猪PGM1和猪UGP2基因的克
发布时间：2022-01-02 13:39
本研究所选定的两个候选基因猪磷酸葡萄糖变位酶1（Phosphoglucomutase 1, PGM1）和猪尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2（UDP-glucose pyrophosphorylase 2, UGP2）基因的功能是第一次在猪上进行鉴定和检验。猪PGM1基因和猪UGP2基因的具体功能和表达分布在猪上都还没有相关的研究报道。通过不同发育时期猪骨骼肌芯片的聚类分析,筛选获得大量影响胴体和肉质性状的基因,其中包括猪PGM1基因和猪UGP2基因等。同时,猪PGM1基因在蛋白表达筛选中具有表现出显著差异,并且猪UGP2基因所编码蛋白是参与糖代谢的一个的酶,猪PGMl基因和猪UGP2基因的功能研究,到目前为止还没有详细的报道。本文从发掘新的候选基因出发,以期寻找到影响肉质品质的关键基因,改善肉质品质。本研究从大白猪和梅山猪中提取的核酸样品,利用实时定量RT-PCR技术分析了猪PGMl基因和猪UGP2基因在猪肌肉组织中的表达分布,以及骨骼肌不同发育阶段的分布规律,分离鉴定了两个基因启动子核心区域,初步掌握了其与肌肉形成发育之问的关系,其结果如下：1.利用生物信息学方法,获得猪PGM1基因mR...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１猪尸Ｇ＇Ｍ／基因的开放阅读框预湖??．?－?ｅｎ?ｒｅａｉｎｆｒａｍｅ?ｏｆｏｒｃｎ????
该基因所编码蛋白在体外哺乳动物网状细胞的半衰期为３０ｈ，不稳定系数为??３４．２７，表明该蛋白为典型的稳定性蛋白，定位在胞质膜上，不存在信号狀位点，为??亲水性蛋白，如图２－２所示。??Ｐｒ－ｏ＾Ｓｅ＊?１?？?ｅｕ＇ｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕ？＊ｒ－?？？ｑｕ＊ｎｏ＊??１?■?丫－?Ｈｐｈｏｂ．?／?％?Ｐｏｏｌｔｔｔｆ＊?—??！，?，??百－?－?－?－?－?ｊ??－?－．?－?－—?Ｉ?Ｉ?－?ｊ?■??＊．］ＩＷ曜?ｔ??Ｉ??－，?＾＾?＾??Ｐｏｉｉ？１?ｏｎ??图２－２?Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ疏水性图Ｘ轴表示気基酸的位置，Ｙ轴表示疏水性值??猪ＰＧＭ１蛋白的疏水性图??Ｆｉｇ．?２－２?Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ?ｐｒｏｆｉｌｅ．?Ｘ?ａｘｉｓ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｌｏｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ，?Ｙ?ａｘｉｓ??ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｖａｌｕｅ?ｏｆ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ．??Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ＰＧＭｌ?ｐｒｏｔｅｉｎ，??Ｇ州Ｂａｎｋ数拋库中己有的ＰＧＭ／基因ｍＲＮＡ序列：人（Ｈｏｍｏ?ｓａｐｉｅｎｓ，??ＮＭ＿００１１７２８１８．１）
马及大脑皮层，共１２个组织的总ＲＮＡ。??利用提取Ｔｒｉｚｏｌ?Ｒｅａｇｅｎｔ试剂盒提取组织的总ＲＮＡ，凝胶电泳检測总ＲＮＡ的完??整性的结果如图２￣４所示，从电泳图可Ｗ看出，总ＲＮＡ的完整性达到后续的试验要??求。同时，用分光光度计测定所提取总ＲＮＡ的分光光度值，检测提取ＲＮＡ的纯度，??后续的试验要求所提取民ＮＡ的分光光度值须在１．８？２．０么间。不满足要求样品均重??新提取，直到满足要求，所提取的总ＲＮＡ的纯度均符合后续试验耍求。??Ｗｙｆｆ－ｃｉｃ／ｍ为内参基因检测反转录合成ｃＤＮＡ第一条链质量，扩増后得到产物约??为１５８?ｂｐ。检测结果如图２－５所示。各个样品均保持较高纯度，满足试验要求。??Ｍ??１８Ｓ??图２－４总ＲＮＡ的凝胶电泳检测结果??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００．??Ｆｉｇ．?２－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００．??！．??ｒ??ｈ??ｉ??ｉ??ｒ??ｔ??ｒ??；ｉ‘??３６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪育种的遗传学研究进展[J]. 张劳,Roget Abbott. 国外畜牧学(猪与禽). 2012(12)
[2]山羊脂肪酸合酶基因（FASN）启动子结构与功能的初步分析[J]. 李君,葛婷,罗军,孙雨婷,石恒波,朱江江,郝娟,赵旺生. 畜牧兽医学报. 2012(02)
[3]转基因育种技术发展研究综述[J]. 杜世章. 绵阳师范学院学报. 2011(08)
[4]高锌饲粮对猪的营养作用研究进展[J]. 王春梅. 饲料博览. 2010(11)
[5]现代生物育种的前沿与未来[J]. 李宁. 中国家禽. 2010(18)
[6]转基因技术在猪的分子育种中的应用[J]. 王睿琪,陈斌. 畜禽业. 2010(03)
[7]优质高产瘦肉猪专门化品系的选育[J]. 程郁昕. 安徽农学通报. 2008(20)
[8]Green fluorescent protein （GFP） transgenic pig produced by somatic cell nuclear transfer[J]. R S PRATHER4. Chinese Science Bulletin. 2008(07)
[9]猪肉品质研究三十年回眸[J]. 陈润生,张伟力,经荣斌. 猪业科学. 2007(07)
[10]抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 王婉,高媛,杨金菊,柳晓兰,鞠艳芳,刘莉,陈志成,刘蓉,迟俊,邢维贤,高建恩,安立国,孙启鸿. 中国实验血液学杂志. 2007(03)
博士论文
[1]猪数量性状经济重要性的研究[D]. 吴克亮.中国农业大学 2004
本文编号：3564275
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１猪尸Ｇ＇Ｍ／基因的开放阅读框预湖??．?－?ｅｎ?ｒｅａｉｎｆｒａｍｅ?ｏｆｏｒｃｎ????
该基因所编码蛋白在体外哺乳动物网状细胞的半衰期为３０ｈ，不稳定系数为??３４．２７，表明该蛋白为典型的稳定性蛋白，定位在胞质膜上，不存在信号狀位点，为??亲水性蛋白，如图２－２所示。??Ｐｒ－ｏ＾Ｓｅ＊?１?？?ｅｕ＇ｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕ？＊ｒ－?？？ｑｕ＊ｎｏ＊??１?■?丫－?Ｈｐｈｏｂ．?／?％?Ｐｏｏｌｔｔｔｆ＊?—??！，?，??百－?－?－?－?－?ｊ??－?－．?－?－—?Ｉ?Ｉ?－?ｊ?■??＊．］ＩＷ曜?ｔ??Ｉ??－，?＾＾?＾??Ｐｏｉｉ？１?ｏｎ??图２－２?Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ疏水性图Ｘ轴表示気基酸的位置，Ｙ轴表示疏水性值??猪ＰＧＭ１蛋白的疏水性图??Ｆｉｇ．?２－２?Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ?ｐｒｏｆｉｌｅ．?Ｘ?ａｘｉｓ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｌｏｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ，?Ｙ?ａｘｉｓ??ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｖａｌｕｅ?ｏｆ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ．??Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ＰＧＭｌ?ｐｒｏｔｅｉｎ，??Ｇ州Ｂａｎｋ数拋库中己有的ＰＧＭ／基因ｍＲＮＡ序列：人（Ｈｏｍｏ?ｓａｐｉｅｎｓ，??ＮＭ＿００１１７２８１８．１）
马及大脑皮层，共１２个组织的总ＲＮＡ。??利用提取Ｔｒｉｚｏｌ?Ｒｅａｇｅｎｔ试剂盒提取组织的总ＲＮＡ，凝胶电泳检測总ＲＮＡ的完??整性的结果如图２￣４所示，从电泳图可Ｗ看出，总ＲＮＡ的完整性达到后续的试验要??求。同时，用分光光度计测定所提取总ＲＮＡ的分光光度值，检测提取ＲＮＡ的纯度，??后续的试验要求所提取民ＮＡ的分光光度值须在１．８？２．０么间。不满足要求样品均重??新提取，直到满足要求，所提取的总ＲＮＡ的纯度均符合后续试验耍求。??Ｗｙｆｆ－ｃｉｃ／ｍ为内参基因检测反转录合成ｃＤＮＡ第一条链质量，扩増后得到产物约??为１５８?ｂｐ。检测结果如图２－５所示。各个样品均保持较高纯度，满足试验要求。??Ｍ??１８Ｓ??图２－４总ＲＮＡ的凝胶电泳检测结果??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００．??Ｆｉｇ．?２－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００．??！．??ｒ??ｈ??ｉ??ｉ??ｒ??ｔ??ｒ??；ｉ‘??３６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪育种的遗传学研究进展[J]. 张劳,Roget Abbott. 国外畜牧学(猪与禽). 2012(12)
[2]山羊脂肪酸合酶基因（FASN）启动子结构与功能的初步分析[J]. 李君,葛婷,罗军,孙雨婷,石恒波,朱江江,郝娟,赵旺生. 畜牧兽医学报. 2012(02)
[3]转基因育种技术发展研究综述[J]. 杜世章. 绵阳师范学院学报. 2011(08)
[4]高锌饲粮对猪的营养作用研究进展[J]. 王春梅. 饲料博览. 2010(11)
[5]现代生物育种的前沿与未来[J]. 李宁. 中国家禽. 2010(18)
[6]转基因技术在猪的分子育种中的应用[J]. 王睿琪,陈斌. 畜禽业. 2010(03)
[7]优质高产瘦肉猪专门化品系的选育[J]. 程郁昕. 安徽农学通报. 2008(20)
[8]Green fluorescent protein （GFP） transgenic pig produced by somatic cell nuclear transfer[J]. R S PRATHER4. Chinese Science Bulletin. 2008(07)
[9]猪肉品质研究三十年回眸[J]. 陈润生,张伟力,经荣斌. 猪业科学. 2007(07)
[10]抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 王婉,高媛,杨金菊,柳晓兰,鞠艳芳,刘莉,陈志成,刘蓉,迟俊,邢维贤,高建恩,安立国,孙启鸿. 中国实验血液学杂志. 2007(03)
博士论文
[1]猪数量性状经济重要性的研究[D]. 吴克亮.中国农业大学 2004
本文编号：3564275
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