微小隐孢子虫TSP4蛋白质通过硫化肝素介导子孢子对肠上皮细胞的黏附
发布时间：2022-02-10 14:49
微小隐孢子虫可以感染人和其他多种哺乳动物,造成世界范围的水源性爆发。对免疫缺陷病人及五岁以下儿童危害尤其严重,甚至威胁其生命安全。目前对微小隐孢子虫病还没有有效的预防和治疗方法。因此,寻找微小隐孢子虫黏附及入侵宿主细胞相关的分子成为研究的关键。已有研究表明含有TSP1结构域的血小板反应蛋白家族（TSP蛋白家族）在顶复门原虫与宿主相互作用的过程中扮演重要角色,可能成为预防或治疗隐孢子虫病的候选蛋白。本文选取微小隐孢子虫TSP4蛋白质作为研究对象,对该蛋白质进行鉴定并对其黏附功能进行研究。通过对微小隐孢子虫TSP4蛋白质进行生物信息学分析,选取特异性和免疫原性好的片段合成多肽:89KIKKADSWQEC99,通过MBS偶联法将多肽偶联到KLH以及BSA载体蛋白上。利用TSP4-KLH作为免疫原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,以TSP4-BSA作为检测抗原筛选针对TSP4多肽的单克隆抗体,并鉴定单克隆抗体的亚型。提取卵囊,子孢子以及虫体入侵HCT-8细胞不同时期的RNA进行荧光定量PCR,分析其转录情况。通过Western blot对虫体天然蛋白质的表达情况进行验证,然后利用间接免疫荧光...
【文章来源】：吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
微小隐孢子虫TSP4蛋白图示
20图 1.2 TSP4 swissmodel.expasy.org 及 iedb.org 分析结果红色括号和箭头所指示为选择的多肽区域，方框为 B 细胞表位预测值Fig. 1.2 Analysis of TSP4 by swissmodel and iedb.orgThe red bracket and arrow indicate the selected peptide region, the box is the B cellepitope predicted1.3.2 Peptide-BSA 的偶联采用 MBS 方法将多肽片段偶联到载体蛋白 BSA 上，用 10% SDS-PAGE 鉴定偶联情况。Peptide-BSA 用于检测抗体效价，如图 1.3 所示，迁移率的变化代
图 1.3 Peptide-BSA 的偶联Fig. 1.3 Conjugate of the Peptide-BS对血清抗体效价的检测免疫 BALB/c 小鼠，以 Peptide-BSA /c 小鼠第三次免疫后的血清进行效价标为血清稀释倍数。免疫前的血清作满足（OD 实验组-OD 空白组）/（O
【参考文献】：
博士论文
[1]恶性疟原虫和弓形虫肝素结合蛋白质组的比较分析[D]. 张岩.吉林大学 2013
本文编号：3619041
【文章来源】：吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
微小隐孢子虫TSP4蛋白图示
20图 1.2 TSP4 swissmodel.expasy.org 及 iedb.org 分析结果红色括号和箭头所指示为选择的多肽区域，方框为 B 细胞表位预测值Fig. 1.2 Analysis of TSP4 by swissmodel and iedb.orgThe red bracket and arrow indicate the selected peptide region, the box is the B cellepitope predicted1.3.2 Peptide-BSA 的偶联采用 MBS 方法将多肽片段偶联到载体蛋白 BSA 上，用 10% SDS-PAGE 鉴定偶联情况。Peptide-BSA 用于检测抗体效价，如图 1.3 所示，迁移率的变化代
图 1.3 Peptide-BSA 的偶联Fig. 1.3 Conjugate of the Peptide-BS对血清抗体效价的检测免疫 BALB/c 小鼠，以 Peptide-BSA /c 小鼠第三次免疫后的血清进行效价标为血清稀释倍数。免疫前的血清作满足（OD 实验组-OD 空白组）/（O
【参考文献】：
博士论文
[1]恶性疟原虫和弓形虫肝素结合蛋白质组的比较分析[D]. 张岩.吉林大学 2013
本文编号：3619041
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3619041.html
