ECM2基因对牛肌肉卫星细胞分化的影响

发布时间：2021-12-27 23:11

　　肌肉的成长发育受到遗传和环境等因素作用。细胞外基质不仅仅为细胞提供着支撑的作用,而且对于细胞的迁移、增殖和分化等生理过程也有着重要的调控作用。近来研究发现,细胞外基质(the extracellular matrix,ECM)中的富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(the secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)家族能够调控肌肉的分化,并且SPARC在组织发育以及细胞增殖分化过程中都有着很强的表达。ECM2(the extracelluar matrix 2)是SPARC家族的一员。我们实验室前期通过高通量测序,发现ECM2在分化第三天牛肌肉卫星细胞(muscle-derived satellite cells,MDSCs)中的表达量显著高于其在分化第一天MDSCs中的表达量。因此,本实验以从新生胎牛中分离出来的牛MDSCs为实验材料,探究ECM2基因对牛MDSCs分化的影响。本实验研究了ECM2基因在牛MDSCs分化过程中的表达情况,利用CRISPR-dCase9系统激活和抑制ECM2基因后,探究其对牛MDSCs分化的影响;探究E...

【文章来源】： 东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：52 页

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 肌肉卫星细胞简介
        1.1.2 分化标志基因MYH3和MYOG
        1.1.3 结蛋白的研究进展
        1.1.4 细胞外基质的简介
        1.1.5 SPARC家族简介及研究进展
        1.1.6 ECM2的概况及研究进展
        1.1.7 PI3K信号通路概述
        1.1.8 CRISPR-dCase9系统概述
    1.2 研究的目的及意义
2 材料与方法
    2.1 主要实验材料
        2.1.1 细胞株、菌株和质粒
        2.1.2 实验器材
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 主要试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 牛MDSCs的分离与培养
        2.2.2 WesternBlot检测牛MDSCs分化不同天数细胞中以及培养液中ECM2的含量
        2.2.3 免疫荧光检测牛MDSCs分化不同时期ECM2表达
        2.2.4 激活ECM2基因对牛MDSCs分化的影响
        2.2.5 抑制ECM2基因对牛MDSCs分化的影响
        2.2.6 ECM2通过PI3K信号通路对牛MDSCs分化的影响
        2.2.7 数据分析
3 结果与分析
    3.1 ECM2在牛MDSCs分化过程中的表达规律
    3.2 ECM2对牛MDSCs分化的影响
        3.2.1 激活ECM2基因对牛MDSCs分化的影响
        3.2.2 抑制ECM2基因对牛MDSCs分化的影响
    3.3 ECM2基因通过PI3K信号通路对牛MDSCs的分化产生影响
        3.3.1 激活和抑制ECM2基因对PI3K和Akt蛋白以及它们的磷酸化水平的影响
        3.3.2 抑制PI3K信号通路对牛MDSCs分化的影响
4 讨论
    4.1 ECM2在牛MDSCs分化过程中的表达情况
    4.2 ECM2基因对牛MDSCs分化的影响
    4.3 ECM2基因通过PI3K信号通路对牛MDSCs的分化产生影响
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3552922