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Tet3对牛早期体外受精胚胎发育的影响

发布时间:2021-12-19 11:53
  从受精卵开始到胚胎发育形成囊胚,没有与母体建立联系的过程,称为植入前胚胎发育。胚胎未形成时,基因就已经开始表达,且受到多种网络的调控,例如发生组蛋白修饰、DNA甲基化、泛素化、磷酸化等各种相关的表观修饰作用。基因在转录后期,翻译过程中也会受到不同的网络调控,如MicroRNA作用和细胞自噬等。DNA甲基化是调控细胞分化、重编程和发病机制的核心表观遗传事件。DNA去甲基化,发生在植入前胚胎和原始生殖细胞中。最近的研究表明,Tet3调节的5甲基胞嘧啶(5mC)氧化是导致基因组DNA甲基化广泛缺失的主要原因,但这一过程在牛植入前胚胎中的机制尚不清楚。因此,本实验选取牛为研究对象,利用分离DNA的亚硫酸盐处理试验、荧光定量PCR、免疫荧光染色及小RNA干扰(RNAi)等技术探索Tet3基因在牛早期植入前胚胎中的表达情况及其对早期植入前胚胎发育的影响,为Tet3基因在牛这一物种中的功能研究提供基础,同时也为此基因在其他物种中的研究提供方向。本实验主要结果如下:1、利用荧光定量qPCR的方法检测Tet家族基因在牛MII卵母细胞和体外受精(IVF)2细胞、4细胞、8细胞及囊胚各阶段的表达情况。结果显... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:84 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Tet3对牛早期体外受精胚胎发育的影响


Tet基因家族凝胶电泳

基因家族,牛卵母细胞,体外受精,囊胚期


M.DL2000Marker;1.Tet1;2.Tet2;3.Tet3。图 1.1 Tet 基因家族凝胶电泳Fig.1.1 Gel electrophoresis Tet gene family 家族在牛早期胚胎中的动态变化采用荧光定量 PCR 技术对牛卵母细胞、体外受精 2 细胞、4胚阶段胚胎的 Tet 基因家族进行检测。结果显示,Tet3 在牛卵前胚胎中的表达量明显高于 Tet1 和 Tet2(图 1.2)。在整个牛中 Tet3 表达水平逐渐升高,直到 8 细胞阶段,然后在囊胚期)。

荧光染色,蓝色,红色,细胞核


注:红色为 TET3 蛋白荧光染色,蓝色为细胞核 DAPI 染图 1.4 牛早期胚胎中 TET3 的表达Fig 1.4 Expression of TET3 in early bovine embryosThe DNA(blue) was stained with DAPI

【参考文献】:
期刊论文
[1]猪诱导性多能干细胞技术的研究进展及应用前景[J]. 闫益波,张艳丽,齐巍巍,万永杰,樊懿萱,王锋.  遗传. 2011(04)



本文编号:3544370

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