牛分枝杆菌PPE13促进IL-1β分泌的作用机制研究
发布时间:2022-09-17 12:42
牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis,M.bovis)是一种革兰氏阳性胞内寄生菌,可通过呼吸道等途径感染哺乳动物引起牛结核病。随着HIV和分枝杆菌并发性感染及耐药性菌株不断的出现,针对耐药性结核病的诊疗变得越来越困难。因此,分枝杆菌致病分子机制的基础研究对诊断和治疗结核病显得尤为重要。已有研究证实在牛分枝杆菌感染宿主细胞过程中,PE/PPE家族成员发挥了重要作用,被认为是细菌毒力和抗原变移的主要来源。为了研究PPE13蛋白在牛分枝杆菌感染宿主细胞中的作用,本研究首先通过基因克隆技术在无致病性的耻垢分枝杆菌中构建了PPE13表达菌株(MsPPE13)。首先采用PCR技术扩增ppe13基因片段,克隆至载体p MN437中,进而电转至耻垢分枝杆菌中,经Western blotting验证PPE13蛋白可在耻垢分枝杆菌中表达,并且位于细胞壁中。细菌体外生长试验发现PPE13的表达不影响耻垢分枝杆菌在体外的生长。我们用表达PPE13的重组耻垢分枝杆菌MsPPE13感染小鼠巨噬细胞,发现PPE13虽然不影响耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活,但...
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
第一部分 文献综述
1 牛分枝杆菌概述
2 牛结核病发生及流行
3 牛分枝杆菌致病力
4 牛分枝杆菌PE/PPE蛋白家族
5 促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α
6 炎症复合体NLRP3
7 研究目的及意义
第二部分 试验研究
第一章 PPE13在耻垢分枝杆菌中表达的重组菌株构建
1 材料与仪器
2 试验方法
3 试验结果
4 小结与讨论
第二章 牛分枝杆菌PPE13促进IL-1β的分泌
1 材料与仪器
2 试验方法
3 试验结果
4 小结与讨论
第三章 牛分枝杆菌PPE13促进炎症复合体NLRP3的活化
1 材料与仪器
2 方法
3 试验结果
4 小结与讨论
全文总结
参考文献
附录Ⅰ 中英文对照
附录Ⅱ 试验所需引物
个人简介
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]颗粒显色指示技术快速检测结核分枝杆菌对吡嗪酰胺耐药性的价值[J]. 王冬敏,林健雄,彭东东,李进展,李耿聪,李鸿槟,陈蕊明. 中国防痨杂志. 2011(09)
本文编号:3679245
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
第一部分 文献综述
1 牛分枝杆菌概述
2 牛结核病发生及流行
3 牛分枝杆菌致病力
4 牛分枝杆菌PE/PPE蛋白家族
5 促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α
6 炎症复合体NLRP3
7 研究目的及意义
第二部分 试验研究
第一章 PPE13在耻垢分枝杆菌中表达的重组菌株构建
1 材料与仪器
2 试验方法
3 试验结果
4 小结与讨论
第二章 牛分枝杆菌PPE13促进IL-1β的分泌
1 材料与仪器
2 试验方法
3 试验结果
4 小结与讨论
第三章 牛分枝杆菌PPE13促进炎症复合体NLRP3的活化
1 材料与仪器
2 方法
3 试验结果
4 小结与讨论
全文总结
参考文献
附录Ⅰ 中英文对照
附录Ⅱ 试验所需引物
个人简介
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]颗粒显色指示技术快速检测结核分枝杆菌对吡嗪酰胺耐药性的价值[J]. 王冬敏,林健雄,彭东东,李进展,李耿聪,李鸿槟,陈蕊明. 中国防痨杂志. 2011(09)
本文编号:3679245
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