奶山羊FADS2基因功能及转录调控机理初步研究
发布时间：2021-12-11 03:51
山羊奶丰富的脂肪酸成分赋予其独特的营养价值,其中多不饱和脂肪酸具有预防心血管疾病和提高机体免疫力等功能,对人体具有重要的生理意义。脂肪酸去饱和酶2（Fatty acid desaturation 2）作为多不饱和脂肪酸如花生四烯酸（AA）和二十二碳六烯酸（DHA）等合成过程中的限速酶,可以在脂肪酸链的第6、7位将其底物脱氢形成双键。因此,研究FADS2基因功能及转录调控机理对于羊奶多不饱和酸脂肪酸代谢具有重要的理论意义和实践指导意义。本研究以奶山羊（Capra hircus）原代乳腺上皮细胞为材料,利用PCR技术克隆得到奶山羊FADS2基因序列,并进行生物信息学分析;利用腺病毒介导的过表达技术和si-RNA介导的干扰技术研究奶山羊FADS2基因对山羊乳腺脂肪酸代谢的影响;克隆FADS2基因的5’侧翼序列,并进行生物信息学分析;通过缺失突变方法确定FADS2启动子的活性区域,同时突变活性区域的重要元件初步探究FADS2基因的转录调控机理。本研究主要结果如下:1.成功克隆得到FADS2基因（登录号为MK292654）的CDS区1 335 bp,编码444个氨基酸,与绵羊（Ovis arie...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PUFAs合成途径(GuillouHetal.2010)
PUFAs 对于人类身体健康具有重要的生理作用，并且山羊奶中含有丰富的多不饱和脂肪酸，因此，研究山羊乳 PUFAs 的合成代谢具有重要的意义。图1-2 ω-6 和ω-3多不饱和脂肪酸脂质介质产物的代谢途径(Wang DDubois R N 2010)Figure1-2 Metabolic pathways of lipid products of 3 ω-6 and ω-3 PUFAs1.2.1 ω-3 PUFAs 的功能ω-3 PUFAs 包括 α 亚麻酸[ALA(18:3 9,12,15)]、十八碳四烯酸[SDA (18:4 6,9,12,15)]、二十碳五烯酸[EPA(20:5 5,8,11,14,17)]及二十二碳六烯酸[DHA(22:6 4,7,10,13,16,19)]等，其中DHA 是 ω-3 PUFAs 最主要的组成成分，对于多种代谢疾病具有重要的调控作用。心血管疾病（CVD）是全世界发病率和死亡率最高的慢性非传染性疾病，ω-3PUFAs 对 CVD 的积极影响被认为是由多种机制介导的，包括改变细胞膜的理化性质、跨膜通道和蛋白质的直接相互作用(Turk H FChapkin R S 2013)，也可以通过核受体和转录因子调节基因表达、改变二十类烷酸组成以及将ω-3 PUFA 转化为具有生物活性的代谢物等，进而预防心律失常、血小板凝聚、动脉炎症反应；降低血液中甘油三酯水平，降低血压和改善血管松弛等(Serini S et al. 2017)。ω-3 PUFAs
由于前列腺素 D2、E2 和 I2 存在于睾丸和附睾中，AA 与雄性生殖具有密切(Sorrentino C et al. 1998)。Safarinejad 等人发现不育男性血清和精子中 AA/DH显高于正常男性(Safarinejad M R et al. 2010)，但是 AA 在精子获能和顶体反应要的作用，其中富含 AA 的番茄红素可以改善不育男性精浆中 AA/DHA 比例功妊娠的可能性(Radka F et al. 2015)。同时 AA 以磷脂形式构成神经细胞膜的，表明 AA 对大脑发育是不可缺少的，在细胞分裂和信号传导中起着重要的tsuki HOkuda S 1995)。因此，保持体内一定水平的 AA，对于生殖健康和大脑重要的作用，但是当机体中富集大量 AA 时会导致机体肥胖和诱发炎症。 脂肪酸去饱和酶的研究进展脂肪酸去饱和酶家族（Fatty acid desaturation family）可以在长链脂肪酸酰基定位置引入双键，从而影响脂肪酸本身的生物学特性和产生新的物质。FADSFADS1、FADS2和FADS3基因，这三个亚型位于人类11号染色体的同一区域，度同源性(Marquardt A et al. 2000)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响[J]. 王苗,罗军,许会芬,朱江江,赫秋亚,姚大为,史怀平. 畜牧兽医学报. 2016(09)
[2]奶山羊ELOVL6基因启动子的克隆及活性区域分析[J]. 赫秋亚,罗军,姚大为,赵博,王苗,许会芬,王会,史怀平. 农业生物技术学报. 2016(06)
[3]深黄被孢霉M6-22 Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达[J]. 刘莉,李明春,胡国武,张丽,邢来君. 微生物学报. 2001(04)
博士论文
[1]SREBP-1基因对山羊乳腺上皮细胞脂肪酸代谢的调控作用研究[D]. 许会芬.西北农林科技大学 2016
硕士论文
[1]过表达与干扰LXRβ基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂质代谢的影响[D]. 张倡珲.西北农林科技大学 2017
[2]奶山羊脂肪酸合酶基因乙酰/丙二酸单酰转移酶区域的过表达研究[D]. 朱江江.西北农林科技大学 2011
本文编号：3533961
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PUFAs合成途径(GuillouHetal.2010)
PUFAs 对于人类身体健康具有重要的生理作用，并且山羊奶中含有丰富的多不饱和脂肪酸，因此，研究山羊乳 PUFAs 的合成代谢具有重要的意义。图1-2 ω-6 和ω-3多不饱和脂肪酸脂质介质产物的代谢途径(Wang DDubois R N 2010)Figure1-2 Metabolic pathways of lipid products of 3 ω-6 and ω-3 PUFAs1.2.1 ω-3 PUFAs 的功能ω-3 PUFAs 包括 α 亚麻酸[ALA(18:3 9,12,15)]、十八碳四烯酸[SDA (18:4 6,9,12,15)]、二十碳五烯酸[EPA(20:5 5,8,11,14,17)]及二十二碳六烯酸[DHA(22:6 4,7,10,13,16,19)]等，其中DHA 是 ω-3 PUFAs 最主要的组成成分，对于多种代谢疾病具有重要的调控作用。心血管疾病（CVD）是全世界发病率和死亡率最高的慢性非传染性疾病，ω-3PUFAs 对 CVD 的积极影响被认为是由多种机制介导的，包括改变细胞膜的理化性质、跨膜通道和蛋白质的直接相互作用(Turk H FChapkin R S 2013)，也可以通过核受体和转录因子调节基因表达、改变二十类烷酸组成以及将ω-3 PUFA 转化为具有生物活性的代谢物等，进而预防心律失常、血小板凝聚、动脉炎症反应；降低血液中甘油三酯水平，降低血压和改善血管松弛等(Serini S et al. 2017)。ω-3 PUFAs
由于前列腺素 D2、E2 和 I2 存在于睾丸和附睾中，AA 与雄性生殖具有密切(Sorrentino C et al. 1998)。Safarinejad 等人发现不育男性血清和精子中 AA/DH显高于正常男性(Safarinejad M R et al. 2010)，但是 AA 在精子获能和顶体反应要的作用，其中富含 AA 的番茄红素可以改善不育男性精浆中 AA/DHA 比例功妊娠的可能性(Radka F et al. 2015)。同时 AA 以磷脂形式构成神经细胞膜的，表明 AA 对大脑发育是不可缺少的，在细胞分裂和信号传导中起着重要的tsuki HOkuda S 1995)。因此，保持体内一定水平的 AA，对于生殖健康和大脑重要的作用，但是当机体中富集大量 AA 时会导致机体肥胖和诱发炎症。 脂肪酸去饱和酶的研究进展脂肪酸去饱和酶家族（Fatty acid desaturation family）可以在长链脂肪酸酰基定位置引入双键，从而影响脂肪酸本身的生物学特性和产生新的物质。FADSFADS1、FADS2和FADS3基因，这三个亚型位于人类11号染色体的同一区域，度同源性(Marquardt A et al. 2000)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响[J]. 王苗,罗军,许会芬,朱江江,赫秋亚,姚大为,史怀平. 畜牧兽医学报. 2016(09)
[2]奶山羊ELOVL6基因启动子的克隆及活性区域分析[J]. 赫秋亚,罗军,姚大为,赵博,王苗,许会芬,王会,史怀平. 农业生物技术学报. 2016(06)
[3]深黄被孢霉M6-22 Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达[J]. 刘莉,李明春,胡国武,张丽,邢来君. 微生物学报. 2001(04)
博士论文
[1]SREBP-1基因对山羊乳腺上皮细胞脂肪酸代谢的调控作用研究[D]. 许会芬.西北农林科技大学 2016
硕士论文
[1]过表达与干扰LXRβ基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂质代谢的影响[D]. 张倡珲.西北农林科技大学 2017
[2]奶山羊脂肪酸合酶基因乙酰/丙二酸单酰转移酶区域的过表达研究[D]. 朱江江.西北农林科技大学 2011
本文编号：3533961
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