理化特性、稳定性、抑菌活性等进行了较为详细的研究。试验结果表明, 以本试验确定的最佳工艺制备的pFDNA-LDH@SiO2-NPs形态规则、分散性好,平均粒径为371.93nm, Zeta...
【文章来源】：黑龙江大学黑龙江省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－２?Ｓｉ化纳米粒子扫描电镜下形态．Ｆｉｇ３－２?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?Ｓｉ〇２?ｂｙ?ｓｃａｎｎｉｎｇ?ｅｌｅｃｔｒｏｅｘｅｒｉｍｅ打ｔａｌ
即得评ＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ。??３．２．３?ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?表征??采用本试验碗定的优化工艺制备的ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓＴＥＭ观察结果见图３－４。??纳米粒表面光滑、呈球形、形态规则、粒径平均、分散性好，无明显黏连、??塌陷等现象。从图３－５可Ｗ看出，Ｗ优化工艺制各的ｐＦＤＮＡ－ＳＫ）２－ＮＰｓ粒径??范围在８１．２６？１００．２７ｎｍ么间，粒径分布较窄，平均粒径为９０．５ｎｍ。从表３－４可Ｗ??看出，所合成的Ｓｉ〇２纳米粒的Ｚｅ化电位为－２１．０８ｍＶ，ＡＰＴＥＳ－Ｓｉ〇２纳米粒的Ｚｅｔａ??电位为巧８．３７ｍＶ，ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ０２－ＮＰｓＺｅ化电位为＋１．４３ｍＶ。Ｓｉ０２纳米粒表面富含??桂径基，因而带负电箭，而进行氨基化修饰后，因为氨基带正电荷致使ＡＦＴＥＳ－Ｓｉ〇２??纳米粒带正电荷，带正电荷的ＡＰＴＥＳ－Ｓｉ〇２纳米粒与带负电荷的质粒ＤＮＡ通过静??电吸附结合
?＇??３．２．７阱ＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ体外释放试验??从图３－９中可Ｗ看出，在１２ｈ时ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ中的质粒ＤＮＡ释放量达到??（３２．８化１．４７）?％?（ｎ＝３），释放速度很快，在２４ｈ时释放量法到（４２．２化１．３５）??〇／〇（ｎ＝３），在０￣２４ｈ之间，质粒ＤＮＡ的释放是一个突释的过程；在２４￣９化??之间，释放量达到（６４．２７±１．５２）?％?（ｎ＝３）；在９化之后质粒的释放速度逐??渐放慢并赵于平缓，在２８８ｈ时质粒ＤＮＡ的释放量达到（７１．４２±１．２）％（ｎ＝３）。??１００「??９０?－??９?８０?－??７０?－????？－＊?？???＊??桓?６０?－??銀加－??廣?４０?－??蛛?／??＜?３０?Ｙ??ｅ?２０?－ｊ??ａ?１０?／??Ｑ?＾?１?Ｉ?１?１?Ｉ?１?Ｉ?Ｉ?Ｉ?１?Ｉ?１?１??０?２４?４８?７２?９６?１２０?１４４?１６８?１９２?２１６?２４０?２６４?２８８?３１２??时间／小时??图３－９?ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ体外择放曲线??Ｆｉｇｕｒｅ?３－９?Ｔｈｅ?ｒｅｌｅａｓｉｎｇ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ??３．３?阱ＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?制备??３．３．１?阳ＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?表征??３．３．１．１?ｐＦＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｗ〇２－ＮＰｓ形态、粒径分布和Ｚｄａ电位检测??图?３－１０?中给出了?ｐＦＤＮＡ－Ｓ沿２－ＮＰｓ、ＬＤＨ?和?ｐＦＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｓ沿２－ＮＰｓ?的透射??电镜图。从图３－１０?（ａ）可Ｗ看出
【参考文献】：
期刊论文
[1]腺相关病毒（AAV）载体研究进展[J]. 赵丽琴,席斌,彭华松. 生物技术进展. 2012(02)
[2]当前新城疫的流行特点与防治[J]. 汝桂春. 黑龙江畜牧兽医. 2012(06)
[3]无机纳米颗粒作为非病毒基因载体的研究[J]. 刘珊,刘嘉茵,崔毓桂. 国际生殖健康/计划生育杂志. 2012(02)
[4]基因治疗载体的研究进展[J]. 张明明,邱峰. 科技资讯. 2011(17)
[5]基因治疗载体的研究进展[J]. 王保琳. 淮海医药. 2011(02)
[6]层状双氢氧化物在生物工程应用中的研究进展[J]. 赵建志,杨亲正,张海光. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(47)
[7]壳聚糖基非病毒基因载体研究新进展[J]. 刘决照,辛梅华,李明春. 化工进展. 2010(08)
[8]硅纳米颗粒的表面改性及生物应用[J]. 赵颜忠,余智萍,朱晒红,周建大,黄艳艳,王国慧,黄东,周科朝. 中国有色金属学报. 2010(07)
[9]水滑石类层柱材料作为新型药物载体的研究进展[J]. 李镇,郝堂娜,丁平田. 沈阳药科大学学报. 2010(06)
[10]纳米药物载体系统的研究[J]. 黄红娜,张丹参,张力,丁杰. 河北北方学院学报(医学版). 2010(02)
本文编号：3475854
【文章来源】：黑龙江大学黑龙江省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－２?Ｓｉ化纳米粒子扫描电镜下形态．Ｆｉｇ３－２?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?Ｓｉ〇２?ｂｙ?ｓｃａｎｎｉｎｇ?ｅｌｅｃｔｒｏｅｘｅｒｉｍｅ打ｔａｌ
即得评ＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ。??３．２．３?ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?表征??采用本试验碗定的优化工艺制备的ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓＴＥＭ观察结果见图３－４。??纳米粒表面光滑、呈球形、形态规则、粒径平均、分散性好，无明显黏连、??塌陷等现象。从图３－５可Ｗ看出，Ｗ优化工艺制各的ｐＦＤＮＡ－ＳＫ）２－ＮＰｓ粒径??范围在８１．２６？１００．２７ｎｍ么间，粒径分布较窄，平均粒径为９０．５ｎｍ。从表３－４可Ｗ??看出，所合成的Ｓｉ〇２纳米粒的Ｚｅ化电位为－２１．０８ｍＶ，ＡＰＴＥＳ－Ｓｉ〇２纳米粒的Ｚｅｔａ??电位为巧８．３７ｍＶ，ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ０２－ＮＰｓＺｅ化电位为＋１．４３ｍＶ。Ｓｉ０２纳米粒表面富含??桂径基，因而带负电箭，而进行氨基化修饰后，因为氨基带正电荷致使ＡＦＴＥＳ－Ｓｉ〇２??纳米粒带正电荷，带正电荷的ＡＰＴＥＳ－Ｓｉ〇２纳米粒与带负电荷的质粒ＤＮＡ通过静??电吸附结合
?＇??３．２．７阱ＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ体外释放试验??从图３－９中可Ｗ看出，在１２ｈ时ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ中的质粒ＤＮＡ释放量达到??（３２．８化１．４７）?％?（ｎ＝３），释放速度很快，在２４ｈ时释放量法到（４２．２化１．３５）??〇／〇（ｎ＝３），在０￣２４ｈ之间，质粒ＤＮＡ的释放是一个突释的过程；在２４￣９化??之间，释放量达到（６４．２７±１．５２）?％?（ｎ＝３）；在９化之后质粒的释放速度逐??渐放慢并赵于平缓，在２８８ｈ时质粒ＤＮＡ的释放量达到（７１．４２±１．２）％（ｎ＝３）。??１００「??９０?－??９?８０?－??７０?－????？－＊?？???＊??桓?６０?－??銀加－??廣?４０?－??蛛?／??＜?３０?Ｙ??ｅ?２０?－ｊ??ａ?１０?／??Ｑ?＾?１?Ｉ?１?１?Ｉ?１?Ｉ?Ｉ?Ｉ?１?Ｉ?１?１??０?２４?４８?７２?９６?１２０?１４４?１６８?１９２?２１６?２４０?２６４?２８８?３１２??时间／小时??图３－９?ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ体外择放曲线??Ｆｉｇｕｒｅ?３－９?Ｔｈｅ?ｒｅｌｅａｓｉｎｇ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｐＦＤＮＡ－Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ??３．３?阱ＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?制备??３．３．１?阳ＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｓｉ〇２－ＮＰｓ?表征??３．３．１．１?ｐＦＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｗ〇２－ＮＰｓ形态、粒径分布和Ｚｄａ电位检测??图?３－１０?中给出了?ｐＦＤＮＡ－Ｓ沿２－ＮＰｓ、ＬＤＨ?和?ｐＦＤＮＡ－ＬＤＨ＠Ｓ沿２－ＮＰｓ?的透射??电镜图。从图３－１０?（ａ）可Ｗ看出
【参考文献】：
期刊论文
[1]腺相关病毒（AAV）载体研究进展[J]. 赵丽琴,席斌,彭华松. 生物技术进展. 2012(02)
[2]当前新城疫的流行特点与防治[J]. 汝桂春. 黑龙江畜牧兽医. 2012(06)
[3]无机纳米颗粒作为非病毒基因载体的研究[J]. 刘珊,刘嘉茵,崔毓桂. 国际生殖健康/计划生育杂志. 2012(02)
[4]基因治疗载体的研究进展[J]. 张明明,邱峰. 科技资讯. 2011(17)
[5]基因治疗载体的研究进展[J]. 王保琳. 淮海医药. 2011(02)
[6]层状双氢氧化物在生物工程应用中的研究进展[J]. 赵建志,杨亲正,张海光. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(47)
[7]壳聚糖基非病毒基因载体研究新进展[J]. 刘决照,辛梅华,李明春. 化工进展. 2010(08)
[8]硅纳米颗粒的表面改性及生物应用[J]. 赵颜忠,余智萍,朱晒红,周建大,黄艳艳,王国慧,黄东,周科朝. 中国有色金属学报. 2010(07)
[9]水滑石类层柱材料作为新型药物载体的研究进展[J]. 李镇,郝堂娜,丁平田. 沈阳药科大学学报. 2010(06)
[10]纳米药物载体系统的研究[J]. 黄红娜,张丹参,张力,丁杰. 河北北方学院学报(医学版). 2010(02)
本文编号：3475854
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