GDF9对绵羊卵丘细胞增殖的影响

发布时间：2023-02-13 14:44

　　本试验旨在探究生长分化因子9(GDF9)对卵丘细胞扩展相关基因和激素受体基因表达量及激素分泌的影响,为GDF9在绵羊卵泡发育中的作用提供依据。以绵羊卵丘细胞为研究对象,通过在低血清细胞培养液中添加不同浓度(0、50、100、200、400 ng/mL)的GDF9,培养绵羊卵丘细胞48 h后,提取细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR技术,以β-actin为内参基因,检测卵丘细胞扩展相关基因透明质酸合酶2(HAS2)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、穿透素3(PTX3)及激素受体相关基因卵泡刺激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)和雌激素受体(E₂R)的mRNA相对表达量;利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中卵丘细胞分泌的雌二醇(E₂)和孕酮(P₄)含量。结果显示:在细胞培养液中添加200 ng/mL GDF9时,HAS2、PTX3、FSHR、E₂R和LHR的mRNA相对表达量极显著高于对照组与其他处理组(P<0.01);PTGS2 mRNA相对表达量极显著高于对照组、5...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂及GDF9浓储液配制
    1.2 主要仪器
    1.3 方法
        1.3.1 卵丘细胞收集及培养
        1.3.2 卵丘细胞消化传代
        1.3.3 细胞处理
        1.3.4 细胞RNA提取
        1.3.5 引物设计与合成
        1.3.6 实时荧光定量PCR
        1.3.7 酶联免疫(ELISA)检测
    1.4 统计分析
2 结 果
    2.1 GDF9对绵羊卵丘细胞扩展相关基因表达量的影响
    2.2 GDF9对绵羊卵丘细胞激素受体基因表达量的影响
    2.3 GDF9对绵羊卵丘细胞分泌E2、P4的影响
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3741914