胞内劳森菌IPMA抗体检测方法的建立及猪源性胞内劳森菌在小鼠体内的复制

发布时间：2022-09-17 13:22

　　猪增生性肠炎（porcine proliferative enteritis,PPE）,又叫回肠炎,发生于生长和育肥阶段的猪,是一个重要的传染性肠道疾病。它是一种传染性肠道疾病,能引起猪生长发育阻滞,PPE由胞内劳森菌（lawsonia intracellularis,LI）引起,主要感染部位为猪的回肠和结肠,引起这些部位粘膜的增厚,进而造成养猪业料肉比下降而造成重大经济损失。胞内劳森菌是由三层波状的胞膜结构组成,以二分裂方式在回肠上皮细胞胞浆内复制,一般弯曲状、逗点状或S形,革兰氏染色阴性,严格胞内寄生。目前国内对胞内劳森菌临床感染情况的相关研究报道不多,有必要对LI引发的PPE进行进一步研究。现将本文研究内容简述如下：1胞内劳森菌IPMA抗体检测方法的建立及应用本试验探索并建立了胞内劳森菌IPMA抗体检测方法,摸索了该方法的最佳HRP-Protein A工作浓度为1：2000,最佳孵育时间为1h,底物显色最佳时间为15mmin。该方法特异性好、敏感性强、操作流程方便,适用于胞内劳森菌抗体的检测。为LI疫苗免疫效果的评价、流行病学调查及相关检疫提供了一种技术手段。2上海地区规模化养猪... 

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号说明
第一篇 文献综述
    第一章 胞内劳森菌研究进展
        1 胞内劳森菌
            1.1 胞内劳森菌的形态、分类与生长特性
            1.2 胞内劳森菌的致病性与致病机理
        2 猪增生性肠炎
            2.1 猪增生性肠炎的流行病学
            2.2 猪增生性肠炎的诊断与防控
        3 免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)方法简介
        4 总结与展望
        参考文献
第二篇 试验研究
    第二章 胞内劳森菌IPMA抗体检测方法的建立
        摘要
        Abstract
        1 材料与试剂
        2 方法与步骤
            2.1 胞内劳森菌IPMA抗体检测方法的建立
            2.2 IPMA的特异性、敏感性、重复性试验
        3 结果
            3.1 IPMA反应条件的确定
            3.2 IPMA特异性、敏感性、重复性试验
        4 讨论
        参考文献
    第三章 上海地区规模化养猪场PPE感染情况初探
        摘要
        Abstract
        1 材料与仪器
            1.1 标准菌株及检测样本
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器设备
            1.4 引物设计、合成及稀释
        2 材料与方法
            2.1 方法步骤
        3 结果
        4 讨论
        参考文献
    第四章 猪源性胞内劳森菌在小鼠体内的复制
        摘要
        Abstract
        1 材料与试剂
            1.1 试验材料
            1.2 试验动物
            1.3 主要试剂及配方
            1.4 主要仪器及设备
        2 方法与步骤
            2.1 试验动物的分组
            2.2 病料的处理及接种方式
            2.3 饲养与数据采集
            2.4 样本核酸的提取
            2.5 胞内劳森菌常规PCR方法
            2.6 免疫荧光检测
        3 结果与分析
        4 小结与讨论
        参考文献
全文总结
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]猪增生性肠炎的研究现状[J]. 陈彤,黄仁美.  福建畜牧兽医. 2010(03)
[2]猪胞内劳森菌16SrRNA基因的克隆及序列分析[J]. 谢丽华,张宁,何苹萍,李茂宁,尹业师,韦英益,肖爱欢,黄伟坚.  中国兽医学报. 2009(08)
[3]猪增生性肠炎模型的建立及其病理学研究[J]. 韦英益,肖爱欢,谢丽华,杨乃欢,黄伟坚,王进声.  黑龙江畜牧兽医. 2009(15)
[4]国外猪增生性肠炎诊断方法研究进展[J]. 唐娜,沈志强,管宇,王金良.  养猪. 2009(03)
[5]猪增生性肠病的流行病学及防控[J]. 余华,陈世界,严玉宝,胡娟.  兽医导刊. 2008(11)
[6]胞内劳森菌与猪增生性肠炎的研究进展[J]. 王元凯,严亚贤.  中国兽医科学. 2008(06)
[7]上海地区猪增生性肠炎的血清学调查[J]. 刘佩红,王建,沈莉萍,徐锋,赵洪进.  动物医学进展. 2007(09)
[8]PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用[J]. 谭斌,刘长明,危艳武,张超范,刘永刚,冉多良.  中国兽医科学. 2006(11)
[9]华南五省区猪增生性肠炎的血清学调查[J]. 黄忠,宋长绪,王浩文,方树河.  中国兽医科学. 2006(09)



本文编号：3679302