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慢病毒介导RNAi技术培育抗新城疫病毒嵌合体鹅胚的研究

发布时间:2021-12-28 00:51
  自1997年以来,在我国多数地区的鹅群中相继爆发和流行鹅副黏病毒病,经鉴定病原为血清Ⅰ型副黏病毒,即新城疫病毒,该病定名为鹅副黏病毒病,又可称为鹅新城疫。各种年龄的鹅对该病均易感,鹅群发病率平均为27.67%,死亡率个别可高达100%,平均死亡率为18.19%,且年龄越小其发病率和死亡率越高,给我国的养鹅业造成严重的经济损失。目前,鹅副黏病毒病防治主要以疫苗免疫为主,尽管目前有多种强毒疫苗和灭活疫苗用于免疫预防,但是仍然不能控制鹅副黏病毒病的发生。目前研究结果均表明,利用新城疫病毒强毒苗或灭活苗甚至是传统的LaSota弱毒疫苗来免疫预防鹅副黏病毒病均不能起到完全的免疫保护作用。因此,对于鹅副黏病毒病我们须寻求一种新的预防思路和技术手段。随着分子生物学及其技术方法的不断发展,基因阻断技术也得到了极大的发展,在哺乳动物或其他动物细胞中通过siRNA诱导RNAi效应来实现特定基因的有效抑制,该方法已经成为研究基因功能的重要工具。慢病毒载体介导的基因转导是近年来发展起来的技术,其突出的特点是具有较高的转染效率、能感染静止期细胞和较高的目的基因表达效率。本研究利用具有基因组整合特性和高侵染能力的... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:119 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

慢病毒介导RNAi技术培育抗新城疫病毒嵌合体鹅胚的研究


鹅源新城疫病毒NA-1株NP(A)、M(B)基因二级结构

慢病毒介导RNAi技术培育抗新城疫病毒嵌合体鹅胚的研究


重组慢病毒载体测序结果

慢病毒,阳性克隆,质粒,PCR鉴定


6rol628103768图 1.4: 重组慢病毒载体测序结果图 1.3: 慢病毒重组干扰质粒阳性克隆 PCR 鉴定结果CR identification of pLKD-shNP or pLKD-shM recombinaker DL2000;0:pLKD-GFP; 1: pLKD-shNP268; 2: pLKD-shNP710; 4:pLKD-shM168; 5: pLKD-shM646; 6: pLKD-shcontrol (the negative control).

【参考文献】:
期刊论文
[1]Sleeping Beauty(SB)转座子介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)体内转染鸡胚胎[J]. 薛松磊,张立,谢雨琇,李庆平,冯晓军,沈丹,宋成义,高波.  农业生物技术学报. 2013(02)
[2]制作石蜡切片验证鸡胚盘显微注射外源DNA的效果[J]. 蒋斌,孙研研,连玲,郑江霞,杨宁.  中国家禽. 2013(01)
[3]新城疫病毒纯化方法的比较研究[J]. 余祖华,丁轲,朱巧艳.  河南农业科学. 2010(09)
[4]胚盘下腔注射法将外源质粒pEGFP-N1导入鸡胚的研究[J]. 孙研研,蒋斌,郑江霞,徐桂云,曲鲁江,杨宁.  农业生物技术学报. 2010(04)
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[6]慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达[J]. 徐世永,丁红梅,孙岩,王蒙,蔡亚飞,刘红林.  南京农业大学学报. 2008(03)
[7]短发夹结构RNA对口蹄疫病毒2B基因瞬时表达的抑制[J]. 崔丽瑾,王兴龙,任林柱,伍晓慧,郎需龙,张辉,梅英武,李晓燕,卜朝阳.  中国兽医学报. 2008(05)
[8]针对leader序列的siRNA能够有效抑制SARS冠状病毒多个mRNA的表达(英文)[J]. 叶健,刘利新,薛远,曲静,高光侠,方荣祥.  生物化学与生物物理进展. 2007(10)



本文编号:3553077

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