牛分枝杆菌MPB70-MPB64抗原在牛结核ELISA诊断中的应用

发布时间：2022-01-07 06:09

　　牛结核病是由牛分枝杆菌所引起的疾病，是一种慢性消耗性的人、畜、禽共患的严重传染病。在牛结核病发现早期，由于缺乏预防疫苗和特异性诊断试剂，使得该病的全球性蔓延逐步升级。严重危害人类、家畜和野生动物的健康，造成极大的经济损失。正因如此，开发安全、高效疫苗及敏感性、特异性良好的诊断抗原已成为当下的研究热点。MPB70和MPB64属于MPB系列蛋白，是存在于结核分枝杆菌培养滤液中的分泌性蛋白。二者均可以诱导较强的记忆性T细胞免疫反应。CD4+T细胞和CD8+T细胞受到刺激并激活产生高水平IFN-γ。因此MPB70和MPB64是研制新型疫苗和诊断试剂的理想抗原。为增加单一抗原的抗原性，本研究将MPB70和MPB64抗原的DNA片段通过SOE-PCR原理进行融合，并将该融合基因mpb70-64克隆到pMD18-T载体上，以构建重组质粒pMD-mpb70-64。将该重组质粒与表达载体pET28a（+），分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化，将纯化后融合基因mpb70-64亚克隆到表达载体pET28a（+），构建原核表达质粒pET-mpb70-64。并将带有pET-mpb70-64重组表达质粒导入... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    1.1 结核病的现状
    1.2 牛结核病病原史
    1.3 流行病学
    1.4 诊断技术的发展
    1.5 牛分枝杆菌的保护性抗原
    1.6 本研究的目的和意义
第二篇 研究内容
    第一章 牛分枝杆菌 MPB70-MPB64 融合蛋白的表达及纯化
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 MPB70-MPB64 在牛结核病 ELISA 检测中的初步应用
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果分析
        2.4 讨论
        2.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3573974