高氟对体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞毒性研究

发布时间：2021-12-09 03:55

　　氟中毒是一种地球化学性疾病,氟能够通过血脑屏障对大脑产生毒害作用,造成中枢神经系统的功能障碍。近年来,高氟损伤机体神经系统的研究已经成为氟中毒研究领域的热点。课题组前期研究发现氟中毒可以降低子代大鼠学习记忆能力,大脑皮质和海马结构损伤,出现病理学改变,神经细胞凋亡率升高,DNA损伤严重等现象。神经细胞体外培养的成功为神经系统疾病的研究提供了很好的细胞模型,神经细胞也广泛应用于神经细胞毒性效应和神经毒性作用机制的研究。为了进一步丰富氟中毒理论,本试验以体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞为研究对象,采用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L5个不同浓度的氟化钠(NaF)进行细胞攻毒试验,研究不同浓度氟化钠对神经细胞形态、细胞活性、细胞骨架及细胞内微管相关蛋白MAP2表达的影响。 本试验应用新生3天以内的SD乳鼠作为试验材料,无菌分离大脑皮质神经细胞,以DMEM完全培养基培养,待4h细胞贴壁后更换为无血清培养基Neurobasal,第3d半量换液,建立稳定的SD大鼠大脑皮质神经细胞体外培养体系。神经细胞于培养第7天采用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L5个不同浓度的...

【文章来源】： 河南科技学院河南省

【文章页数】：68 页

【文章目录】：
英文缩略词表
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1 前言
    2 氟能通过血-脑屏障
    3 高氟对智商的影响
    4 高氟对行为的影响
    5 高氟对动物脑重的影响
    6 氟对中枢神经系统的直接损伤
        6.1 氟对大脑内神经递质、受体及蛋白的影响
        6.2 氟对中枢神经组织结构的影响
        6.3 氟对大脑氧化代谢的影响
    7 氟中毒与细胞骨架的研究情况
    8 体外培养神经细胞的应用
第二章 SD大鼠大脑皮质神经细胞的的原代培养
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 试验动物
        1.2 相关试验试剂
        1.3 主要试剂的配制
        1.4 主要仪器设备
    2 试验方法
        2.1 试验相关材料准备
        2.2 SD大鼠大脑皮质神经细胞的培养
        2.3 SD大鼠大脑皮质神经细胞的尼氏染色(Nissl's staining)鉴定
    3 结果与分析
        3.1 原代培养SD大鼠大脑皮质神经细胞不同时期的形态观察
        3.2 原代培养SD大鼠大脑皮质神经细胞尼氏染色(Nissl's staining)鉴定
    4 讨论
        4.1 神经细胞的原代培养及意义
        4.2 大脑皮质神经细胞原代培养方法的改进
        4.3 大脑皮质神经细胞Nissl's染色的特异性
    5 小结
第三章 高氟对SD大鼠大脑皮质神经细胞细胞形态、细胞活性及细胞骨架的影响
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 试验动物
        1.2 相关试验试剂
        1.3 主要试验试剂的配制
        1.4 主要试验仪器设备
    2 试验方法
        2.1 光学显微镜观察高氟致神经细胞细胞形态变化
        2.2 扫描电镜观察氟致神经细胞细胞形态变化
        2.3 透射电镜观察氟致神经细胞超微结构变化
        2.4 MTT比色法检测高氟对大脑皮质神经细胞细胞活性的影响
        2.5 高氟对体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞细胞骨架的影响
        2.6 免疫荧光方法检测高氟对神经细胞微管相关蛋白MAP2的影响
    3 结果与分析
        3.1 光学显微镜观察氟致神经细胞细胞形态变化
        3.2 扫描电镜观察氟致神经细胞细胞形态变化
        3.3 透射电镜观察氟致神经细胞细胞形态变化
        3.4 高氟对体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞细胞活性的影响
        3.5 高氟对SD大鼠大脑皮质神经细胞细胞骨架的影响
        3.6 高氟对神经细胞内微管相关蛋白MAP2表达的影响
    4 讨论
        4.1 氟中毒对中枢神经系统的毒性影响
        4.2 高氟对体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞的形态损伤
        4.3 MTT比色法测定高氟对神经细胞活性的影响
        4.4 高氟对体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞细胞骨架及细胞内MAP2表达的影响
    5 小结
全文结论
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性氟中毒对中枢神经系统的影响 [J]. 续岭,谢明祥.  中国实用神经疾病杂志. 2013(04)
[2]新生大鼠大脑皮质神经元的原代培养及其鉴定 [J]. 宋海岩,王志勇,李娜娜.  实用儿科临床杂志. 2012(02)
[3]高氟低碘对Wistar大鼠大脑组织病理学及DNA损伤的影响 [J]. 洪建华,牛瑞燕,葛亚明,王俊东.  中国实验动物学报. 2009(01)
[4]高氟对新生儿行为神经发育的影响 [J]. 李晶 ,姚笠 ,邵庆亮 ,吴春燕.  中国地方病学杂志. 2004(05)
[5]慢性氟中毒患者认知功能缺损的初步研究 [J]. 邵千里,王亚南,李良文,李健.  中国地方病学杂志. 2003(04)
[6]大鼠海马中氟浓度与胆碱酯酶活力的关系 [J]. 翟金霞,郭智勇,胡传来,王取南,朱启星.  中华劳动卫生职业病杂志. 2003(02)
[7]氟对大鼠脑细胞DNA的损伤及诱导凋亡的作用 [J]. 陈军,陈学敏,杨克敌,夏涛,谢虹.  中华预防医学杂志. 2002(04)
[8]大鼠慢性氟中毒神经细胞病理改变的研究 [J]. 吕晓红,李广生,吕晓丽.  中国地方病学杂志. 2001(06)
[9]饮高氟水小鼠脑海马回组织超微结构观察 [J]. 孙增荣,刘风贞,杨海贤,白景文,于德奎,吕严,吴丽娜.  中国地方病学杂志. 2000(05)
[10]高氟区4～7岁儿童智商调查研究 [J]. 王国建,杨德龙,贾风格,王惠琴.  地方病通报. 1996(01)



本文编号：3529866