“黄仁汤”治疗胸膜肺炎放线杆菌感染的有效成分确证与质检方法的建立
发布时间：2022-02-04 18:51
猪传染性胸膜肺炎（Porcine infectious pleuropneumonia,PCP）是由胸膜肺炎放线杆菌（APP）引起的细菌性呼吸道传染病,各年龄段猪只都易感且病死率高,给世界范围内养猪业造成了经济损失。目前APP血清型高达18种,各个国家和地区的优势流行株存在差异,加之各血清型之间交叉保护性不强,给疾病的预防和治疗带来了困难。目前临床使用的商业化疫苗还停留在灭活全菌苗,而且近年来,菌株耐药基因的出现以及新抗生素药物研发缓慢,给动物的健康带来巨大威胁,急需通过开发新的治疗手段来解决目前的问题。中药复方“黄仁汤”是临床兽医从传统方加减而来,对呼吸道感染有比较好的治疗效果,但是其主要有效成分并不清楚。为了提高该复方的质量控制水平,本课题通过在APP小鼠感染模型上观察各处理组小鼠的临床症状及体重变化,肺组织病理学变化以及检测肺脏菌载量差异,分析免疫细胞变化及检测相关趋化因子表达差异,确定“黄仁汤”主要调控的免疫学指标。以此为参考,对“黄仁汤”主要成分进行动物试验,通过对临床症状、肺损伤程度、菌载量、循环免疫细胞以及存活率的分析,筛选其有效治疗成分并研究有效成分对于感染小鼠炎性细胞...
【文章来源】：吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
APP感染后各组小鼠肺脏眼观病理变化
第二篇研究内容第一章“黄仁汤”对APP感染小鼠的免疫调节18图1.1“黄仁汤”治疗APP感染小鼠的症状与体重变化*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(A)各组小鼠临床症状评分；(B)各组小鼠体重变化1.3.2“黄仁汤”对APP感染小鼠肺损伤程度的影响剖检后肉眼观察发现，感染组小鼠肺脏大面积肿胀，呈暗红色，且质地坚实；相比于感染组小鼠，“黄仁汤”治疗后各时间点肺脏仅有局灶性病变，轻微水肿，无明显充血，尤其在感染后24h，治疗组小鼠的肺脏从颜色、质地等方面判断，都接近于正常组小鼠肺脏（图1.2）。说明“黄仁汤”的治疗降低了小鼠肺损伤程度。图1.2APP感染后各组小鼠肺脏眼观病理变化1.3.3“黄仁汤”对感染小鼠肺脏菌载量的影响感染后6h、24h小鼠肺组织的菌载量检测结果发现，感染后6h两个组小鼠肺脏APP负荷量最高，随着时间逐渐降低。但是在相同时间点，感染组小鼠肺脏载菌量显著高于“黄仁汤”治疗组，以6h差异最明显（图1.3）。
第二篇研究内容第一章“黄仁汤”对APP感染小鼠的免疫调节19图1.3APP感染后小鼠肺脏菌载量*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0011.3.4“黄仁汤”对感染小鼠肺脏免疫细胞的调节中性粒细胞是参与宿主先天免疫的重要效应细胞，作为具有可塑性和多能性的细胞群体，表现出独特的表型和功能[61]。本试验中主要检测小鼠血液/肺脏中性粒细胞的两种表型：PMN-Ⅰ（Ly6G+CD49d+CD11b-；主要发挥清菌作用，产生IL-12/CCL3）、PMN-Ⅱ（Ly6G+CD49d-CD11b+；主要发挥抗炎作用，产生IL-10/CCL2）。结果显示，在感染后6h、12h，“黄仁汤”治疗组小鼠肺组织中性粒细胞（PMN-Ⅰ型）水平略微高于感染组；在感染后期，也就是24h，“黄仁汤”治疗组小鼠血液循环中以及肺组织中PMN-Ⅰ细胞显著多于感染组小鼠（图1.4（A）（B））。各组小鼠血液/肺组织中PMN-Ⅱ随着时间呈动态变化，感染组与治疗组均高于正常对照组。感染后6h治疗组血液样本中PMN-Ⅱ细胞水平明显高于正常组，但是与感染组间差异无统计学意义（图1.4（C）（D））。以上结果表明，APP感染后显著杀伤肺和血PMN-I，降低了抗感染能力，“黄仁汤”可能通过增加趋化，使肺和血液PMN-I维持较高水平，提高清除细菌的作用。而肺脏在感染12小时后，PMN-Ⅱ维持高水平，发挥一定抑炎作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药在抗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）引起的细胞因子风暴中的应用分析[J]. 何黎黎,龚普阳,封玥,邹微,王恩龙,顾健. 中草药. 2020(06)
[2]槲皮素药理学作用的研究进展[J]. 刘晟文,刘建英. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2020(01)
[3]中药复方制剂质量控制体系的研究进展[J]. 吕玥,汤湧,李立言,阎姝. 中国中西医结合外科杂志. 2020(01)
[4]黄芩汤治疗溃疡性结肠炎分子作用机制的网络药理学研究[J]. 李敏瑶,温晓雯,黄海阳,靳晓利,郑学宝. 中药新药与临床药理. 2020(02)
[5]中药质量标准研究的关键科学问题与相关前沿分析技术应用展望[J]. 潘丽,王峥涛,杨莉. 上海中医药杂志. 2020(01)
[6]猪传染性胸膜肺炎的危害、临床症状、实验室诊断与防控措施[J]. 张敏. 现代畜牧科技. 2020(01)
[7]小青龙汤在肺部感染治疗中的应用及症状改善情况探讨[J]. 钟曦,李群堂,何开萍,王思月,冯霞. 世界复合医学. 2019(12)
[8]栀子苷的药理作用研究新进展[J]. 袁源见,王小青,陈超,曾慧婷,何小群,蔡妙婷,虞金宝. 中兽医医药杂志. 2019(06)
[9]大黄酚介导TLR4/NF-κB通路对IgA肾病大鼠肾损伤和免疫反应的调控作用[J]. 白亚君,杜艳彬,袁心柱,袁宁,蒲江,张全军. 四川大学学报(医学版). 2019(06)
[10]中性粒细胞——炎症反应中的双刃剑[J]. 梁新月,张云云,闫建设. 自然杂志. 2019(05)
博士论文
[1]β-谷甾醇和毛蕊花糖苷对肺炎链球菌溶血素的抑制作用及机制[D]. 赵小然.吉林大学 2017
硕士论文
[1]肺炎链球菌感染小鼠中性粒细胞诱导IL-1β成熟与分泌的机制[D]. 张婷娟.西南大学 2019
[2]黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染后猪血管内皮细胞TLRs/NF-κB和NLRP3/caspase-1信号通路的影响[D]. 徐磊.武汉轻工大学 2017
[3]中药黄芩及其主要成分抗炎活性的研究[D]. 陈涛.吉林大学 2017
[4]栀子苷抗LPS诱导的乳腺炎性损伤的分子机制[D]. 宋晓静.吉林大学 2015
本文编号：3613753
【文章来源】：吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
APP感染后各组小鼠肺脏眼观病理变化
第二篇研究内容第一章“黄仁汤”对APP感染小鼠的免疫调节18图1.1“黄仁汤”治疗APP感染小鼠的症状与体重变化*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(A)各组小鼠临床症状评分；(B)各组小鼠体重变化1.3.2“黄仁汤”对APP感染小鼠肺损伤程度的影响剖检后肉眼观察发现，感染组小鼠肺脏大面积肿胀，呈暗红色，且质地坚实；相比于感染组小鼠，“黄仁汤”治疗后各时间点肺脏仅有局灶性病变，轻微水肿，无明显充血，尤其在感染后24h，治疗组小鼠的肺脏从颜色、质地等方面判断，都接近于正常组小鼠肺脏（图1.2）。说明“黄仁汤”的治疗降低了小鼠肺损伤程度。图1.2APP感染后各组小鼠肺脏眼观病理变化1.3.3“黄仁汤”对感染小鼠肺脏菌载量的影响感染后6h、24h小鼠肺组织的菌载量检测结果发现，感染后6h两个组小鼠肺脏APP负荷量最高，随着时间逐渐降低。但是在相同时间点，感染组小鼠肺脏载菌量显著高于“黄仁汤”治疗组，以6h差异最明显（图1.3）。
第二篇研究内容第一章“黄仁汤”对APP感染小鼠的免疫调节19图1.3APP感染后小鼠肺脏菌载量*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0011.3.4“黄仁汤”对感染小鼠肺脏免疫细胞的调节中性粒细胞是参与宿主先天免疫的重要效应细胞，作为具有可塑性和多能性的细胞群体，表现出独特的表型和功能[61]。本试验中主要检测小鼠血液/肺脏中性粒细胞的两种表型：PMN-Ⅰ（Ly6G+CD49d+CD11b-；主要发挥清菌作用，产生IL-12/CCL3）、PMN-Ⅱ（Ly6G+CD49d-CD11b+；主要发挥抗炎作用，产生IL-10/CCL2）。结果显示，在感染后6h、12h，“黄仁汤”治疗组小鼠肺组织中性粒细胞（PMN-Ⅰ型）水平略微高于感染组；在感染后期，也就是24h，“黄仁汤”治疗组小鼠血液循环中以及肺组织中PMN-Ⅰ细胞显著多于感染组小鼠（图1.4（A）（B））。各组小鼠血液/肺组织中PMN-Ⅱ随着时间呈动态变化，感染组与治疗组均高于正常对照组。感染后6h治疗组血液样本中PMN-Ⅱ细胞水平明显高于正常组，但是与感染组间差异无统计学意义（图1.4（C）（D））。以上结果表明，APP感染后显著杀伤肺和血PMN-I，降低了抗感染能力，“黄仁汤”可能通过增加趋化，使肺和血液PMN-I维持较高水平，提高清除细菌的作用。而肺脏在感染12小时后，PMN-Ⅱ维持高水平，发挥一定抑炎作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药在抗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）引起的细胞因子风暴中的应用分析[J]. 何黎黎,龚普阳,封玥,邹微,王恩龙,顾健. 中草药. 2020(06)
[2]槲皮素药理学作用的研究进展[J]. 刘晟文,刘建英. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2020(01)
[3]中药复方制剂质量控制体系的研究进展[J]. 吕玥,汤湧,李立言,阎姝. 中国中西医结合外科杂志. 2020(01)
[4]黄芩汤治疗溃疡性结肠炎分子作用机制的网络药理学研究[J]. 李敏瑶,温晓雯,黄海阳,靳晓利,郑学宝. 中药新药与临床药理. 2020(02)
[5]中药质量标准研究的关键科学问题与相关前沿分析技术应用展望[J]. 潘丽,王峥涛,杨莉. 上海中医药杂志. 2020(01)
[6]猪传染性胸膜肺炎的危害、临床症状、实验室诊断与防控措施[J]. 张敏. 现代畜牧科技. 2020(01)
[7]小青龙汤在肺部感染治疗中的应用及症状改善情况探讨[J]. 钟曦,李群堂,何开萍,王思月,冯霞. 世界复合医学. 2019(12)
[8]栀子苷的药理作用研究新进展[J]. 袁源见,王小青,陈超,曾慧婷,何小群,蔡妙婷,虞金宝. 中兽医医药杂志. 2019(06)
[9]大黄酚介导TLR4/NF-κB通路对IgA肾病大鼠肾损伤和免疫反应的调控作用[J]. 白亚君,杜艳彬,袁心柱,袁宁,蒲江,张全军. 四川大学学报(医学版). 2019(06)
[10]中性粒细胞——炎症反应中的双刃剑[J]. 梁新月,张云云,闫建设. 自然杂志. 2019(05)
博士论文
[1]β-谷甾醇和毛蕊花糖苷对肺炎链球菌溶血素的抑制作用及机制[D]. 赵小然.吉林大学 2017
硕士论文
[1]肺炎链球菌感染小鼠中性粒细胞诱导IL-1β成熟与分泌的机制[D]. 张婷娟.西南大学 2019
[2]黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染后猪血管内皮细胞TLRs/NF-κB和NLRP3/caspase-1信号通路的影响[D]. 徐磊.武汉轻工大学 2017
[3]中药黄芩及其主要成分抗炎活性的研究[D]. 陈涛.吉林大学 2017
[4]栀子苷抗LPS诱导的乳腺炎性损伤的分子机制[D]. 宋晓静.吉林大学 2015
本文编号：3613753
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