表达水疱性口炎病毒G蛋白重组新城疫病毒的研究

发布时间：2022-08-23 17:01

　　水疱性口炎（Vesicular stomatitis, VS）是由水疱性口炎病毒（VSV）引起的急性、人兽共患的病毒性传染病。由于其传播性强、对多种动物及人都具有感染性且传播性强,可严重影响多种家畜健康及畜产品的产量和质量,对畜牧业造成了巨大的损失；VSV也是人类健康的隐形杀手之一,可引发其他疾病的继发感染,威胁人类健康。OIE将VS列为法定必须通报传染病,我国将VS列为国家级动物检疫二类疫病,而且尚无有效的针对VSV的商品化疫苗。因此,对VS新型疫苗的探索和研究,对防制VS侵入我国、保障畜牧公共生产安全及促进生物基础研究均具有重要价值。 VSV是典型的弹状病毒,为单股负链RNA病毒,属于弹状病毒科（Rhabdoviridae）、水疱病毒属Vesiculovirus),其代表株为新泽西（New Jersey, NJ）和印第安纳（Indiana, IN）株。VSV基因组主要编码N-P-M-G-L5个结构蛋白,其中位于病毒粒子囊膜中的G蛋白（GP）是其最主要的免疫原性蛋白,它不仅可以诱导机体产生特异性的中和抗体,而且可诱发机体细胞免疫应答及干扰素的产生,从而使动物体产生对抗VSV的有... 

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
图目录
英文缩略表
第一章 文献综述
    1.1 水疱性口炎及其疫苗现状
        1.1.1 水疱性口炎流行特点及流行现状
        1.1.2 水泡性口炎致病机理及发病特征
        1.1.3 水疱性口炎的诊断与防控措施
        1.1.4 水疱性口炎疫苗的现状
    1.2 水疱性口炎病毒的分子生物学特性
        1.2.1 VSV的形态特征及基因组结构
        1.2.2 水疱性口炎的病原特性
        1.2.3 VSV的主要免疫原
        1.2.4 VSV GP的结构特点及功能
    1.3 NDV作为疫苗载体的应用及研究进展
        1.3.1 NDV载体系统的构成
        1.3.2 NDV作为疫苗载体的优势
        1.3.3 NDV重组疫苗的安全性评估
        1.3.4 NDV载体在新型疫苗研制中的应用
        1.3.5 NDV载体的发展前景
    1.4 研究的目的及意义
第二章 实验材料、方法及结果
    2.1 材料
        2.1.1 病毒株与细胞系
        2.1.2 质粒
        2.1.3 鸡胚、实验动物和高免血清
        2.1.4 主要试剂及仪器
    2.2 方法
        2.2.1 VSV G基因的序列扩增及分析
        2.2.2 表达VSV-GP的重组NDV基因组cDNA的构建
        2.2.3 重组病毒的拯救及RT-PCR鉴定
        2.2.4 VSV-GP的表达鉴定及细胞定位
        2.2.5 rLa-VSV-G的致病性分析
        2.2.6 rLa-VSV-G的鸡胚生长动力学特征分析
        2.2.7 rLa-VSV-G在小鼠中安全性试验
        2.2.8 rLa-VSV-G在小鼠中免疫效力检测
    2.3 结果
        2.3.1 VSV-G基因的序列扩增及分析
        2.3.2 表达VSV-GP的重组NDV基因组cDNA克隆的构建及重组病毒的拯救
        2.3.3 rLa-VSV-G的RT-PCR鉴定
        2.3.4 VSV-GP的表达鉴定及细胞定位
        2.3.5 rLa-VSV-G的致病性分析
        2.3.6 rLa-VSV-G的鸡胚生长动力学特征分析
        2.2.7 rLa-VSV-G在小鼠中安全性试验
        2.3.8 rLa-VSV-G对小鼠的免疫实验
第三章 讨论
第四章 全文结论
参考文献
附录
致谢
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]The nucleocapsid of vesicular stomatitis virus[J]. LUO Ming Department of Microbiology, the University of Alabama at Birmingham, Birmingham 35294, USA.  Science China（Life Sciences）. 2012(04)
[2]新城疫病毒反向遗传技术的研究进展[J]. 王延树,尤永君,段占起.  中国家禽. 2009(23)
[3]新城疫病毒载体研究进展[J]. 孙玉章,母连志,丁壮.  动物医学进展. 2009(11)
[4]新城疫病毒反向遗传载体的构建及其外源基因表达的研究进展[J]. 曹军平,胡顺林.  黑龙江畜牧兽医. 2009(01)
[5]水疱性口炎研究进展[J]. 孙洪正,徐自忠,周晓黎,董俊,花群义,高洪,范晴,江海天.  动物医学进展. 2007(10)
[6]水泡性口炎的发病机理与防制[J]. 张煜,苏建青,褚秀玲,成军,高丰.  安徽农业科学. 2007(24)
[7]新城疫病毒的分子生物学及应用研究进展[J]. 周伦江,庄向生,陈少莺.  中国家禽. 2006(20)
[8]水疱性口炎病毒糖蛋白基因的克隆和表达[J]. 孙成群,彭金美,吴东来,童光志,仇华吉,孔宪刚.  中国预防兽医学报. 2005(04)

硕士论文
[1]水疱性口炎病毒印第安纳株反向遗传操作系统的建立及重组病毒的构建[D]. 温志远.内蒙古农业大学 2006



本文编号：3678149