多房棘球蚴主要卵抗原p40-1的原核表达、多克隆抗体制备及其组织定位

发布时间：2021-12-27 20:46

　　初步确定MEAp40-1的基因特征及其组织分布特征。根据WormBase数据库中多房棘球蚴MEAp40-1序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术扩增MEAp40-1编码基因并构建重组表达质粒pET-28a-MEAp40-1,IPTG诱导表达并用His-Ni亲和层析柱纯化,制备多克隆抗体。通过间接ELISA方法检测多克隆抗体效价,应用免疫荧光技术定位MEAp40-1在原头蚴中的分布。通过生物信息学分析发现,多房棘球绦虫表达3种不同的MEAp40（MEAp40-1～3）,分别分布在不同染色体上。系统进化树显示,每个多房棘球绦虫MEAp40基因与其相应的细粒棘球绦虫的同源基因组成一支。多房棘球绦虫MEAp40-1编码基因全长945 bp,编码314个氨基酸。7种绦虫的MEAp40-1蛋白很保守,均存在α晶体结构域,并且位于该结构域中的协同分子伴侣结合位点也非常保守。MEAp40-1重组蛋白大小约为37 ku,其多克隆抗体效价可达1∶409 600,可识别虫体中的MEAp40-1天然蛋白。MEAp40-1蛋白主要分布在多房棘球蚴后端,而头节、囊壁等其他部位均未见表达。结合以上研究结果,推测M... 

【文章来源】：中国兽医科学. 2020,50(08)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

棘球绦虫MEAp40编码基因及其进化分析

Western-blot分析

重组蛋白MEAp40-1的诱导表达与纯化

【参考文献】：
期刊论文
[1]日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位[J]. 夏丹,邓淦明,滕萍英,谢郁,李耀民,王春梅,陈淑洁,陈敏芳,麦荣嘉,廖海燕,石玲玉,欧丽妍,陈启伟,陈晓光,周晓红.  南方医科大学学报. 2015(06)
[2]肝泡球蚴病的分型与外科治疗[J]. 辛维藩,吴新民,郭亚民,郑大为,秦长春,卢岩松,白延霖,徐正光,赵顺云.  中华普通外科杂志. 2000(01)
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硕士论文
[1]多房棘球蚴20.9kD囊壁蛋白基因的原核表达、组织定位及ELISA检测方法的建立[D]. 苏梦.甘肃农业大学 2017



本文编号：3552702