复方中药筛选及其对不同源大肠杆菌的体外抑菌效果探索

发布时间：2022-02-17 19:41

　　禽大肠杆菌病是严重危害养禽业的细菌病之一,主要依赖于抗生素防治,但大肠杆菌极易产生耐药性,且其耐药性可在人和动物间传播,对人类健康和公共卫生安全造成了巨大危害。超级大肠杆菌的发现和多重耐药菌株的不断报道为世界敲响了警钟,为此很多国家禁止在动物饲料中长期添加抗生素,寻找抗生素替代品已迫在眉睫。中药作为传统医药,广泛应用于疾病治疗,在抗菌功效方面存在协同、相加等关系,且其抑菌效果因大肠杆菌分离株不同而存在差异。为了明确中药抑菌效果与大肠杆菌分离株间的关系,本论文基于不同源大肠杆菌的特性（耐药基因和毒力基因携带情况、系统进化群）研究了单味中药和组方药的抑菌效果,并就分离株特性与中药抑菌效果间的关系进行了探讨,以期为中药抗菌治疗的研究奠定理论基础。首先,本研究从昆明市农贸市场鸡肝、花鸟市场虎皮鹦鹉粪样和昆明动物园孔雀粪样中分离鉴定了大肠杆菌,并对分离株的12种毒力基因和22种耐药基因的携带情况进行检测。其次,根据不同来源（包括保存的致病菌株）分离株特性,从中筛选出30株大肠杆菌,采用二倍稀释法测定了18种中药醇提成份的最小抑菌浓度,利用棋盘法测定了联合中药的抑菌效果,并自拟了2种组方。最后,本... 

【文章来源】：西南林业大学云南省

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
1 前言
    1.1 禽大肠杆菌病的研究概况
        1.1.1 病原研究
        1.1.2 流行病学
        1.1.3 发病机理
        1.1.4 临床症状及病理变化
        1.1.5 诊断及其防治
    1.2 禽致病性大肠杆菌对抗生素的耐药性研究
        1.2.1 禽致病性大肠杆菌的耐药现状
        1.2.2 禽致病性大肠杆菌的耐药机制研究表
    1.3 中兽药对禽大肠杆菌病防治概况
        1.3.1 中兽医学的发展历史
        1.3.2 中兽药的优势特点
        1.3.3 中兽药治疗禽大肠杆菌病的辨证论治
        1.3.4 常用治疗禽大肠杆菌的药物及分类
        1.3.5 中兽药对禽源大肠杆菌的抑菌作用
        1.3.6 中兽药对大肠杆菌耐药性的消除作用
        1.3.7 中兽药对禽源大肠杆菌病的防治
    1.4 本研究的主要内容、技术路线、目的及意义
        1.4.1 本研究的主要内容
        1.4.2 本研究的技术路线
        1.4.3 本研究的目的及意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 菌株来源
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 中药
        2.1.4 主要仪器设备
    2.2 试验方法
        2.2.1 大肠杆菌分离鉴定
        2.2.2 大肠杆菌毒力基因及耐药基因扩增引物
        2.2.3 抗菌单味中药的筛选
        2.2.4 中药联合抑菌试验
        2.2.5 复方中药的组合
        2.2.6 中药敏感性测定
        2.2.7 单味药及复方中药最小抑菌浓度的测定
        2.2.8 大肠杆菌系统进化群引物及系统分群标准
        2.2.9 大肠杆菌基因携带数量、模式与中药抑菌效果间的相关性
3 结果与分析
    3.1 大肠杆菌的分离鉴定
        3.1.1 大肠杆菌检出率
        3.3.2 大肠杆菌形态学鉴定及生化鉴定
        3.3.3 大肠杆菌分子鉴定
    3.2 大肠杆菌毒力基因和耐药基因检测情况
        3.2.1 大肠杆菌毒力基因PCR检测情况
        3.2.2 大肠杆菌耐药基因PCR检测情况
    3.3 抗菌单味中药的筛选
        3.3.1 禽源大肠杆菌的筛选
        3.3.2 MIC测定及联合抑菌试验中药和菌株的筛选
    3.4 两味中药联合的FIC测定
    3.5 复方中药的组合及最小抑菌浓度测定
    3.6 复方中药敏感性及最小抑菌浓度测定
        3.6.1 中药敏感性测定
        3.6.2 单味药及复方一最小抑菌浓度测定
    3.7 不同来源分离株毒力基因及耐药基因携带模式分析
        3.7.1 不同来源分离株毒力相关基因携带模式分析
        3.7.2 不同来源分离株耐药基因携带模式分析
    3.8 分离株携带基因数量、模式与中药抑菌效果间的相关性
        3.8.1 分离株携带基因数量与中药抑菌效果间的相关性
        3.8.2 分离株基因携带模式与中药抑菌效果间的相关性
        3.8.3 分离株携带基因数量/指数与中药抑菌效果间的相关性
    3.9 分离株系统进化群
4 讨论
    4.1 大肠杆菌的分离鉴定
    4.2 大肠杆菌毒力基因和耐药基因的流行特征
        4.2.1 大肠杆菌毒力基因的流行特征
        4.2.2 大肠杆菌耐药基因的流行特征
    4.3 抗菌单味中药筛选及复方中药的组合
        4.3.1 菌株的筛选
        4.3.2 两味中药联合及中药组方
        4.3.3 中药敏感性
    4.4 中药的抑菌效果与菌株所携带的毒力基因和耐药基因之间的相关性
    4.5 大肠杆菌系统进化群与菌株研究特性的相关性
5 结论
参考文献
附录
个人简介
导师简介
获得成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]中药复方对雏鸡大肠杆菌病受损脏器治疗效果[J]. 于苗苗,姜晓文,于文会,李子佳,黄慧,王海彬.  黑龙江畜牧兽医. 2018(03)
[2]阜新某鸡场大肠埃希菌四环素类药物敏感性试验及耐药基因检测[J]. 张雅为,高锋,刘耀川,朱江巍,魏澍,王军,赵培,赵晓彤,顾贵波.  动物医学进展. 2017(10)
[3]5种中药对大肠杆菌的抑菌作用[J]. 曾范利,吴胜奎,孙江洋,石金凤,宗颖,时坤,李健明,赵丹,杜锐.  经济动物学报. 2018(03)
[4]一种防治鸡大肠杆菌病的中药复方的筛选[J]. 曹礼静,袁丽花,廖开燕.  中国兽医杂志. 2017(07)
[5]中药消除致病性大肠杆菌耐药性的研究[J]. 韦嫔,谭艾娟,吕世明,王学君.  江苏农业科学. 2017(11)
[6]鸡源大肠杆菌的分离鉴定及耐药特性分析[J]. 吴海滨,杨娟,周杰珑,吴培福.  黑龙江畜牧兽医. 2017(10)
[7]中药复方制剂治疗桃源鸡大肠杆菌病的试验[J]. 张保平,李娜.  天津农业科学. 2017(03)
[8]山东省鸡源性大肠杆菌耐药变化趋势监测[J]. 冯敏燕,傅剑,杨世发,林树乾,赵增成,李桂明,黄中利,李颖,刘宁,宋敏训.  中国兽医学报. 2017(02)
[9]四川省猪、鸡源大肠杆菌对抗生素耐药性研究[J]. 岳秀英,葛荣,吴晓岚,陆强,孙吉,宁宜宝,邹立扣.  中国兽医杂志. 2017(01)
[10]蒲公英等五种中草药不同组合体外大肠杆菌抑菌效果比较[J]. 金三俊,杨月月,王玉姣,董佳琦,任红立,汪晶晶,刁新平.  饲料博览. 2016(10)

硕士论文
[1]复方中草药超微粉防治鸡致病性大肠杆菌病的研究[D]. 张召兴.河北科技师范学院 2017
[2]河南省部分地区鸡大肠杆菌病流行病学、耐药性及防治研究[D]. 冯小旭.河南科技大学 2017
[3]抗大肠杆菌复方中药的筛选及其对大肠杆菌感染小鼠肠道结构和微生物的影响[D]. 张钊.山西农业大学 2016
[4]章丘地区鸡源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析[D]. 张水晶.山东农业大学 2016
[5]合肥地区鸡源大肠杆菌耐药性检测及相关耐药基因研究[D]. 汪莹.安徽农业大学 2016
[6]鸡源与人源大肠杆菌主要耐药基因检测及其传递规律分析[D]. 王影.吉林农业大学 2016
[7]禽大肠杆菌分离、鉴定及三价灭活疫苗的研制[D]. 黄秋月.山东农业大学 2015
[8]泰安地区鸡源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析[D]. 宿志民.山东农业大学 2015
[9]中药制剂复方银翘口服液制备工艺研究[D]. 傅剑.山东农业大学 2015
[10]禽源大肠杆菌质粒介导氟喹诺酮类耐药基因的检测及中药消除耐药性研究[D]. 李栋.扬州大学 2015



本文编号：3629996