Plackett-Burman和Box-Behnken联合优化复合酶辅助超声波提取桑叶总黄酮工艺

发布时间：2022-02-09 05:45

　　试验研究复合酶法辅助超声提取桑叶中总黄酮的工艺。研究先以芦丁为对照品,比较了盐酸-镁粉法、NaNO₂-Al（NO₃）₃-NaOH法、AlCl₃法3种络合方法对桑叶总黄酮的适应性;选用Plackett-Burman试验设计对9个单因素进行筛选,确定了具有显著性影响的3个因素,再根据Box-Behnken试验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,以桑叶总黄酮得率为响应值进行回归分析。结果表明:AlCl₃法对桑叶总黄酮适应性最佳;最佳工艺条件为:复合酶比1:1（w/w）、用酶量为1.0%、pH值为5.0、酶解时间50 min、酶解温度50℃、乙醇浓度71%、超声功率225 W、超声温度60℃、超声时间33 min。在此条件下,桑叶总黄酮得率为27.76 mg/g。优选的提取工艺稳定可行、得率高,为桑叶的深入研究提供参考。 

【文章来源】：饲料研究. 2020,43(08)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

桑叶总黄酮含量测定方法筛选

乙醇浓度对总黄酮得率的影响（见图2f）。随着乙醇浓度的增加，溶剂极性的降低，总体上黄酮得率提高，当浓度达到70%时得率达27.09 mg/g。浓度超过70%得率有所下降。这可能是随着极性的降低，醇溶性物质的溶出会增加，对黄酮类可能会产生竞争性抑制作用而降低黄酮类化合物的得率[16]。超声功率对总黄酮得率的影响（见图2g）。随着超声功率的增加，得率显著升高，当超声功率达到200 W时，得率达到21.53 mg/g。随着超声功率继续增大得率无明显上升。超声可刺激小气泡的形成，气泡受到快速绝热压缩和膨胀，造成局部温度和压力迅速加大，导致细胞壁破裂。当超声功率不高时，分子运动不剧烈，超声对细胞壁的破坏作用不显著，得率增加不明显。随着超声功率不断增加，分子运动加剧，细胞膜破碎程度加大，桑叶总黄酮得率也随之升高。当胞壁壁破碎到达一定程度，超声功率的继续增大，一些最先溶于水的物质反而有可能影响总黄酮的得率。

由图3可知，超声时间和乙醇浓度（见图3a）、乙醇浓度和超声功率（见图3b）对黄酮得率的影响较显著。乙醇浓度可直接影响溶剂的整体极性，而超声吸收则跟溶剂的介电常数相关，超声吸收随乙醇溶液中含水量的减少而减少[18]。进一步表明试验因素对曲面响应值是一种非线性关系。2.4.3 总黄酮最佳提取工艺条件的验证

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3616471