广东部分地区犬流感血清流行病学调查及病毒的分离鉴定

发布时间：2021-11-17 12:20

　　犬流感是由犬流感病毒（Canine influenza virus, CIV）引起的一种高度接触性、传染性呼吸道疾病。已经证实有马源H3N8和禽源H3N2亚型流感病毒可以造成犬的感染,并引起犬的种内传播。犬与人类接触密切,目前尚不清楚流感病毒是否可以通过犬传染给人。因此,对犬流感的流行病学调查和病毒的监测具有重要公共卫生意义。研究利用血凝抑制试验对来源于广东省的309份犬血清样本进行H3亚型流感病毒抗体检测,总体阳性率为26.21%。对不同类型、不同区域的犬抗体阳性率进行比较,结果显示宠物犬、农家犬及流浪犬的抗体阳性率分别为34.02%、9.09%和25.93%,个别地区的阳性率超过50%。说明H3亚型犬流感已在犬群中流行,并且与近年的调查结果相比呈上升趋势。采集广东地区29份有呼吸道症状犬的鼻拭子,接种鸡胚分离病毒,并进行亚型鉴定和序列分析。分离获得2株H3N2亚型犬流感病毒,分别命名为A/canine/Guangdong/12/2012（H3N2）及A/canine/Guangdong/23/2012（H3N2）.根据参考毒株的基因序列设计特异性引物,用RT-PCR的方法分别扩增两... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
摘要
ABSTRACT
缩略语及符号
第一章 文献综述
    1 流感病毒的病原学特征
        1.1 流感病毒的结构与理化特性
        1.2 病毒的分类
        1.3 增殖特性
        1.4 血凝特性
        1.5 分子特征
    2 犬流感流行病学研究进展
        2.1 H3N8亚型犬流感
        2.2 H5N1亚型犬流感
        2.3 H1N1亚型犬流感
        2.4 H3N2亚型犬流感
        2.5 其他亚型犬流感
    3 犬流感检测方法研究进展
        3.1 血清学检测
        3.2 病原学检测
    4 犬流感的危害与公共卫生意义
    参考文献
第二章 H3亚型犬流感的血清流行病学调查
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 犬血清样本的收集
        1.2 菌株与血清
        1.3 材料
        1.4 血清处理
        1.5 血凝与血凝抑制试验
    2 结果
        2.1 样品来源与总阳性率
        2.2 宠物犬、农家犬、流浪犬H3亚型抗体阳性率比较
        2.3 不同区域宠物犬H3亚型CIV抗体检测
        2.4 不同区域农家散养犬H3亚型CIV抗体检测
    3 讨论
    参考文献
    Abstract
第三章 犬流感病毒的分离鉴定与遗传演化分析
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 样品与实验动物
        1.2 主要试剂与仪器
        1.3 引物设计与合成
        1.4 CIV的分离与鉴定
        1.5 全基因序列测定及遗传演化关系分析
    2 结果
        2.1 病毒分离与初步鉴定
        2.2 病毒RT-PCR鉴定
        2.3 基因核苷酸序列分析
        2.4 氨基酸序列比对
        2.5 遗传演化分析
    3 讨论
    参考文献
    Abstract
第四章 H3N2亚型犬流感病毒NP蛋白的表达与纯化
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 病毒株、血清、菌株及载体
        1.2 主要试剂
        1.3 引物设计
        1.4 病毒RNA提取与反转录
        1.5 重组表达质粒的构建与鉴定
        1.6 NP蛋白的诱导表达与纯化
    2 结果
        2.1 NP基因的扩增
        2.2 重组质粒的酶切鉴定
        2.3 重组NP蛋白的SDS-PAGE分析
        2.4 Western-blot分析结果
    3 讨论
    参考文献
    Abstract
全文总结
致谢
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]犬流感（H3N2亚型）血清学调查[J]. 粟硕,李华涛,陈济铛,黄震,赵付荣,张桂红,李守军.  中国畜牧兽医. 2013(02)
[2]H3N2亚型犬流感病毒重组HA1蛋白间接ELISA检测方法的建立[J]. 黄柏槐,张敦伟,远立国,张桂红,李守军.  中国预防兽医学报. 2012(09)
[3]H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定[J]. 贺贞,林东子,李观强,马卫列,丁航,张志珍.  第三军医大学学报. 2012(16)
[4]锦州地区犬流感的血清学调查[J]. 杨新艳,于迪,夏冬华,周铁忠.  畜牧与兽医. 2012(02)
[5]H3N2亚型犬流感病毒的分离鉴定[J]. 佘利旋,熊永忠,远立国,袁天梅,贾坤,李守军.  中国预防兽医学报. 2011(01)
[6]H5亚型禽流感病毒感染犬、猫的流行病学调查[J]. 张端秀,温清萍,张险朋,王健青,林伟杰,朱燕秋.  中国畜牧兽医. 2010(10)
[7]利用真核表达的猪流感病毒NP蛋白制备其特异性的单克隆抗体[J]. 郭利敏,乔传玲,陈艳,杨焕良,张健,辛晓光,陈化兰.  中国预防兽医学报. 2010(06)
[8]犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立[J]. 高晓宇,曹荣峰,张桂红,李守军.  中国预防兽医学报. 2010(01)
[9]禽流感病毒神经氨酸酶的结构及其生物学功能[J]. 王全英,乔传玲,申之义.  动物医学进展. 2005(12)
[10]H5N1和H9N2亚型禽流感病毒型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的建立[J]. 宋建领,张富强,胡媛媛,王金萍.  中国兽医科技. 2005(11)



本文编号：3500900